抗肝癌细胞噬菌体单链抗体库的构建及筛选

构建抗人肝癌细胞单链抗体库 ,从中筛选与肝癌细胞特异结合的高亲和力单链抗体。从HepG2细胞免疫的BALB/c小鼠脾脏提取总RNA ,RT PCR扩增小鼠抗体重、轻链可变区基因 ,用 (Gly4Ser) 3 连接肽基因 ,经重叠延伸反应 ,在体外将VH 和VL 连接成单链抗体 (scFv)基因 ,并克隆入噬菌粒载体pCANTAB5E中 ,构建噬菌体单链抗体库。以HepG2细胞为抗原对抗体库进行淘选 ,ELISA法鉴定各单克隆与肝癌细胞的结合活性 ,并对阳性克隆进行表达。成功构建了库容为 1 1× 10 6抗肝癌细胞的噬菌体单链抗体库 ,经筛选得到了与HepG2细胞具有较强结合能力的单链抗体 ,实现了scFv在大肠杆菌中的可溶性表达。序列测定结果表明 ,VH 和VL 基因符合小鼠抗体可变区特征 ,scFv基因拼接正确     

吡格列酮对脂质灌注大鼠糖代谢和PPAR-γ表达的影响

目的：探讨吡格列酮 (Pio) 对游离脂肪酸诱导的胰岛素抵抗大鼠糖代谢和PPAR-γ表达的影响。方法:采用扩展正糖钳夹实验和［3-3H］标记葡萄糖示踪技术，观察了4 h脂质灌注导致大鼠血浆游离脂肪酸（FFA）升高引起糖代谢和脂肪组织PPAR-γ表达变化及Pio处理后的影响。 结果:在钳夹稳态期，对照组（N组）血浆FFA水平明显降低，而脂质灌注组（L组）和吡格列酮+脂质组（P/L组）FFA水平明显升高。 P/L组葡萄糖输注率(GIR)较N组明显降低（P<0.01）, 而L组又明显低于P/L组（P<0.01）；N组和P/L组肝糖输出 (HGP) 与基础值相比被明显抑制达85%（均P<0.01），在L组，胰岛素对HGP的抑制作用受到明显障碍（仅抑制8.7%）。L组和P/L组葡萄糖清除率（GRd）明显低于N组（P<0.01）。P/L组脂肪组织PPAR-γ表达明显增加。 结论:脂质灌注诱导了大鼠胰岛素抵抗。吡格列酮干预使大鼠脂肪组织PPAR-γ表达明显增加，并抑制了内源性肝糖产生，从而部分逆转了脂质诱导的胰岛素抵抗。     

肝细胞增殖因子促进受损肝细胞增殖的可能机制

目的： 探讨肝细胞增殖因子（ALR）促进受损肝细胞增殖的可能机制。方法: 采用细胞增殖试验（MTT法）观察经ALR刺激的大鼠肝枯否细胞(KC)的条件培养液(KCCM+)对受损肝细胞增殖的影响，同时用免疫组织化学方法检测正常大鼠肝脏组织中ALR的分布、大鼠枯否细胞膜表面结合的ALR以及ALR对枯否细胞IL-6表达的影响。结果: 受损肝细胞经枯否细胞条件培养液刺激后增殖明显。正常大鼠肝细胞内可表达合成ALR，枯否细胞膜表面可见ALR免疫反应颗粒，经ALR刺激后枯否细胞IL-6免疫反应信号增强。结论: ALR可能通过首先刺激枯否细胞，从而促进受损肝细胞增殖。     

脐疝疝囊破裂致肠管脱出1例

女婴 ,４０ｄ,以“发热腹泻３ｄ,腹胀１ｄ”入院。无诱因发热 ,高达３９℃ ,伴腹泻 ,黄色水样大便 ,日１０余次 ,量中 ,服“保婴丹”后体温在３８℃左右 ,１ｄ前出现腹胀 ,哭闹不安 ,吮乳时可安静。无流涕咳嗽 ,无呕吐、抽搐 ,无脓血便 ,尿量少。查体 :ｔ３８．４℃ ,Ｐ１３０ｍｉｎ-１ ,Ｒ３６ｍｉｎ-１ ,Ｗ５ｋｇ,贫血貌 ,眉心处有 -１ｃｍ×１ｃｍ皮肤溃烂 ,无脓性分泌物 ,前囟２ｃｍ×２ｃｍ稍凹陷 ,双肺呼吸音清 ,心率１３０ｍｉｎ-１,律齐 ,心音有力 ,无杂音。腹部膨隆 ,质软 ,无包块 ,肝脾不大 ,肠鸣音活跃。辅助检查 :血常规Ｈｂ８…     

基于预防接种异常反应补偿的山东省卡介苗淋巴结炎经济负担测算

目的了解山东省卡介苗(BCG)淋巴结炎经济负担情况。方法以2011年5月至2019年12月山东省304例申请省级补偿的BCG淋巴结炎病例为对象,收集患者基本情况、预防接种相关情况、门诊(住院)病历和收费票据等相关资料,对其直接经济负担(包括直接医疗费用和直接非医疗费用)、间接经济负担和总经济负担进行测算,比较不同特征病例经济负担的差异。结果304例BCG淋巴结炎患者月龄的M(Q1,Q3)为3(2,4)月,其中男性239例(78.6%),淋巴结破溃71例(23.4%),手术227例(74.7%)。单纯门诊、单纯住院和门诊后住院病例分别占25.7%(78例)、7.2%(22例)和67.1%(204例)。贴现后单例直接、间接和总经济负担的M(Q1,Q3)分别为9910(5713,16074)、2081(1547,3122)和12262(7694,18571)元。直接医疗费用占直接经济负担的89.4%,直接经济负担占总经济负担的84.9%,80.0%病例的总经济负担仅占其补偿金额的20.0%左右,只有2.3%的病例总经济负担占补偿金额的60.0%以上。单纯住院和门诊后住院病例的直接、间接和总经济负担高于单纯门诊病例,手术病例的直接、间接和总经济负担高于非手术病例,淋巴结未破溃病例的直接和总经济负担高于破溃病例(均P<0.05)。结论山东省BCG淋巴结炎病例经济负担受诊疗方式的影响,且以直接医疗费用为主。     

支气管内平滑肌肉瘤一例

患者男 ,5 6岁 ,干部 ,因持续刺激性干咳 7个月 ,痰中带鲜血 ,伴针刺样胸痛 3ｄ ,于 1999年 8月 2 3日“以肺肿瘤待排”入院。有吸烟史 35年。每日约 30支香烟。查体 :患者呈消瘦体型 ,神志清 ,周身表浅淋巴结未扪及 ,口唇轻度紫绀。桶状胸 ,右肺 (- ) ,左肺呼吸音低 ,未闻及干湿性音 ,心脏、腹部未发现明显异常。化验检查 :血红蛋白 130ｇ/Ｌ ,红细胞 4 2× 10 12 /Ｌ ,白细胞 7× 10 19/Ｌ(Ｎ 0 78,Ｌ 0 2 2 ) ,血沉 5 9ｍｍ/ｈ。痰结核菌 (- ) ,其余化验检查未发现异常。胸部Ｘ线片 :左肺门处有 1 5ｃｍ× 1 5ｃｍ高密度团块状阴影 ,…     

经内镜食管静脉曲张的连续套扎治疗

目的 探讨六环套扎器治疗食管静脉曲张的临床疗效。方法 使用美国Wilson-Cook六环套扎器对25例肝硬化食管静脉曲张的患者行择期套扎或急诊套扎治疗。结果 急诊治疗2例,术后出血终止;择期治疗23例,术后食管静脉曲张消失率92.3%,有效率100%。结论 使用六环套扎器经内镜行食管静脉曲张的连续套扎治疗简便、快捷、安全、价廉、近期效果好。     

聚乳酸酮洛芬微球的制备及其体外释放度

制备了生物可降解的材料聚乳酸,用粘度法测定其分子量,并选用Ａ、Ｂ、Ｃ三种不同分子量的聚乳酸为药物的载体,制备了酮洛芬微球（ＡＳ,ＢＳ,ＣＳ）,测定其粒径和体外溶出速率。结果表明催化剂四苯基锡用量增加,所得的聚乳酸分子量增加,而制备酮洛芬微球的聚乳酸分子量越大,其微球粒径越大,溶出速率越小。     

选择性输卵管造影再通术并中药治疗输卵管阻塞80 例分析

为了提高治疗输卵管阻塞的再通率,自１９９５年以来,我们为８０例患者进行了经自制同轴导管输卵管中药灌注治疗。现将结果报告如下：１　临床资料　　８０例患者,原发性不孕症３２例（夫妇同居２年以上未避孕而未能怀孕）,继发不孕症４８例（有过生育或流产,又连续２...     

固位钉光固化粘接技术的综合应用

我科自1991年以来应用固位钉光固化粘接技术修复前牙缺损56例,并进行追踪观察,现报道如下。1资料与方法本组42例,共计56颗牙齿,其中．男性28例,女性14例。均限于前牙因外伤龋坏而牙体破坏者。常规去净腐质及软化牙本质、龋损过大者,需行根管治疗后修复。切角缺损或牙冠切1／3缺损者,采用自攻自断螺纹钉加强固位。钉道做在釉牙本质交界处深约1．5～Zrnm。根管治疗后的患牙将因位钉插人根管内,磷酸锌粘固粉粘固、复合树脂修复塑形满意后、光照、调能、磨光。2疗效标准良好：牙体外形好,无变色及脱落、根尖区无红肿、凄管。患者自觉…