三萜皂苷Saxifragifolin D抑制人肝癌耐药细胞HepG2/ADM生长并诱导细胞凋亡作用研究

目的研究Saxifragifolin D(SD)对人肝癌耐药细胞HepG2/ADM的生长抑制及诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察SD对HepG2/ADM细胞的增殖抑制作用,应用流式细胞仪分析SD对细胞周期的影响,AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测凋亡细胞比率,JC-1染色观察SD对细胞内线粒体膜电位的影响,Western blot检测凋亡相关蛋白caspase-9,caspase-3和PARP的激活及c-Raf,MEK和ERK蛋白的表达和磷酸化水平。结果 SD可以明显抑制人肝癌耐药细胞HepG2/ADM的增殖。细胞周期检测发现SD诱导细胞产生亚二倍体凋亡峰,同时细胞凋亡率也由对照组的5.3%增加到34.8%和47.8%。线粒体膜电位检测结果显示SD导致细胞内线粒体膜电位的明显降低。Western blot检测结果表明caspase-9,caspase-3被激活,PARP被剪切活化,cytochrome C由线粒体释放至胞质,c-Raf、MEK和ERK蛋白的磷酸化水平降低。结论 SD可以抑制人肝癌耐药细胞HepG2/ADM增殖并诱导其凋亡,作用机制可能与线粒体功能障碍及抑制c-Raf/MEK/ERK通路的活化有关。     

苹果多酚对Triton WR-1339诱发的高脂血症小鼠抗氧化能力的影响

目的研究苹果多酚对Triton WR-1339诱发的高脂血症小鼠抗氧化能力的影响。方法采用苹果多酚（200、400 mg.kg-1）对NIH小鼠进行连续口服灌胃7 d,第6天尾静脉注射Triton WR-1339（300 mg.kg-1）诱导高脂血症,18 h后收集各组小鼠血清,测定总胆固醇和三酰甘油的含量及血清MDA和NO水平、SOD和GPx活性。结果苹果多酚（200、400 mg.kg-1）能明显降低高脂血症小鼠血清MDA的含量,升高NO水平,提高SOD、GPx活性。结论苹果多酚可以显著提高高脂血症小鼠的抗氧化能力。     

去乙酰化酶Sirtuins在干细胞功能调节中的作用及前景

BACKGROUND:Efficacy of stem cell therapy is considerably influenced by oxidative stress. Sirtuin (SIRT) family of mammals is an important deacetylation and antioxidant enzyme that can regulate endogenous antioxidant activities in stem cells and cell cycle related signaling pathways to reduce the damage and enhance the viability of stem cells. OBJECTIVE:To review the regulating function and mechanism of SIRT family. METHODS:A computer-based search of Web of Science, PubMed and CNKI from 1990 to 2015 was performed for relevant articles about SIRT and stem cell oxidative stress, using the key words of “SIRT, stem cell, oxidative stress, molecular mechanisms” in English and Chinese, respectively. After eliminating literatures which have poor authority or have similar contents, 55 articles were involved. RESULTS AND CONCLUSION:NAD⁺-dependent SIRT family is the key enzyme for deacetylation of histones and other proteins. It plays vital regulation roles in metabolism, genomic stability, DNA damage/repair, and chromatin remodeling/stress reaction. Progress in the SIRT-targeted stem cell research will definitely provide more clues for clinical stem cell transplantation therapy.     

金钗石斛中的菲类和木脂素类成分及其抗氧化作用

研究金钗石斛茎中的抗氧化活性成分，并探讨它们的构效关系。综合运用现代色谱学和光谱学方法对金钗石斛60％乙醇提取物中的化学成分进行分离鉴定，采用DPPH自由基清除法评价化合物的抗氧化活性。从金钗石斛的活性部位中分离得到5个菲类化合物和4个木脂素类化合物，它们的结构鉴定为流苏菲（1），毛兰菲（2），4-甲氧基菲-2，7-二醇（3），2,5-二羟基-4，9-二甲氧基菲（4），3，7-二羟基-2，4-二甲氧基菲（5），丁香脂素（6），松脂素（7），5′-甲氧基松脂素（8），鹅掌揪树脂醇-A（9）。化合物2和6对DPPH自由基清除活性强于Vc；化合物3，4，5，7，8和9的活性弱于Vc，但强于BHT。所有化合物均为首次报道从金钗石斛中分离得到，化合物3，4和9为首次报道从石斛属植物中分离得到。在DPPH自由基清除法中，酚羟基的邻位存在具有供电作用的甲氧基时对菲类和木脂素类化合物的抗氧化活性具有积极的作用。     

黄芩苷与利巴韦林联用体内外抗流感病毒作用

目的评价黄芩苷与利巴韦林联用体内外抗流感病毒作用,为其临床上联用提供实验依据。方法 CPE法和MTT法测定药物单用及联用对感染3种不同亚型流感病毒MD-CK细胞的保护效果,分别应用合并指数法(combination in-dex,CI)和MacSynergyⅡ分析法,分析黄芩苷与利巴韦林体外联用的相互作用。神经氨酸酶(NA)抑制试验测定黄芩苷对流感病毒NA活性的抑制作用。应用H1N1亚型流感病毒(FM1株)人工感染BALB/c小鼠模型,评价黄芩苷与利巴韦林联用对感染小鼠的保护作用。结果体外黄芩苷与利巴韦林联用对H1N1和H5N1病毒的抑制表现为相加作用,对H9N2病毒的抑制表现为协同作用。黄芩苷对3种亚型流感病毒NA的半数抑制浓度(IC50)在0.29～0.49 mmol.L-1范围。利巴韦林与黄芩苷联合给药与单独给药相比,提高感染小鼠的存活率,延长其存活时间。结论黄芩苷对流感病毒NA活性具有抑制作用。黄芩苷与利巴韦林在体外联用,对不同亚型流感病毒的抑制表现为相加或协同作用;二者联用对感染流感小鼠的保护效果明显优于单用。     

金钗石斛中联苄类和酚酸类成分的抗氧化活性研究

 目的研究金钗石斛体积分数60%乙醇提取物中联苄类和酚酸类成分的抗氧化活性,探讨其抗氧化活性与结构的关系。方法综合运用现代色谱学和光谱学方法对金钗石斛体积分数60%乙醇提取物中的化学成分进行分离鉴定;采用1,1-苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除法和氧自由基清除能力法两种体外活性测试方法评价分得的16个化合物的抗氧化活性。结果从金钗石斛体积分数60%乙醇提取物中分离得到3个新的联苄类化合物和13个酚酸类化合物,将它们的结构鉴定为nobilinA(1),nobilinB(2),nobilinC(3),丁香酸(syringicacid)(4),2-羟基苯丙醇(2-hydroxyphenylpropanol)(5),香草醛(vanil-lin)(6),罗布麻宁(apocynin)(7),松柏醛(coniferylaldehyde)(8),丁香醛(syringaldehyde)(9),丁香乙酮(syringylethanone)(10),对羟基苯甲醛(p-hydroxybenzaldehyde)(11),3-羟基-4-甲氧基苯乙醇(3-hydroxy-4-methoxyphenylethanol)(12),α-羟基丁香丙酮(α-hydroxysyringylethanone)(13),二氢松柏醇(dihydroxyconiferylalcohol)(14),对羟基苯甲酸(p-hydroxybenzoicacid)(15),对羟基苯丙酸(p-hydroxyphenylpropionicacid)(16)。1-二苯基-2-苄基苯肼(DPPH)法活性测试中,化合物4的活性明显强于维生素C(VitC),化合物1,2,12,14显示出弱于VitC但强于2,6-二羟丁基对甲酚(BHT)的活性,化合物3和8只显示很弱的活性;氧自由基清除能力法(ORAC)法测试结果表明,化合物2～4,7～10,15显示出强于VitC的活性,化合物12,14,16活性较弱。结论金钗石斛中的联苄类和酚酸类化合物大多具有不同程度的抗氧化活性,活性的强弱与分子结构之间存在一定的相关性。     

王老吉凉茶对应激小鼠免疫机能及体内过氧化状态的影响

目的:研究王老吉凉茶对拘束负荷诱发小鼠免疫机能低下及体内过氧化状态的影响。方法:将雄性C57BL/6小鼠分为正常对照组、拘束应激组、王老吉凉茶125,500 mg.kg-1给药组,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群、自然杀伤(NK)细胞比例、NK细胞杀伤活性,同时硫代巴比妥酸法及抗氧化能力指数(ORAC)法分别检测淋巴细胞内氧化状态及抗氧化水平。结果:与拘束应激组相比,王老吉凉茶给药可以改善拘束负荷小鼠脾脏T淋巴细胞亚群比例,增加脾脏NK细胞数,提高NK细胞杀伤活性。此外,王老吉凉茶可以明显改善拘束负荷引起的淋巴细胞内脂质过氧化反应的产物丙二醛(MDA)含量升高、提高细胞内ORAC水平。结论:王老吉凉茶改善拘束负荷诱发小鼠免疫机能低下,其作用机制可能与缓解免疫细胞内的过氧化状态有关。     

金针菇多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的探讨金针菇多糖（polysaccharides of Flammulina velutipes,FVP）对CCl4诱导的急性肝损伤的保护作用。方法小鼠腹腔注射CCl4橄榄油溶液（0.5%,5 mL.kg^-1）12、24、48、72 h后测定血清ALT,确定CCl4急性肝损伤造模最佳时间为24 h。FVP（75,150,300 mg.kg^-1）连续口服给药8 d,第7天采用CCl4制备小鼠急性化学性肝损伤模型,24 h后测定FVP对血清ALT、AST活性,肝匀浆SOD活性、MDA含量的影响。结果 FVP能显著降低CCl4致急性肝损伤小鼠血清ALT、AST活性,提高肝匀浆SOD的活性,降低MDA的含量。结论金针菇多糖对CCl4诱发的小鼠应激性肝损伤有一定的保护作用。     

蟾酥及其活性成分抗肿瘤作用研究进展

蟾酥作为一种传统中药,具有镇痛、消炎、麻醉等作用。近年来研究表明,蟾酥具有确切的抗肿瘤活性,能够诱导肿瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞的分化,还有逆转耐药性、抑制肿瘤血管形成及增强免疫的作用。本文主要就蟾酥及其活性成分抗肿瘤作用的研究进展作一综述。     

基于应激诱导潜伏Ⅰ型单纯疱疹病毒复发的“肝郁化火”证研究进展北大核心CSCD

“肝郁化火”是中医情志致病理论的核心内容之一,广泛存在于各种相关疾病的病理过程中,是情志相关病证病机转变的关键环节。然而,由于缺乏符合中医药作用特点的动物模型,严重影响了“肝郁化火”证的生物医学基础研究,限制了“疏肝泻火”等清热中药作用机制的研究进展。在研究中发现“肝郁化火”证的颜面部火热症状的部分病理过程,与情志应激诱发潜伏Ⅰ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus-1,HSV-1)的激活复发引起的头面部症状有相通之处,因此提出采用情志应激诱导潜伏HSV-1激活可以建成“肝郁化火”病证结合的动物模型。该文对近年作者课题组及国内外相关文献进行了总结和分析,从情志应激导致潜伏HSV-1复发感染角度来建立“肝郁化火”的实验动物模型,揭示“肝郁化火”病理过程中的效应分子、效应靶标与机制通路,为“肝郁化火”临床常用中药的药效表征方法提供参考和依据。