无限和有限

童年时,我家院内有一棵高大的槐树。每逢初夏,雪白的槐花挂满树梢,随风飘摆,散发着微微的清香。我常同小伙伴们坐在树下望着高树上筑巢的喜鹊,幼稚地争论着白云上面那无边的天空是什么,探讨天空为什么是蓝色的,也曾用童心自以为是地解释过什么叫做遥不可及的无限……     

铁死亡主要检测方法及其应用的研究进展

铁死亡是一种在形态学、生物化学、基因学等方面均不同于细胞凋亡、坏死、焦亡和自噬等传统细胞死亡途径的新型细胞死亡类型,其主要特征为铁累积和脂质过氧化,铁死亡的调控机制涉及铁代谢、谷胱甘肽代谢和脂质过氧化反应等方面,并与肿瘤、衰老、神经退行性疾病、缺血再灌注损伤、心脑血管疾病、肾脏损伤、肝纤维化等疾病的病理过程密切相关。如何有效研究铁死亡调控机制治疗疾病已成为铁死亡研究领域的热点。近年来,随着对铁死亡研究的深入,铁死亡的识别、确认及机制等方面的研究进展显著,用于检测铁死亡的方法不断发展且日趋成熟,形态学、生物化学、分子生物学、基因学等方面的技术已广泛应用于铁死亡的检测与研究。为进一步加深读者对铁死亡及其检测方法的认识,本文主要综述了目前常规使用的铁死亡检测方法及其应用,并对其在铁死亡检测中的优缺点进行总结和讨论。这些方法将有助于更好地理解和研究铁死亡的诱导和调控过程及其在治疗疾病中的作用。     

肌肽对溴酸钾诱发小鼠肾损伤的改善作用

目的 探讨肌肽对溴酸钾诱导小鼠肾损伤的改善作用.方法 雄性KM小鼠腹腔注射200 mg/kg溴酸钾诱发小鼠肾损伤模型,观察肌肽给药后的改善作用.采用HPLC测定小鼠血清中尿素氮(BUN)、肌酐含量及肾组织中谷胱甘肽(GSH)含量,TBARS法测定小鼠肾组织中丙二醛(MDA)含量和Griess反应法测定血浆及肾组织的一氧化氮(NO)含量,荧光酶标仪检测肌肽的体外及小鼠肾组织的抗氧化能力指数.结果 与肾损伤模型组相比,肌肽可以有效降低血清尿素氮、肌酐含量和肾组织中丙二醛含量和一氧化氮水平,提高小鼠肾组织的谷胱甘肽水平及抗氧化能力指数,但肌肽在体外实验中没有显示明显的抗氧化能力.结论 肌肽对溴酸钾诱发的小鼠肾损伤具有一定的保护作用,其作用机制不是来自肌肽的直接抗氧化作用,而是可能与缓解溴酸钾诱发的肾组织内的过氧化应激状态有关.     

二氢杨梅素对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱发小鼠肝损伤的保护作用及对中性粒细胞释放白三烯的影响

目的 研究二氢杨梅素(DMY)对痤疮丙酸杆菌与脂多糖(P.acnes-LPS)诱发小鼠肝损伤的保护作用及对小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯的影响.方法 通过对10 mg/kg P.acnes负荷5 d的小鼠iv 3μg/kg LPS建立P.acnes-LPS肝损伤模型,用酶标仪测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,RP-HPLC法测定小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯B4(LTB4)和白三烯C4(LTC4)的水平.结果 与模型组相比,125、250、500mg/kg DMY均能显著抑制由P.acnes-LPS诱发的小鼠血浆ALT活性升高,其抑制率分别为38.7%、45.1%、49.8%,并对小鼠腹腔中性粒细胞LTB4和LTC4的分泌呈剂量依赖性抑制作用.结论 DMY对P.acnes-LPS诱发小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其部分作用机制可能与抑制白三烯释放有关.     

王老吉凉茶对拘束应激负荷小鼠脾脏CTL活性的影响

目的研究王老吉凉茶(Wanglaoji Herbal Tea,WHT)对拘束应激诱发小鼠脾脏细胞毒性T细胞(CTL)活性的影响。方法将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、致敏对照、应激对照组、125及500mg/kg王老吉凉茶给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群和CTL对P815细胞杀伤活性,同时检测小鼠脾脏淋巴细胞IL-2和IL-3的表达量。结果拘束应激明显降低Th淋巴细胞亚群的比例,显著降低CTL对P815瘤细胞的杀伤活性,同时减少脾脏淋巴细胞IL-2和IL-3表达量减少。与拘束应激组相比,王老吉凉茶给药可以增加拘束负荷小鼠脾脏淋巴细胞数目,提高CTL细胞杀伤活性,并且改善IL-2和IL-3表达量。结论王老吉凉茶对拘束负荷诱发小鼠免疫机能低下有改善作用。     

拘束应激诱发小鼠抗流感病毒能力低下与营养型鸡精的改善作用

目的 探讨拘束应激诱发小鼠抗流感病毒能力低下与营养型鸡精(Essence of Chicken,EC)的改善作用.方法 将雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、病毒组、模型组(拘束应激+病毒)、阳性药物(利巴韦林,50 mg·kg-1)组、EC低、高剂量组(12,24 mL·kg-1).除正常对照组及病毒组外,其余各组在给药的第2天将小鼠拘束负荷18 h,拘束恢复1 d后,除正常组外其他各组小鼠经鼻黏膜感染流感病毒.从感染病毒当天开始连续21d,记录各组小鼠的死亡数目及小鼠的平均存活时间(MDD);计算病毒感染第4天小鼠肺脏指数;观察EC对拘束应激小鼠免疫功能的影响.结果 利巴韦林及EC能提高因拘束应激负荷降低的小鼠抗病毒感染能力,延长生存时间和改善肺脏指数.EC能增加拘束小鼠的胸腺指数、脾脏指数和脾淋巴细胞数目,改善脾淋巴细胞亚群Th(CD3+CD4+)(辅助性T淋巴细胞)/Ts(CD3+CD8+)(抑制性T淋巴细胞)的比值,提高脾自然杀伤(NK)细胞活性,从而改善拘束应激小鼠的免疫功能.结论 EC可以通过改善免疫功能来提高拘束应激小鼠的抗病毒能力.     

决明子提取物对小鼠实验性晶状体氧化应激状态的影响

目的研究决明子提取物对溴酸钾(KBrO3)/伤寒沙门氏菌脂多糖(LPS)诱发小鼠晶状体氧化应激状态的改善作用。方法小鼠尾静脉注射2 mg.kg-1LPS,同时腹腔注射200 mg.kg-1KBrO3制备小鼠晶状体氧化应激模型。50,150和450 mg.kg-1决明子提取物在LPS/KBrO3给药同时及3 h前分别灌胃2次,对照组灌胃同体积水溶液。LPS/KBrO3给药6 h后,乙醚麻醉条件下采取小鼠晶状体测定抗氧化能力指标。结果单独腹腔注射200 mg.kg-1KBrO3或尾静脉注射2 mg.kg-1LPS 6 h后,小鼠晶状体组织内谷胱甘肽(GSH)水平均有所降低,而当KBrO3并用LPS时则显著诱发小鼠晶状体氧化应激状态。50,150及450 mg.kg-1决明子提取物灌胃给药能够有效的改善因KBrO3/LPS诱导小鼠晶状体组织内GSH含量的减少、提高抗氧化能力指数(ORAC)和降低丙二醛(MDA)水平,并呈一定的量效关系。结论决明子提取物可以改善小鼠晶状体内的过氧化状态,其作用机制可能是通过清除自由基和抑制脂质过氧化过程实现的。     

四逆散传统饮片汤剂和配方颗粒对两种因素致小鼠肝损伤模型的药效比较

目的:四逆散传统汤剂和配方颗粒是在临床中同时存在的两种用药形式,本研究拟对比研究四逆散传统汤剂和配方颗粒的疏肝解郁药效作用,为四逆散配方颗粒的临床使用提供实验依据.方法:昆明种小鼠随机分为空白组、应激模型组、阳性药组、四逆散传统汤剂低、高剂量(600,1200 mg·kg-1)组、四逆散配方颗粒汤剂低、高剂量(600,1200 mg·kg-1)组共7组,每组10只.小鼠连续灌胃给药1周,实验第6天时给予小鼠一次性拘束应激18h,测定血浆丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)水平.昆明种小鼠随机分为空白组、粉刺杆菌-脂多糖(Propionibacterium acne-LPS)致肝炎模型组、阳性药组、四逆散传统汤剂低、高剂量(600,1200 mg· kg-1)组、四逆散配方颗粒汤剂低、高剂量(600,1200 mg· kg-1)组共7组,每组10只.小鼠尾静脉注射20 mg·kg-1热灭活粉刺杆菌生理盐水溶液5d后,尾静脉注射5μg· kg-1脂多糖生理盐水溶液,5h测定血浆ALT,AST水平.结果:与正常对照组相比,应激模型组和P.acnes-LPS的血浆ALT均显著增高(43.4±2.0)U·L-1vs (12.2-2.8) U·L-1,P ＜0.05;(114.9±23.3) U·L-1vs (18.8±5.2) U·L-1,P ＜0.05,AST水平也显著增高.与模型组相比,四逆散传统饮片汤剂和配方颗粒均能显著降低应激负荷和粉刺杆菌-脂多糖升高的血浆ALT和AST水平,但是两药药效没有统计学差异.结论:四逆散传统饮片汤剂和配方颗粒均有较好的保肝作用.     

扶正养肝合剂对药物性肝损伤的保护作用研究

该研究制备了对乙酰氨基酚(APAP)诱导小鼠药物性肝损伤(DILI)模型,探讨了扶正养肝合剂对DILI的保护作用和机制。小鼠随机分为空白组,模型组,阳性药组,扶正养肝合剂高、低剂量组(0.24,0.12 g·kg^-1)。小鼠连续灌胃给药21 d,最后一次给药16 h后,一次性腹腔注射APAP(600 mg·kg^-1),建立急性DILI小鼠模型,观察扶正养肝合剂对DILI小鼠肝脏质量和肝重比的影响;考察血清中谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)含量以及肝组织中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)及还原型辅酶Ⅱ(NADPH)水平;用Q-PCR法测定肝组织中ptgs2 mRNA水平;用Western blot法检测肝脏中SLC7A11和GPX4蛋白水平;并用HE染色、免疫组化、TUNEL法检测肝脏切片病理学变化。结果表明,扶正养肝合剂能够缓解APAP诱导的小鼠肝脏肿大及肝重比增加,降低DILI小鼠血清中ALT和AST含量,同时抑制MDA产生,升高NADPH及GSH水平,下调ptgs2 mRNA水平,上调SLC7A11和GPX4蛋白水平。结果表明,扶正养肝合剂通过抑制ferroptosis发挥对DILI的保护作用。     

RP-HPLC测定theacrine的血药浓度

目的:测定theacrine灌胃后在大鼠血浆中的血药浓度.方法:采用RP-HPLC检测血浆样品,以咖啡因为内标.色谱柱为Phenomenex Luna C18(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(25∶75)为流动相,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为290nm,柱温为25℃.结果:Theacrine 血浆中质量浓度在0.5～100 mg·L-1线性关系良好(R2=0.998 9),最低定量限为0.5mg·L-1.在theacrine 血浆质量浓度为0.5,5.0,50 mg·L-1时,日内、日间精密度均小于15％,提取回收率分别为(95.8士8.6)％,(92.5士5.0)％,(90.3±5.2)％.当给药质量浓度为30 mg · kg-1时,主要药动学参数为Cmax(35.45±2.68) mg·L-1,tmax(0.51±0.13)h,t1/2(3.13±1.37)h,AUC0-∞(265.39±94.71) mg.L-1·.结论:经过系统的方法学考察,该研究所建立的测定方法灵敏度较高、重复性良好,可为theacrine在体内的代谢研究提供依据,为探讨theacrine作用机制及药效学评价奠定基础.