束缚应激反应对小鼠晶状体抗氧化能力指数的影响

目的探讨束缚应激反应对小鼠晶状体抗氧化能力指数的影响。方法建立小鼠束缚应激模型,采用荧光酶标仪测定晶状体的抗氧化能力指数,用高效液相-电化学检测器(HPLC-ECD)测定小鼠晶状体中谷胱甘肽含量。结果随着应激时间的延长,小鼠晶状体的抗氧化能力指数和谷胱甘肽含量与正常组相比均有不同程度下降。结论束缚应激状态下,晶状体的抗氧化能力指数和谷胱甘肽水平均相应降低,其机制可能与晶状体内的内源性抗氧化能力降低及氧自由基产生过多和蓄积有关。     

1,3,7,9-四甲基尿酸激活SirT3/AMPK/ACC信号通路减少高脂饮食小鼠肝脏脂肪化

目的研究嘌呤生物碱1,3,7,9-四甲基尿酸(theacrine)对高脂饮食小鼠肝脏甘油三酯蓄积的影响,并进一步探讨其作用机制。方法 C57BL/6J小鼠高脂喂养17周诱导单纯性脂肪肝模型,连续6周给予theacrine后,分别对肝组织切片进行HE和苏丹IV染色,测定肝脏中甘油三酯(TG)水平,用Western blot法检测肝脏中SirT3蛋白表达、AMPK及ACC蛋白的磷酸化水平。应用compound C抑制HepG2细胞中AMPK磷酸化,检测theacrine干预后相关蛋白的表达。结果 Theacrine能减少高脂饮食小鼠肝脏中TG水平,改善肝脏脂肪变性状态,增加肝脏中SirT3蛋白表达及AMPK和ACC蛋白的磷酸化水平。抑制细胞内AMPK的磷酸化后,theacrine仍能激活SirT3,但抑制了ACC的磷酸化作用。结论 Theacrine对SirT3的激活不依赖于AMPK的激活,而对ACC的磷酸化依赖于AMPK的激活。其改善高脂饮食小鼠肝脏脂肪化的作用可能与激活SirT3/AMPK/ACC信号通路相关。     

无限和有限

童年时,我家院内有一棵高大的槐树。每逢初夏,雪白的槐花挂满树梢,随风飘摆,散发着微微的清香。我常同小伙伴们坐在树下望着高树上筑巢的喜鹊,幼稚地争论着白云上面那无边的天空是什么,探讨天空为什么是蓝色的,也曾用童心自以为是地解释过什么叫做遥不可及的无限……     

火棘果实提取物对拘束应激负荷引起小鼠肝损伤的保护作用

目的研究火棘果实提取物对拘束应激负荷下活性氧引起小鼠肝损伤的保护作用。方法采用拘束负荷方法造成小鼠应激性肝损伤模型。赖氏法测定小鼠血浆中丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,TBARS法测定血浆及肝组织匀浆中的丙二醛(MDA)水平,ORAC法测定血浆抗氧化能力指数,HPLC法测定血浆及肝组织匀浆中维生素C(VC)水平,以及ORAC方法测定火棘果实提取物和芦丁、金丝桃苷的体外抗氧化活性。结果与拘束模型组相比,火棘果实提取物可以有效降低应激负荷小鼠血浆ALT活力和血浆、肝组织匀浆中MDA水平,并显著提高血浆和肝组织匀浆的抗氧化能力指数和VC水平。火棘果实提取物及其活性成分芦丁和金丝桃苷体外显示出较强的抗氧化能力。结论火棘果实提取物对拘束应激负荷下活性氧引起的小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能来自于清除自由基和抑制脂质过氧化过程。     

清肝泻肺方治疗肝火犯肺增加流感病毒易感性的作用研究

本实验采用慢性拘束应激诱导的H1N1流感病毒易感的小鼠模型,模拟临床上情志郁结、肝火犯肺,研究清肝泻肺方(黛蛤散合黄芩泻白散)治疗流感病毒性肺炎的作用。小鼠感染流感病毒后观察21天内的生存和发病情况,并于感染后的第6天取部分小鼠肺脏检测病毒性肺炎和磷脂过氧化等指标。实验结果显示,清肝泻肺方能够缓解慢性拘束应激负荷H1N1流感病毒引起的小鼠生存率和健康率下降,抑制小鼠肺部流感病毒的复制、炎症因子的产生,降低磷脂过氧化水平,改善小鼠肺炎症状。利用中药网络药理学技术构建的清肝泻肺方活性化合物-作用靶点网络,结果显示,该网络包含171个单体化合物和260个靶点,涉及氧化应激、炎症和免疫等相关信号通路。以上结果表明,清肝泻肺方治疗流感病毒性肺炎的作用机制可能与其调控氧化应激有关。实验方案经暨南大学动物实验伦理委员会批准,所有程序均严格按照动物使用和护理的伦理原则进行。     

Omega-6型多不饱和脂肪酸增加急性心肌缺血损伤“易感性”的机制研究

脂质代谢紊乱是冠心病的常见病理特征。虽然增加不饱和脂肪酸(PUFA)的摄入一直以来被认为可以有效预防冠心病,但是越来越多的临床试验却否定了该观点。PUFA在冠心病中的具体作用机制尚不明确。本实验通过建立omega-6型PUFA负荷急性心肌缺血的动物模型,来探讨PUFA对心肌缺血损伤的影响及其潜在机制。实验方案及程序均符合动物使用和护理的伦理原则,并已获暨南大学动物实验伦理委员会批准。实验采用亚油酸(LA)连续灌胃14天后,大剂量腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)诱导急性心肌缺血以建立动物模型。24 h后,采用小动物超声影像系统检测心脏功能。随后,采集血清及心肌组织样本进行心肌酶、磷脂组学分析、试剂盒含量测定和Western blot检测。心脏功能结果表明,与单纯LA组比较, LA负荷ISO小鼠的左心室射血分数(EF%)和左心室缩短分数(FS%)显著降低,天门冬氨酸转移酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)显著增加。磷脂组学分析表明,与ISO组比较, LA负荷ISO小鼠心肌组织中的PUFA显著增加,且氧化型磷脂酰乙醇胺(ox-PE)的含量变化最为显著。还原型辅酶Ⅱ(...     

肌肽对溴酸钾诱发小鼠肾损伤的改善作用

目的 探讨肌肽对溴酸钾诱导小鼠肾损伤的改善作用.方法 雄性KM小鼠腹腔注射200 mg/kg溴酸钾诱发小鼠肾损伤模型,观察肌肽给药后的改善作用.采用HPLC测定小鼠血清中尿素氮(BUN)、肌酐含量及肾组织中谷胱甘肽(GSH)含量,TBARS法测定小鼠肾组织中丙二醛(MDA)含量和Griess反应法测定血浆及肾组织的一氧化氮(NO)含量,荧光酶标仪检测肌肽的体外及小鼠肾组织的抗氧化能力指数.结果 与肾损伤模型组相比,肌肽可以有效降低血清尿素氮、肌酐含量和肾组织中丙二醛含量和一氧化氮水平,提高小鼠肾组织的谷胱甘肽水平及抗氧化能力指数,但肌肽在体外实验中没有显示明显的抗氧化能力.结论 肌肽对溴酸钾诱发的小鼠肾损伤具有一定的保护作用,其作用机制不是来自肌肽的直接抗氧化作用,而是可能与缓解溴酸钾诱发的肾组织内的过氧化应激状态有关.     

二氢杨梅素对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱发小鼠肝损伤的保护作用及对中性粒细胞释放白三烯的影响

目的 研究二氢杨梅素(DMY)对痤疮丙酸杆菌与脂多糖(P.acnes-LPS)诱发小鼠肝损伤的保护作用及对小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯的影响.方法 通过对10 mg/kg P.acnes负荷5 d的小鼠iv 3μg/kg LPS建立P.acnes-LPS肝损伤模型,用酶标仪测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性,RP-HPLC法测定小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯B4(LTB4)和白三烯C4(LTC4)的水平.结果 与模型组相比,125、250、500mg/kg DMY均能显著抑制由P.acnes-LPS诱发的小鼠血浆ALT活性升高,其抑制率分别为38.7%、45.1%、49.8%,并对小鼠腹腔中性粒细胞LTB4和LTC4的分泌呈剂量依赖性抑制作用.结论 DMY对P.acnes-LPS诱发小鼠肝损伤具有一定的保护作用,其部分作用机制可能与抑制白三烯释放有关.     

王老吉凉茶对拘束应激负荷小鼠脾脏CTL活性的影响

目的研究王老吉凉茶(Wanglaoji Herbal Tea,WHT)对拘束应激诱发小鼠脾脏细胞毒性T细胞(CTL)活性的影响。方法将雄性C57BL/6小鼠随机分为正常对照组、致敏对照、应激对照组、125及500mg/kg王老吉凉茶给药组,制备小鼠脾脏淋巴细胞悬液,流式细胞术分析T淋巴细胞亚群和CTL对P815细胞杀伤活性,同时检测小鼠脾脏淋巴细胞IL-2和IL-3的表达量。结果拘束应激明显降低Th淋巴细胞亚群的比例,显著降低CTL对P815瘤细胞的杀伤活性,同时减少脾脏淋巴细胞IL-2和IL-3表达量减少。与拘束应激组相比,王老吉凉茶给药可以增加拘束负荷小鼠脾脏淋巴细胞数目,提高CTL细胞杀伤活性,并且改善IL-2和IL-3表达量。结论王老吉凉茶对拘束负荷诱发小鼠免疫机能低下有改善作用。     

沙蟾毒精抑制肝癌HepG2细胞黏附、迁移和侵袭的作用

目的研究沙蟾毒精(Arenobufagin)对人肝癌细胞HepG2黏附、迁移和侵袭的抑制作用。方法 MTT法检测沙蟾毒精对HepG2细胞活力和细胞黏附能力的影响,划痕实验观察沙蟾毒精对HepG2细胞运动能力的影响,Transwell小室模型研究沙蟾毒精对HepG2细胞的迁移和侵袭的抑制作用,Western blot检测基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9的表达水平变化。结果与空白组相比,沙蟾毒精可降低HepG2细胞的黏附能力,使Transwell小室膜上的肝癌细胞明显减少,并且呈剂量依赖性。Western blot结果显示沙蟾毒精可以明显抑制基质金属蛋白酶MMP 2和MMP 9的表达。结论沙蟾毒精能抑制人肝癌细胞HepG2的黏附、迁移和侵袭,其机制可能与抑制MMP 2和MMP 9的表达有关。