巴尔通体的宿主动物及传播媒介研究进展

巴尔通体(Bartortella)是一属寄生于脊椎动物红细胞内的革兰染色阴性杆菌，可引起人类卡里翁病(Carrion's disease)、猫抓病(cat-sratchdisease，CSD)、战壕热(trench fever)、心内膜炎、杆菌性血管瘤(bacillary angiomatosis，BA)等多种疾病。目前发现的巴尔通体有20余种，8种致病菌，除B．bacilliformis,B.quintana的宿主是人类，其余均寄生于自然界动物体内，并经吸血节肢动物传播。近年来，由于人类巴尔通体感染日益增多，国外对这种病原菌的宿主动物及传播媒介进行了较多的调查研究，以下就这方面的研究工作予以综述。     

从山东省家犬血液中分离出致病性巴尔通体——文森巴尔通体伯格霍夫亚种

目的调查家犬巴尔通体的带菌状况,分离培养并鉴定菌种.方法将采获的家犬血标本抗凝血接种于含5%去纤维兔血的脑心浸液培养基上,置于37℃含5%CO2培养箱中分离巴尔通体.然后挑选巴尔通体疑似菌落染色镜检,应用聚合酶链反应技术（PCR）在属分类水平鉴定巴尔通体,通过PCR产物限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）方法在分离菌株及与阳性对照菌株之间鉴别.选择16S rRNA、gltA和16S～23S rRNAITS的PCR产物测序,将所测核酸序列进行同源性比较及系统发育分析确定巴尔通体种或基因型.结果从山东省采获的71份犬血液中分离培养出2株巴尔通体疑似菌株,光镜下观察为革兰染色阴性、微弯曲的细小杆菌,3对巴尔通体属特异性引物扩增结果阳性,PCR-RFLP分析2株分离菌株相同,与阳性对照不同,16S rRNA、gltA和16S～23SrRNA ITS序列分析结果表明2株巴尔通体分离株与文森巴尔通体伯格霍夫亚种的同源性分别为100.0%、99.7%和97.2%.结论山东省家犬中存在巴尔通体感染,分离培养出的菌株经鉴定为文森巴尔通体伯格霍夫亚种,该亚种属于致病性巴尔通体.     

中国西南横断山区小型兽类嗜吞噬细胞无形体基因的检测及序列测定

目的 了解中国西南横断山区小型兽类自然感染嗜吞噬细胞无形体的情况.方法 采集位于滇西北横断山区的高黎贡山山脉、香格里拉雪山等山地(海拔1000～4500m)林区的小型兽类脏器标本以低温保存和运输,所获标本在实验室应用聚合酶链反应(PCR)方法对嗜吞噬细胞无形体16S rRNA基因和Msp4基因片段进行扩增测序,并将所测序列与GenBank中注册的基因序列进行相似性比较.结果 共检测小型兽类5目18属35种共436只,从6属11种小型兽类中发现阳性标本32份,总阳性率为7.34%.其中,高黎贡山林区检测小型兽类标本25种301只,阳性26份,阳性率为8.64%(26/301);香格里拉雪山等林区检测小型兽类标本19种135只,阳性6份,阳性率为4.44%(6/135);阳性标本绝大部分发现于小型兽类中的啮齿类动物.序列比较分析表明:不同小型兽类间的16S rRNA基因序列相似性为99%～100%,且与吉林野鼠中检测的无形体相对应片段(GenBank:DQ449948)最相近,相似性达99%～100%.对其Msp4基因核苷酸序列进一步分析发现与GenBank中相应片段相似性为95%～97%,提示中国西南横断山区小型兽类所感染无形体株变异较大.结论 首次证实和发现中国西南横断山区6属11种小型兽类自然感染嗜吞噬细胞无形体,其中啮齿类动物可能是这一地区嗜吞噬细胞无形体的主要宿主.     

非ST段拾高心肌梗死的临床分析

急性冠脉综合征（ACS）的病死率占心血管病之首位，近年来将其分为ST段抬高的心肌梗死（STEMI）与非ST段抬高心肌梗死（NSTEMI）和不稳定型心绞痛及心脏缺血性猝死。本研究对NSTEMI的临床及冠脉造影结果进行分析，旨在了解其特点，以便对临床诊治NSTEMI提供帮助。     

北京市宠物猫和流浪猫巴尔通体感染状况调查

目的调查北京市宠物猫和流浪猫巴尔通体感染状况。方法采集猫的抗凝血和血清并收集相关流行病学信息。将抗凝血用灭菌胰酶大豆肉汤按1∶4稀释后,取100μl接种于含5%去纤维羊血的脑心浸液培养基上,置于37℃、含5%CO2培养箱中分离培养至45 d。选择glt A、fts Z、rib C引物对分离到的疑似菌落进行PCR并测序,所测核酸序列进行同源性比较及系统发育分析,确定巴尔通体种。利用间接免疫荧光法检测血清样本汉赛巴尔通体抗体水平。利用SPSS 13.0软件分析实验室数据与现场采集的流行病学数据。结果北京市猫的巴尔通体血培养分离率为13.8%,获得的22株分离株全部为汉赛巴尔通体。血清抗体阳性率为39.4%。流浪猫(30.4%)、染蚤猫(36.6%)、幼猫(27.9%)的血培养阳性率较高,差异有统计学意义。染蚤猫的血清抗体阳性率(61.0%)也显著高于未染蚤猫(31.9%)。结论北京市宠物猫和流浪猫中巴尔通体感染率较高,且均为对人致病的汉赛巴尔通体,需做好宠物猫的防蚤除蚤、流浪猫的管理来预防人类巴尔通体感染。     

2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体感染状况调查

目的调查2017年云南省剑川县鼠形动物中巴尔通体的自然感染情况。方法2017年3—7月在剑川县用笼捕法捕获鼠形动物，无菌采集其股动脉血并提取DNA，应用荧光定量PCR技术进行巴尔通体检测，对检测阳性的血液样本进行巴尔通体分离培养。结果从剑川县沙溪镇石龙村及金华镇西门社区共捕获鼠形动物372只；经荧光定量PCR检测，阳性208份，阳性率为55.91%；11种鼠形动物中有10种检出阳性，其中大绒鼠的阳性率为38.73%，齐氏姬鼠为72.49%，贝氏树鼩为7.14%，中华姬鼠为77.78%，赤腹松鼠、社鼠、褐家鼠为50.00%，大足鼠、巢鼠为100.00%；阳性样本经分离培养后获得19株巴尔通体。结论TaqMan探针荧光PCR技术是巴尔通体感染的快速诊断方法。 剑川县鼠形动物中感染较高的为巴尔通体，受感染的鼠种较多，其中以齐氏姬鼠与大绒鼠较高，人群与外环境的鼠类接触存在感染发病的风险。     

鼠传巴尔通体流行概况

巴尔通体病是由巴尔通体病原菌感染引起的一大类新发人兽共患传染病。巴尔通体广泛分布于哺乳动物中,特别是在啮齿动物中有较高的感染率,可导致全身多器官疾病,呈全球性分布,威胁人类健康。啮齿动物作为其最大宿主群在全球广泛分布,是致病菌株来源的潜在风险源。为了解全球鼠传巴尔通体的流行现状和特点,以鼠传巴尔通体在世界范围内的感染流行情况为基础,了解和分析全球鼠传巴尔通体的流行特征。     

青藏高原喜马拉雅旱獭寄生蚤携带巴尔通体调查

目的 采集青海省海南藏族自治州部分地区喜马拉雅旱獭体表寄生蚤,检测巴尔通体感染情况.方法 应用杀虫气雾剂喷杀兴海县和贵南县捕获的喜马拉雅旱獭体表后用检蚤镊采集其体表寄生蚤.分别对采集的蚤样品单只提取DNA,采用实时荧光定量PCR法(Quantitative Real-time PCR,qPCR)检测蚤携带的巴尔通体(B...     

应用实时高分辨率熔解曲线技术检测巴尔通体北大核心CSCD

目的 应用实时高分辨率熔解曲线PCR技术建立特异性强、灵敏度高和稳定性好快速检测巴尔通体物种方法。方法 查找巴尔通体属特有基因ssrA特异引物进行常规PCR扩增,随后将扩增产物连接到pEASY？-T5Zero克隆载体上制备标准品。优化扩增反应的退火温度和引物浓度,评估实时高分辨率熔解曲线方法的特异性、敏感性及重复性,并与常规PCR进行比较。结果 优化的退火温度为60℃,引物浓度均为300nmol/L。特异性实验结果显示只有巴尔通体物种扩增出荧光信号,且相对应的熔解温度值为81.05℃±0.31,阴性对照菌株均未见荧光信号和熔解曲线;敏感性实验结果显示在20μL的反应体系中,实时高分辨率熔解曲线方法检测汉赛巴尔通体物种最低检出限为3.82×101个拷贝,比常规PCR敏感性提高了100倍,此外也显示出良好的线性关系和扩增效率,相关系数R2分别为0.999,E值分别为98.4%。重复性实验结果显示组内和组间的变异系数值为0.30%~0.62%和0.29%~0.36%,在允许范围内。结论 建立的实时高分辨率熔解曲线PCR方法特异性强、灵敏度高、稳定性好,可快速地检测鉴定巴尔通体物种,为巴尔通体所引起的猫抓病、战壕热、心内膜炎、杆菌性血管瘤和卡瑞恩病等一系列疾病的早期快速诊断、监测和流行病学调查等研究提供有效手段。     

云南西部地区居民区小型兽类携带病原体检测

目的 了解云南西部地区居民区小型兽类携带病原体情况,为自然疫源性疾病的防治提供科学依据。方法 在滇西地区8个州(市)中抽取的10个县(市、区)40个自然村中,随机抽取800户家庭(每村20户),进行室内捕鼠,采集鼠脾脏标本并提取基因组DNA,鼠肺标本提取RNA,运用聚合酶链反应(PCR)或免疫学方法,检测鼠疫、巴尔通体、伯氏疏螺旋体、巴贝西原虫、人粒细胞无形体、埃立克体、汉坦病毒等病原体。结果 捕获9种421只小型兽类,采集脏器样本404份,血清样本325份。检出鼠疫F1抗体两种方法共同阳性血清1份;扩增到巴尔通体枸橼酸合酶(gltA)基因64份,阳性率为15.84%,基因分析表明属6种基因型;检出伯氏疏螺旋体5S~23S rRNA间隔区基因5份,阳性率为1.24%,系统发育树显示均为Borrelia afzelii型;检出1例复合感染。其余病原体检测均为阴性。结论 滇西地区室内小型兽类感染病原体种类多,分布广,对人类健康有一定的危害,需加强监测并采取预防控制措施。