抗ACTH单克隆抗体制备及鉴定

本文报道了应用淋巴细胞杂交瘤技术将促肾上腺皮质激素(ACTH)与碳化二亚胺偶联后免疫小景(Balb/c)与骨髓瘤细胞融合,制备了3株分泌抗ACTH单克隆抗体的杂交瘤。建立了稳定的测定小分子肽类物质的间接ELISA方法。对其腹水效价进行了测定,并对其特异性进行了分析。     

抗人绒毛滋养细胞单克隆抗体的研制及鉴定

抗人绒毛滋养细胞单克隆抗体的研制及鉴定柳忠辉，王树和，陈越（白求恩医科大学免疫学教研室，长春１３００２１）陈宝江（吉林省计划生育科研所遗传室，长春１３００４１）胎儿绒毛滋养细胞在母胎间物质交换及妊娠期的免疫调节等方面起重要作用。它是胎儿产前遗传病诊断...     

卵泡休止素固相放射免疫分析法的建立及初步应用

本研究利用抗卵泡休止素的单克隆抗体与免抗卵泡休止素的多克隆抗体，建立了用于检测卵泡休止素的双抗体夹心固相放射免疫分析法。结果显示，该分析法对印泡休止素的最小检出量为２５ｐｇ／管；与相关肽激活素Ａ、抑制素，以及促肾上腺皮质激素等均无明显交叉反应。组间及批间的变异系数分别为４．７％和７．８％。应用本方法对部分生物样品中的卵泡休止素进行了检测。结果发现，人卵泡液内含有极高的卵泡休止素（５．２±２．１μｇ／ｍｌ），羊水中含量次之（７３±３８ｎｇ／ｍｌ），健康人血浆中印泡休止素的水平为１０．１±４．８ｎｇ／ｍｌ。     

抗重组GST单克隆抗体的制备及其在融合蛋白纯化中的应用

目的 制备抗重组GST的单克隆抗体（mAb),并用来纯化重组GST融合蛋白,方法 用含重组GST融合蛋白基因的pGEX4T-1质粒转化E.coliBL21,IPTG诱导GST融合蛋白表达,亲和层析和凝胶过滤法分离表达的重组GST融合蛋白,以此蛋白作为抗原,免疫Balb/c小鼠,按传统的杂交瘤技术制备mAb。将抗GSTmAb经ProteinA纯化后,与Sepharose4B偶联。结果 经3次亚克隆后,获得两株分泌抗GST载体特异性mAb的杂交瘤,采用该mAb对两种不同的GST融合蛋白进行亲和层析纯化后,经SDS-PAGE鉴定达到了商品化Glutathione-Resin的亲和层析纯化效果。结论 用抗GST蛋白特异性mAb亲和层析纯化融合蛋白是一种经济、实用的方法,且可用于Glutathione-Resin亲和层析纯化后的二次纯化。     

激活素A对小鼠中性粒细胞活性的调控作用

目的:通过检测中性粒细胞激活素受体表达以及细胞活性,阐述激活素A调控中性粒细胞的作用。方法:分离小鼠腹腔中性粒细胞;通过免疫荧光细胞化学染色及流式细胞术检测中性粒细胞激活素ⅡA型受体(ActRⅡA)表达;激活素A刺激后,Western blot检测中性粒细胞Smad3表达;检测呼吸爆发、NO分泌及吞噬能力的变化以确定中性粒细胞活性。结果:分离的小鼠腹腔中性粒细胞纯度大于90%;免疫荧光细胞化学染色显示中性粒细胞可以表达ActRⅡA,流式细胞术检测结果显示Gr-1与ActRⅡA双阳性细胞约41.1%;激活素A刺激后,中性粒细胞p-Smad3表达上调,ROS及O2-产生升高(P0.05),NO分泌增加(P0.01),流式细胞术检测结果显示激活素A还可以明显促进中性粒细胞对荧光微球的吞噬(P0.01)。结论:中性粒细胞可以表达激活素受体及其信号传导蛋白,激活素A对中性粒细胞活化及功能具有重要的调节作用。     

Iodogen法用于蛋白质的^125I标记：介绍一种高标 记方法

本文报道了一种用Ｉｏｄｏｇｅｎ法进行蛋白质的＾１２５Ｉ标记方法，该方法具有操作方便、＾１２５Ｉ利用率高、分离蛋白快速等优点。利用固相免疫放射分析法，对该法标记的＾１２５Ｉ－驴抗兔ＩｇＧ抗体活性进行分析，其抗体结合力和效价均明显高于氯胺Ｔ洒标记的抗体，上述结果提示，Ｉｏｄｏｇｅｎ法更适合于蛋白质的＾１２５Ｉ标记。     

强力天麻杜仲胶囊活性成分的提取及其对巨噬细胞的抑制作用

目的: 提取强力天麻杜仲胶囊（QLTM）的活性成分,检测其药物活性及其对巨噬细胞的调节作用。方法: 随机将小鼠分为对照组（生理盐水组）、QLTM胶囊组（阳性药物组）及QLTM活性成分高、中、低剂量提取物组,连续灌胃14 d,通过热板致痛法观察小鼠首次舔后足时间和1 min内的舔后足次数,通过醋酸致痛法观察小鼠首次扭体时间和15 min内的扭体次数,通过腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验检测巨噬细胞活性。结果:在热板致痛实验中,高、中剂量提取物组小鼠首次舔后足时间延长,1 min内的舔后足次数减少（P<0.05或P<0.01）;在醋酸致痛实验中,高、中剂量提取物组小鼠首次扭体时间延长,15 min内的扭体次数减少（P<0.05）;高、中剂量提取物组及QLTM胶囊组小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率均降低,但中剂量组低于对照组（P<0.05）。结论: QLTM活性成分具有镇痛和抑制巨噬细胞活性作用。     

虫草多糖对实验性大鼠Smad2/3 Smad7表达的影响

目的：探讨CCL4诱导的肝纤维化模型鼠肝组织Smad2／3，Smad7的表达及虫草多糖（Cordyceps Polysaccharide CP）抗肝纤维化的作用机制。方法：将40只大鼠随机型。行苏木素染色（HE）和特染2教员纤维染色（VG），判断肝组织炎症和纤维化的程度，免疫组化方法检测各组Smad2／3和Smad2／3的表达。结果：CP预防组和治疗组的肝组织炎症和纤维化程度明显低于模型组；Smad2／3在CP预防组和治疗组的阳性表达均明显低于模型组（P＜0．05）；Smad7在CP预防组和治疗组的阳性表达高于模型组（P＜0．05）：Smad2／3，Sinad7在CP预防组和治疗组的阳性表达高于模型组（P＜0．05）。Smad2／3，Smad7在CP预防组和治疗组的表达无差异性（P＞0．05）。结论：CP抗肝纤维化作用可能与抑制Smad2／3和促进Smad7的表达有关。     

白芍总苷抗血栓形成作用

白芍为毛茛科植物芍药P aeon ia lactif loraPall.的根,具有养血、止痹、益气、通络的作用。白芍总苷(total g lycosides of paeony,TGP)是从白芍中提取的有效成分,主要含有芍药苷、芍药新苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷等成分。现代药理证明,TGP具有抗炎、免疫调节、镇静、镇痛、耐缺氧、抗氧化和抗心肌缺血等作用[1~4]。本实验采用大鼠实验性静脉血栓模型,旨在探讨TGP抗血栓形成作用及其可能机制。1材料1.1动物:W istar大鼠,雌雄兼用,体重为250~300 g,由吉林大学实验动物中心提供,合格证号SCXK-(吉)2003-2004。1.2药品:TGP(含芍药…     

重组Lin-7蛋白的表达

目的:表达具有PDZ功能区的Lin-7蛋白,并制备抗Lin-7蛋白的特异性抗体.方法:采用质粒构建表达重组GST-Lin-7蛋白,SDS-PAGE分析表达蛋白;以GST-Lin-7蛋白为抗原免疫家兔,制备抗Lin-7多克隆抗体,ELISA法检测抗体特异性.结果:重组GST-Lin-7蛋白呈分泌型表达于胞浆内;制备的抗Lin-7抗体与GST、ARIPs等蛋白无交叉反应.结论:成功地构建了Lin-7蛋白表达质粒,并制备了抗Lin-7 的特异性抗体.