全文获取类型
收费全文 | 68033篇 |
免费 | 3586篇 |
国内免费 | 2329篇 |
专业分类
耳鼻咽喉 | 349篇 |
儿科学 | 584篇 |
妇产科学 | 678篇 |
基础医学 | 2601篇 |
口腔科学 | 822篇 |
临床医学 | 10092篇 |
内科学 | 5332篇 |
皮肤病学 | 753篇 |
神经病学 | 1176篇 |
特种医学 | 2144篇 |
外国民族医学 | 23篇 |
外科学 | 3867篇 |
综合类 | 19035篇 |
预防医学 | 7535篇 |
眼科学 | 639篇 |
药学 | 8298篇 |
79篇 | |
中国医学 | 8199篇 |
肿瘤学 | 1742篇 |
出版年
2024年 | 478篇 |
2023年 | 1735篇 |
2022年 | 1614篇 |
2021年 | 1331篇 |
2020年 | 1449篇 |
2019年 | 1642篇 |
2018年 | 1792篇 |
2017年 | 1146篇 |
2016年 | 1441篇 |
2015年 | 1482篇 |
2014年 | 3695篇 |
2013年 | 3156篇 |
2012年 | 3631篇 |
2011年 | 3940篇 |
2010年 | 3771篇 |
2009年 | 3609篇 |
2008年 | 3285篇 |
2007年 | 3373篇 |
2006年 | 3168篇 |
2005年 | 3264篇 |
2004年 | 2916篇 |
2003年 | 2606篇 |
2002年 | 2048篇 |
2001年 | 2029篇 |
2000年 | 1903篇 |
1999年 | 1665篇 |
1998年 | 1417篇 |
1997年 | 1409篇 |
1996年 | 1329篇 |
1995年 | 1290篇 |
1994年 | 1064篇 |
1993年 | 816篇 |
1992年 | 742篇 |
1991年 | 650篇 |
1990年 | 587篇 |
1989年 | 472篇 |
1988年 | 294篇 |
1987年 | 251篇 |
1986年 | 207篇 |
1985年 | 232篇 |
1984年 | 219篇 |
1983年 | 177篇 |
1982年 | 159篇 |
1981年 | 124篇 |
1980年 | 89篇 |
1979年 | 59篇 |
1978年 | 37篇 |
1965年 | 15篇 |
1964年 | 16篇 |
1959年 | 14篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
971.
目的:检测复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中的细菌内毒素。方法:供试品干扰试验后,采用凝胶鲎试验对样品中的细菌内毒素进行检测。结果:三批复方氨基酸(15)双肽(2)注射液稀释至28倍时对细菌内毒素的检测无干扰作用,所测样品的细菌内毒素含量均小于7 EU.ml-1。结论:所建立方法检查复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中的细菌内毒素可行。 相似文献
972.
973.
目的: 体外模拟慢性创面缺氧、低营养环境,观察成纤维细胞在该状态下增殖及细胞周期的变化及对外源性生长因子(bFGF)的反应,探讨低氧、低营养条件下成纤维细胞的病理生理变化。方法: 单纯缺氧环境采用厌氧培养箱,通入混合气,氧分压(PO2)分为27 mmHg和44 mmHg 2个水平;低营养环境则控制培养液新生牛血清(NCS)浓度。用MTT法检测细胞活性以及其对外源性生长因子的反应,用流式细胞仪检测细胞周期。结果: PO2 44 mmHg时细胞增殖速度较同期对照组无明显差异;PO2 27 mmHg时,细胞增殖速度较同期对照组明显减慢(P<0.01),细胞被阻滞于G0期,S期细胞比例明显减少,bFGF未显示促增殖作用。NCS浓度为0.5%的低营养状态下细胞增殖速度较同期对照组明显减慢(P<0.01),细胞被阻滞于G0-G1期(P<0.01);bFGF能明显改善低营养状态下的增殖减慢(P<0.01),使G2-M期细胞比例增加(P<0.05)。结论: 27 mmHg PO2或NCS浓度为0.5%的低营养环境使细胞阻滞于G0-G1期,影响成纤维细胞增殖;bFGF可以改善低营养条件下细胞增殖减慢的状态,但对极度缺氧条件下的成纤维细胞增殖障碍无明显作用。 相似文献
974.
目的:制备鼠抗人可溶性间皮素相关蛋白(SMR)的单克隆抗体(mAb),鉴定其生物学特性。方法:应用计算机通过综合预测对间皮素(MSLN)进行B-细胞表位预测。合成相应肽段并免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备mAb,利用免疫细胞化学和Western blot分析对所制备的mAb进行鉴定。结果:综合预测方法分析间皮素的抗原表位可能于153-162、282-292及471-481氨基酸残基或其附近,选择性合成了可能性最高的位于471-481氨基酸残基的可溶性间皮素相关蛋白表位,制备了mAb(2H10),经免疫细胞化学和Western blot分析该抗体具有较高的特异性。结论:成功地制备了鼠抗人可溶性间皮素相关蛋白的mAb(2H10),该抗体具有较高的特异性,为进一步利用ELISA对可溶性间皮素相关蛋白进行检测奠定了基础。 相似文献
975.
动态脑电图对癫痫诊断和鉴别诊断的意义 总被引:1,自引:0,他引:1
对临床诊断癫痫的53例和可疑癫痫的117例行24h动态脑电图(AEEG)监测。结果AEEG阳性率(32.9%)明显高于常规EEG(20%),AEEG痫样放电率在癫痫组为54.7%(29/53),可疑癫痫组为15.4%(18/117)。后者中有临床发作者63例,检出痫样放电10例,睡眠期出现痫样放电占89.4%(42/47)。本文对痫样放电出现与临床发作间的关系以及癫痫诊断和鉴别诊断进行了讨论。 相似文献
976.
目的:酵母菌胞嘧啶脱氨酶基因(YCD)是新型自杀基因,利用重组逆转录病毒载体(RV),将YCD高效导入人原代T细胞,并在体内外探讨转基因T细胞的功能及"自杀"效应。方法:构建RV载体MSCV-YCD-puroR,瞬时质粒共转染法制备RV,流动感染法或Retronectin 离心法感染人原代T细胞,嘌呤霉素筛选获得T-YCD-puroR,检测转基因T细胞对肿瘤细胞的杀伤及细胞因子分泌功能,在体外和SCID小鼠体内,探讨前体药物5氟胞嘧啶(5-FC)对T-YCD-puroR细胞的杀伤效应等。结果:病毒滴度为(5.0±3.7)×106TU/mL。流动转染法对人原代T细胞的基因导入率46.0%±9.6%,2轮离心 Retronectin法的基因导入率为60.3%±7.6%(n=3)。经嘌呤霉素筛选48h获得T-YCD-puroR细胞,其基因阳性率96.7%±1.5%,并可大量扩增。与野生T细胞比较,T-YCD-puroR细胞杀伤K562肿瘤细胞的能力及细胞因子分泌功能无统计学意义。体外实验显示,与野生T细胞比较,T-YCD-puroR细胞对puromycin的IC50上升了304.9倍(0.071mg/Lvs22.3mg/L),对5-FC的IC50下降了133.3倍(656.0μmoL/Lvs4.9μmoL/L)。T-YCD-puroR细胞静脉接种于SCID小鼠,7d后每只小鼠腹腔注射5μmoL的5-FC,连续7d,首次给药24h后即可观察到SCID小鼠外周血中CD45 细胞显著下降(P<0.01)。结论:YCD自杀基因导入对人原代T细胞功能无显著影响,T-YCD-puroR细胞可以在体内外被5-FC有效杀伤。本研究为进一步研究打下了良好的基础。 相似文献
977.
978.
本文观察了吸烟对健康成年男性甲襞微循环的影响。观察对象为20~40岁的健康男性72名,吸烟者31名,不吸烟者41名。年龄最小19岁,最大39岁。方法:使用锦州光学仪器厂生产的XQX-IA微循环显微镜和配套的 相似文献
979.
目的探讨炎症微环境下蛋白激酶样内质网激酶(PERK)通路对牙周膜干细胞成骨分化能力的调控机制。方法选择因正畸拔除的新鲜前磨牙或第三磨牙10例,牙周组织无炎症,完整无龋,患者年龄18~32岁。选择因慢性牙周炎而拔除的离体牙6例,患者年龄20~35岁。健康牙周膜干细胞(H-PDLSCs)和炎症牙周膜干细胞(P-PDLSCs)分别用正常和炎症牙周膜组织制备。采用免疫组织化学检测牙周膜组织中PERK通路相关因子PERK、CHOP、GRP78及ATF4的表达情况。构建稳定干扰PERK的炎症牙周膜细胞系(P-PDLSCs-PERK shRNA),采用RT-qPCR和Western blot检测PERK基因的抑制效率;对构建的稳定干扰PERK细胞系及另外3个对照组细胞P-PDLSCs-Vector、P-PDLSCs和H-PDLSCs进行成骨诱导,RT-qPCR检测成骨相关因子碱性磷酸酶(ALP)、Runx2及OCN的mRNA水平,Western blot检测Runx2和OCN的蛋白水平,ALP染色鉴定ALP活性,茜素红染色分析细胞成骨能力。结果免疫组织化学结果表明,炎症组织中PERK信号通路相关因子PERK、CHOP、GRP78及ATF4均显著高于正常组织(P 0.05)。RT-qPCR及Western blot检测结果显示,PERK基因抑制效率达到59%,PERK蛋白表达的抑制效率为54%。成骨相关因子的m RNA水平检测结果显示,诱导后P-PDLSCs和P-PDLSCs-Vector相差无几(P 0.05);诱导后H-PDLSCs中3种成骨相关因子水平显著高于前2种细胞(P 0.05);PERK基因被抑制诱导后P-PDLSCs-PERK shRNA相比未被抑制的PPDLSCs,3种成骨相关因子的基因表达均显著升高(P 0.05);成骨相关因子Runx2及OCN蛋白表达和ALP活性与mRNA水平保持一致。茜素红染色后,诱导后H-PDLSCs中矿化结石数量显著高于另外3种细胞(P 0.05),而诱导后PPDLSCs-Vector和P-PDLSCs差异无统计学意义(P 0.05);而相比诱导后P-PDLSCs,沉默PERK基因后的P-PDLSCsPERK shRNA中形成矿化结石的数量明显回升(P 0.05)。结论炎症微环境能通过激活PERK信号通路抑制牙周膜干细胞的成骨分化能力,在PERK被沉默时,炎症微环境对牙周膜干细胞成骨分化能力的抑制作用能够得到逆转。 相似文献
980.
Th1型细胞因子基因对结核分枝杆菌基因疫苗诱导BALB/c小鼠产生抗CFP10抗体水平的影响 总被引:3,自引:1,他引:3
目的:研究分别表达含IL—12和IL-18基因的质粒,对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)H37R1株CFP1O基因疫苗诱导免疫应答的影响。方法:从正常人外周血单个核细胞(PMBCs)中提取RNA,用RT—PCR扩增IL-18 cDNA,并克隆人载体pGEM—Teasy中。测序证实后,亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1的BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点。将分别表达小鼠IL—12和人IL—18基因的真核表达质粒pcmlL12和pclL18,与MTB CFP10基因疫苗联合肌注免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,每次间隔2wk。每次免疫后2wk采血、分离血清,用ELISA检测小鼠血清抗CFP10抗体的滴度。结果:用RT—PCR成功地从人PMBC的RNA中扩增出IL—18 cDNA,测序结果正确,用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切鉴定证实,目的基因已插入载体pcDNA3.1中,阳性克隆命名为pcIL18。pcCFP10组第1次免疫后,血清抗CFP10抗体的平均滴度为1:600,末次免疫后的滴度为1:4000。pcIL18 pcCFP10组联合免疫后,血清抗CFP10抗体的滴度高于pcCFP10组,最终达1:8000。而pcmIL12 pcCFP10组联合免疫后滴度仅为1:200。结论:pcIL18与CFP10基因疫苗联合免疫,可增强CFP10抗原的特异性体液免疫应答;pcmIL12则可使CFP10基因疫苗产生的抗体水平降低。pcIL18 pcCFP10基因联合免疫是否具有增强CFP10抗原特异性细胞免疫的作用有待进一步研究。 相似文献