2型登革病毒诱导RAW264.7细胞凋亡的机制及凋亡对病毒复制的影响

 目的：探讨2型登革病毒（DENV2）感染能否诱导RAW264.7细胞凋亡,并初步探讨凋亡对病毒复制的影响。方法：用DENV2感染RAW264.7细胞,MTT检测细胞活性,Hoechst 33342染色检测细胞核变化,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测caspase-3和caspase-8活化片段的变化,比色法检测caspase-9活性变化,JC-1染色检测线粒体膜电位变化,Z-VAD-FMK抑制细胞凋亡后以TCID50检测感染细胞上清病毒滴度。结果：DENV2感染RAW264.7细胞24 h、36 h及48 h后细胞活性受到抑制,免疫荧光检测有核固缩现象,流式细胞术检测发现病毒感染诱导了细胞凋亡,Western blotting检测发现活化caspase-3和caspase-8的表达增加,caspase-9活性也增加,JC-1染色发现病毒感染诱导RAW264.7细胞线粒体膜电位降低,用Z-VAD-FMK抑制凋亡后感染细胞上清病毒滴度增加。结论：登革病毒感染可以通过内、外源性途径诱导RAW264.7细胞发生凋亡;凋亡发生抑制了病毒的产生。     

曲格列酮诱导人心肌细胞氧化应激和自噬的作用

目的研究曲格列酮的心肌细胞毒性特征,并从线粒体氧化应激和自噬角度探讨其潜在的毒作用机制。方法人源心肌细胞AC16给予不同浓度曲格列酮0~40μmol·L^-1孵育24 h。倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞存活率,漏出法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量;荧光探针TMRM检测线粒体膜电位和CM-H2DCFDA检测全细胞活性氧的含量;Western印迹法检测微管相关蛋白Ⅱ/Ⅰ轻链3(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)比值和P62蛋白表达水平。结果与细胞对照组相比,曲格列酮可浓度依赖性地引起细胞质皱缩、细胞存活率下降(r=-0.928,P<0.05)和LDH释放量增加(r=0.746,P<0.05);曲格列酮10和20μmol·L^-1可明显降低细胞线粒体膜电位(P<0.05),增加全细胞活性氧含量(P<0.05);显著增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,上调P62蛋白表达(P<0.05)。结论曲格列酮可引起心肌细胞损伤和线粒体功能障碍,其机制与线粒体氧化应激和自噬体降解受阻密切相关。     

Habib VesOpen消融导管治疗小型猪模拟门静脉癌栓的安全性研究

目的：探索射频消融（RFA）导管治疗门静脉癌栓（PVTT）的安全性。方法将10头实验小型猪分为3组：A组（n=6）直接行正常门静脉RFA治疗;B组（n=2）先行门静脉球囊封堵,然后行门静脉新鲜血栓RFA治疗;C组（n=2）先建立PVTT模型,待门静脉血栓机化后行门静脉RFA治疗。术后1、3、4周作MRI检查,4周后处死动物作病理学检查。结果 A组动物在功率5 W条件下接受RFA治疗0．6～3．6 min,MRI检查及1个月后病理学检查均未发现明确异常。 B组动物RFA后MRI检查提示门静脉区损伤较A组明显,术后1、3、4周内膜MRI检查提示门静脉水肿逐渐减轻;术后1个月病理学检查证实邻近肝组织损伤严重。C组在功率7 W条件下接受RFA治疗1．5 min,术后MRI检查未见消融区明显水肿,病理学检查可见机化的血栓坏死、血管内皮细胞受损。结论采用Habib VesOpen双极RFA导管治疗PVTT,应根据PVTT严重程度选择合适的RFA功率与时间。PVTT较轻时采用大功率、短时间RFA可能较安全,PVTT较重时改用小功率、长时间RFA更为安全可靠。     

“泻剂结肠”的研究进展

泻剂结肠作为慢传输型便秘的一种常见临床类型,它使患者痛苦不堪,治疗效果也不尽人意,严重患者需行结肠切除术来缓解症状。患者因便秘需长期使用泻剂,随着病程的进展,泻剂的剂量与效果成反比,最终失去导泄作用,形成"泻剂结肠",甚至可发展为结肠黑变病。目前临床应用泻剂类型较多,而其中导致泻剂结肠的主要成分为蒽醌类泻剂。泻剂结肠的基础研究目前主要集中在肠神经系统(enteric nervous system,ENS)、胃肠激素(gastrointestinal hor-     

CT 仿真内镜与双对比造影检查诊断胃肠道间质瘤价值

目的：比较 CT 仿真内镜（CTVE）与气钡双重造影（双对比造影）对胃肠道间质瘤的诊断价值。方法：89例经手术证实的胃肠道间质瘤患者先进行双对比造影检查,待造影剂排空后行 CTVE 检查,比较两种检查方法对胃肠道间质瘤的检出率、部位及肿瘤大小。结果：CTVE 检出胃肠间质瘤的阳性率高于双对比造影,尤其是胃、小肠及直肠间质瘤的检出;CTVE 对瘤体＜5 cm、瘤体5～10 cm 的检出率明显高于双对比造影检查。结论：CTVE 对早期间质瘤检出敏感性高,能够生动反应瘤体大小及黏膜皱襞改变情况,具有一定早期诊断价值。     

小儿下呼吸道感染病原菌的分布特征及耐药性分析

目的:对儿童下呼吸道感染的病原菌分布及其耐药性进行监测与分析,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:对8 842例下呼吸道感染患儿痰标本进行培养,鉴定出病原菌并进行药敏试验。结果:8 842例标本中检出病原菌3 472株,其中革兰阴性杆菌2 267株,占65.3%,以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌为主,其产ESBLs检出率分别为65.9%和48.1%,对三代头孢耐药率均很高,对头孢哌酮/舒巴坦和亚胺培南的耐药率很低;革兰阳性球菌981株,占28.3%,以金黄色葡萄球菌为最多,对万古霉素最敏感;真菌224株,占6.5%。结论:小儿下呼吸道感染病原菌以革兰阴性菌为主,不同菌种对抗菌药物的耐药性存在差异,在用药前积极寻找病原菌并监测细菌的耐药性,对临床合理使用抗菌药物有重要意义。     

中小学生家庭教养方式与创伤症状相关性研究

目的 调查中小学生家庭教养方式和创伤症状,分析其相关性及影响心理创伤严重程度的因素,为有效的社区健康干预提供依据.方法 采用多阶段抽样,用埃森创伤症状和家庭教养方式量表,对筛检出的1 793例经历创伤事件的儿童青少年进行问卷调查并分析.结果 不同年龄儿童青少年放任型家庭教养方式得分差异有统计学意义(P＜0.05);不同性别儿童青少年专制型家庭教养方式得分差异有统计学意义(P＜0.05).专制型和放任型教养方式分别与创伤症状各维度及总分呈正相关(P＜0.05),相关系数r分布在0.065～0.271之间;权威型教养方式与创伤症状各维度及总分呈负相关(P＜0.05),相关系数r分布为-0.069～-0.196.多元回归显示创伤症状得分的影响因素为权威型、专制型和放任型家庭教养方式,以及是否为学生干部.结论 社区应建立儿童青少年创伤事件监测体系,关注社区经历创伤事件的儿童青少年,并提供针对性干预措施.     

一种新型尿酸氧化酶四聚体提取纯化方法的建立

目的 建立一种简便、快速的尿酸氧化酶四聚体提取纯化的方法,以适应大规模生产需求。方法 首先通过基因工程的方法获得可以稳定发酵生产尿酸氧化酶的大肠埃希菌菌株,再通过一步萃取法从破碎菌体沉淀中获得尿酸氧化酶蛋白混合物,通过硫酸铵沉淀、离子交换和分子筛层析,最终获得纯化的活性尿酸氧化酶四聚体。结果 通过优化发酵及提取条件,每升发酵液可得到尿酸氧化酶四聚体蛋白约400 mg,其纯度>95%,比活>10 U/mg。结论 建立了一种新的尿酸氧化酶四聚体高效提取纯化的方法。     

抗EGFR、CA199及MUC1单克隆抗体偶联吉西他滨聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒杀伤胰腺癌细胞作用的比较研究

目的比较抗人EGFR、CA199和MUC1三种单克隆抗体分别偶联的载药聚氰基丙烯酸正丁酯纳米颗粒对人胰腺癌细胞的体外杀伤作用,进一步筛选靶向效果更佳的目标分子。方法采用乳化聚合法制备负载吉西他滨的纳米微球,测定载药纳米粒的粒径、载药率、包封率。采用化学交联法分别制备抗EGFR、CA199和MUC1三种单克隆抗体偶联的载吉西他滨聚氰基丙烯酸正丁酯纳米微球（EGFR-GEM-PBCA-NP、CA199-GEM-PBCA-NP、MUC1-GEM-PBCA-NP）。进行三种纳米粒子杀伤胰腺癌靶细胞实验,MTT比色法杀伤实验检测,并设置单纯负载吉西他滨的纳米微球、吉西他滨原料药及空白对照组,比较三种单抗修饰的靶向纳米粒对胰腺癌细胞的杀伤能力。使用流式细胞仪法检测治疗后肿瘤细胞周期与凋亡情况变化。结果与对照组相比各实验组的细胞杀伤率差异有统计学意义（P<0. 05）,其中MUC1-GEM-PBCA-NP组显著高于其他各组。MUC1-GEM-PBCA-NP处理组细胞凋亡率显著高于其他各组（P<0. 05）。结论在体外实验中MUC1修饰的载药纳米粒子对人胰腺癌细胞的靶向抑制及杀伤作用优于EGFR单抗及CA199单抗修饰的载药纳米粒子,其对于体外培养细胞的再导向作用更强。     

HIV感染者健康教育满意状况及影响因素调查

目的 了解上海市某艾滋病定点收治医院HIV感染者对护理健康教育的满意度,为开展针对性健康教育提供参考.方法 采用自行设计的问卷对209例HIV感染者进行健康教育满意度的调查.结果 209例HIV感染者中,健康教育满意率不足50%;不同诊疗方式、文化程度及身体状况患者健康教育满意度比较,差异有统计学意义（P＜0.05,P＜0.01）.结论 HIV感染者对医院提供的健康教育满意度不高.艾滋病专科护士应根据患者不同特质有针对性地开展内容丰富、形式多样的健康教育.