牛IL-18基因的克隆及遗传进化分析

目的：克隆牛白细胞介素18（IL-18）全基因，并对其进行序列分析。方法：从ConA刺激培养的牛外周血淋巴细胞提取总RNA，利用巢式RT-PCR方法扩增出牛IL-18全长cDNA，将其克隆到pMDl8-T载体上，测序后进行序列分析。结果：成功地克隆到了牛IL-18全基因，序列分析表明，实验中所克隆到的牛IL-18序列与GeneBank所登录的牛IL-18核苷酸序列及其推导氨酸序列同源性分别是99．5％和99％。与人、猕猴、野猪、山羊属、马等核苷酸序列及其推导氨基酸序列同源性分别在84．9％-99．5％和74．9％～99％之间，研究结果在国内还未见报道。结论：成功地从牛外周血中克隆到了牛IL-18的基因，其全长为598bp。     

自我概念和个体自尊、集体自尊对大学生主观幸福感的影响

目的:探讨大学生自我概念、个体自尊、集体自尊和主观幸福感的关系。方法:采用幸福感指数量表、自我概念量表、个体自尊量表、集体自尊量表对233名大学生进行测查。结果:①大学生的来源影响着主观幸福感,来自于城市的大学生比来自于农村的大学生体验到较高的生活满意度(P<0.01)。②自我概念、个体自尊、集体自尊和主观幸福感相关显著(P<0.01)。③自我概念、个体自尊、集体自尊对主观幸福感预测作用显著(P<0.001)。结论:自我概念、个体自尊、集体自尊是大学生主观幸福感的重要预测因素。     

半巢式PCR技术检测牙菌斑唾液及胃黏膜中幽门螺杆菌

本文通过半巢式PCR对 82例慢性胃炎和十二指肠溃疡患者的牙菌斑、唾液及胃黏膜中的幽门螺杆菌 (Hp)进行了检测。 82例患者中活动期十二指肠溃疡患者 2 4例 ,慢性浅表性胃炎 2 7例 ,慢性萎缩性胃炎 31例 ,其中男性 4 2例 ,女性 4 0例 ,平均年龄 4 2 .3岁。半巢式PCR首先以 1对引物扩增出磷酸葡萄糖胺变位酶基因 (phosphogluco saminemu tasegene ,glmM) 75 6bp的片段作为模板 ,再以半巢式引物扩增出 4 96bp的最终产物。引物 0 :5′ CGCGAGCCACAACCCTTTTGAAG 3′ ;引物 1:5′ CGCGCTCACTTGCAAAGCGCACAC 3′;引物 2 :5′…     

两例补体第8成份β亚基缺陷家系患者的进一步分子遗传基础研究

目的　在白人群体中 ,导致人类补体第 8成份 β亚基缺陷的分子基础主要是在编码 β亚基基因的第 9外显子上发生碱基 C→ T的突变 ,从而形成终止密码 ,导致 C8β亚基不能完全合成。国外学者在两例 C8β亚基完全缺失的患者家系研究中 ,发现这两例β亚基缺失个体只是第 9外显子上碱基 C→ T突变的杂合子 ,现进一步寻找这两例 C8β亚基完全缺失的分子遗传学机理。方法　对两例 C8β亚基完全缺失患者的 C8β编码基因的全部 11个外显子的 PCR扩增产物进行 DNA测序分析并与正常人 DNA序列进行对比。结果　两例完全性 C8β亚基缺失患者的蛋白质编码基因中 ,分别在第 3外显子的 2 98和 388位置发现了 C→T突变 ,同时对这两个突变位点的家系分析也证实 ,位于第 3外显子上的这两个突变位点是独立于第 9外显子的突变而遗传。结论　所发现的两个突变位点均能形成终止密码而导致 C8β亚基合成提前终止 ,因此这两例患者 C8β亚基完全缺失的分子遗传学机理是由于编码 C8β亚基的基因在第 3和第 9外显子上同时发生了点突变 ,进而形成终止密码造成 C8β亚基合成终止所致。     

用分子克隆技术构建D12S391基因座等位基因分型标准物及群体遗传学研究

目的 解决长期困扰短串联重复序列（short tandem repeat,STR）分型上存在的准确性和标准化问题。方法 先用PCR扩增出D12S391基因座的9个等位基因片段，将其插入pUC重组质粒中，经DNA测序分析证实插入片段的结构及大小，用国际标准将插入的等位基因片段进行命名，最后经转染、扩大培养、扩增及再鉴定后，制备出标准的D12S391等位基因分型标准物。结果 应用此法制备出大量的D12S391基因座等位基因分型标准物，并将其用于调查该基因座在德国Mainz地区、日本Miyazaki地区及中国成都汉族、北京汉族、新疆维吾尔族和甘肃回族6个群体中的基因型分布频率。D12S391基因座在各群体中均有较高的多态性，其非父排除概念及个人识别能力分别为0.609-0.786和0.940-0.952。结论 该法制备的STR基因座等位基因分型标准物在法医科学实践中应用价值极高，D12S391基因座是一个非常适合于群体遗传学研究和法医科学应用的遗传标记。     

应用复合诱导突变分离PCR法检测mtDNA的单核苷酸多态性

目的应用复合诱导突变分离PCR(multiplexed mutagenically separated PCR,MS-PCR)技术、银染分型,建立线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)编码区单核苷酸多态(single nucleotide polymorphism,SNP)分型系统,探讨其应用价值。并调查了成都汉族群体mtDNA编码区4个SNP基因座等位基因频率和单倍型分布情况。方法根据SNP基因座(C12705T、A8701G、G8584A、C10400T)设计两条片段相差4个碱基的等位基因特异性引物和一条公共引物,4个SNP基因座复合扩增,PCR产物经聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染显带后确定样本的基因型。结果不同SNP基因座为长度不同的单一谱带,其分型结果与直接测序一致。在成都汉族160名无关个体中,4个SNP基因座C12705T、A8701G、G8584A、C10400T等位基因频率分别为0.3813/0.6187、0.4813/0·5187、0.8250/0.1750、0.4938/0.5062;共检出6种单倍型,单倍型的基因多样性为0.7137。结论建立的MMS-PCR银染分型系统是一种简单、快速、准确、有效的SNP分型方法,对建立mtDNA编码区SNP数据库,研究群体遗传学、进化学和进行法医学个人识别和亲子鉴定有重要意义。     

腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣的临床应用

足踝部及小腿下段胫前区是常见损伤部位,因局部软组织少,血供差,一旦受损,皮肤坏死、骨、肌腱外露,修复困难.自1999年以来,我们采用腓肠神经营养血管逆行岛状皮瓣修复足跟、踝部、胫前区缺损5例,3例改进结扎蒂部小隐静脉,术后皮瓣存活良好.     

脂肪筋膜瓣在手指深部组织缺损修复中的应用

目的：为手指中、小范围软组织缺损伴骨质、肌腱外露的创面提供一种简单、安全的一期修复方法。方法：在同指创面近掌侧作纵向S形切口，分离两侧创缘，充分显露皮下脂肪筋膜及指血管，注意保护指血管的分支，以一侧为蒂向远端逆行翻转或向近端旋转覆盖缺损，其表面取同侧上臂全厚皮片移植，轻加压包扎，供瓣区原位缝合。结果：临床应用6只手指均获成功，外形满意。结论：同指术野，手术简单、安全可靠，一期完成，是修复手指中、小创面骨、肌腱外露软组织缺损良好的选择方法。     

基于经方解构新说“石膏配伍解肌法”

石膏解肌之说由来已久,但限于矿物药的溶出及研究手段有限等现实问题,其临床推广及应用不足,深入探讨亦不足。该文通过梳理解肌法的脉络,总结出解肌法所针对的病机为“津液不足,兼表不和”,而石膏解肌的核心内涵为“清火存液,兼透表邪”;通过梳理解肌法的古今运用,结合配位化学的现代研究,从配伍角度入手,主以《伤寒论》和《金匮要略》中的经方为例,拓展了石膏解肌之内涵,总结出石膏的解肌作用不仅可以治疗外感后的肌肉不适症状,还可能影响脏腑功能,进而治疗内伤杂病,并由此提出“石膏配伍解肌法”,认为石膏与麻黄、葛根、防己、知母、人参、芍药、竹茹、生地黄、麦冬和葳蕤等药物配伍后,通过调整透散和清热的力度来更好地发挥解肌作用。该文附临床验案一则予以阐发,以期为石膏的临床运用提供参考,为其配伍使用的药物机制研究提供方向。     

原发性肾病综合征并急性肾功能衰竭9例治疗分析

原发性肾病综合征 (NS)并急性肾功能衰竭(ARF)临床上并非少见。我院肾病科近 5年收治的12 4例原发性肾病综合征中并特发性 ARF9例。发生率为 7.2 % ,经及时的诊断并予以合理治疗 ,肾功能恢复正常 ,取得了满意疗效 ,现报告如下。1　临床资料1.1　 9例 NS并 ARF患者均符合如下标准 [1] 1符合NS诊断 ,即 2 4小时尿蛋白定量≥ 3.5 g,血清白蛋白≤ 30 g/ L。 2排除继发性或系统性肾小球疾病 (如SLE、过敏性紫癜、淀粉样变、糖尿病肾病等 )。 3有ARF临床表现 (少尿、无尿、肾功能恶化 )。 9例患者中 ,男 7例 ,女 2例 ,年龄 16～ 65岁 ,7…