ALK-3、Pax-8基因抑制后大鼠心肌细胞中Smad1/5/8的表达

目的：抑制大鼠胚胎心肌细胞株中ALK-3、Pax-8基因的表达后,探索Smad1/5/8在其中所起的作用。方法：将H9C2（2-1）大鼠胚胎心肌细胞分为4组：针对Pax-8基因的小干扰RNA（Pax-8siRNA）组、ALK-3基因的小干扰RNA（ALK-3siRNA）组、阴性对照（NCsiRNA）组和空白对照组。前3组分别给予相应siRNA（5.0μL）和Lipofectamine2000（5.0μL）配制成的siRNA-脂质体复合物溶液,空白对照组给予等量的细胞培养基。采用qRT-PCR测定Pax-8和ALK-3的mRNA表达,Westernblot法检测磷酸化Smad1/5/8（p-Smad1/5/8）和半胱天冬酶（Caspase）-3表达。结果：与NCsiRNA组和空白对照组比较,Pax-8siRNA组的Pax-8mRNA表达分别下调50%（P＜0.05）和54%（P＜0.05）,ALK-3siRNA组的ALK-3mRNA表达分别下调49%（P＜0.05）和53%（P＜0.05）,而NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。与NCsiRNA组和空白对照组比较,ALK-3siRNA组p-Smad1/5/8的蛋白表达量分别下调58%（P＜0.05）和55%（P＜0.05）,Pax-8siRNA组p-Smad1/5/8的蛋白表达量差异无统计意义（P＞0.05）。NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。与NCsiRNA组和空白对照组比较,Pax-8siRNA组Caspase-3蛋白表达量分别上调76%（P＜0.05）和81%（P＜0.05）,ALK-3siRNA组Caspase-3的蛋白表达量分别上调135%（P＜0.05）和140%（P＜0.05）,而NCsiRNA组与空白对照组间差异无统计意义（P＞0.05）。结论：在大鼠胚胎心肌细胞株中对基因ALK-3、Pax-8干扰后能引起细胞凋亡蛋白Caspase-3明显增多,并且在ALK-3siRNA组发现Smad1/5/8蛋白磷酸化减少,而Pax-8siRNA组中未发现Smad1/5/8磷酸化减少,提示Smad1/5/8在基因ALK-3被干扰后引起细胞凋亡蛋白Caspase-3增多中起重要作用。     

应激和运动条件下AMPK在组织中的调节

5’-AMP活性蛋白激酶(AMPK)是一个代谢应激信号传感酶,应激情况下对调节细胞代谢维持细胞自稳态有重要作用[2]。提高AMPK活性可以应答剧烈运动、营养缺乏以及组织缺氧缺血,并且可以调节运动诱导的葡萄糖吸收以及糖原、脂肪酸和胆固醇合成[1]。现有的研究发现,5-氨基咪唑-4-氨甲酰核糖核苷酸(AICAR)可以直接激活AMPK;在心脏、肝脏、脂肪以及骨骼肌等组织中,AMPK活性的调节较为复杂。研究表明,组织在缺血缺氧的时候,AMPK被激活,其机制和组织中H+浓度([H+])、AMP浓度([AMP])、ATP浓度([ATP])的变化,以及AMP和ATP比值有关;…     

乳腺癌与血小板增多关系探讨

近年来有文献报道，血小板增多症与恶性肿瘤具有密切的关系。本文仅就血小板水平与乳腺癌的关系进行了观察，并探讨其临床应用价值，现将结果报告如下。     

骨骼三维CT重建的技术要点

骨骼三维ＣＴ重建的技术要点龚建平杨晓春范国华高金保周洁暇钱铭辉三维ＣＴ（３ＤＣＴ）重建技术在８０年代以后兴起，特别是在螺旋式ＣＴ在全世界广泛推广使用以后，该技术有了迅速的发展，成为ＣＴ技术发展的热点之一［１～３］。目前，我国已有一些医院引进了３ＤＣＴ...     

不同时机微量泵维持阿托品治疗重度有机磷农药中毒疗效分析

目的探讨不同时机微量泵维持阿托品治疗重度有机磷农药中毒疗效。方法将收治的52例急性有机磷农药中毒重度患者随机分为观察组和对照组各26例,观察组采用先间歇静脉推注阿托品,达阿托品化后再用微量泵泵入阿托品,对照组采用持续微量泵持续泵入阿托品,比较分析两组疗效。结果观察组胆碱酯酶活力好转所需时间、血糖浓度水平稳定所需时间短于对照组(P<0.05),病情治愈率高于对照组(P<0.05)。结论先间歇静脉推注阿托品达阿托品化后再用微量泵泵入阿托品方式可以较早改善有机磷农药重度中毒的实验室指标,提高治愈率。     

改良神经行为学评分量表评估新生兔神经行为表现的效果

目的 研究改良的神经行为学评估结果量表对新生兔神经行为学评分的效果. 方法 妊娠29 d健康新西兰白兔12只,随机分为3组,每组4只.缺氧缺血25 min组、缺氧缺血28 min组分别阻断孕兔子宫血流25、28 min,对照组不阻断子宫血流.记录新生兔的一般情况.每组活产新生兔随机分为顺向评分亚组、反向评分亚组、改良评分亚组,分别按神经行为学评分量表顺向和反向顺序以及改良的神经行为学评分量表顺向顺序进行评估,记录神经行为学评分结果,比较不同评分方法对评估结果的影响.同时行病理学观察,分析存活新生兔神经行为学得分与缺氧缺血时间和脑细胞凋亡数量的相关性.采用Spearman秩相关检验、单因素方差分析、Kruskal-Wallis H检验、Wilcoxon秩和检验或x2检验进行统计学分析. 结果 对照组和缺氧缺血25、28 min组的死胎率分别为0.0％(0/28)、16.7％(6/31)与37.9％(11/29),x2=21.33,P=0.00;纹状体单位面积内脑细胞凋亡数量逐渐增多[分别为0(0～1)、7(6～10)与25(22～28)个,H=54.39,P＜0.05]；神经行为学得分依次降低[对照组、缺氧缺血25和28 min组相比,姿势:3.00(2.25～3.00)分、2.00(1.00～2.00)分与1.00(1.00～1.00)分,H=38.47;翻正次数:9.00(8.00～9.75)次、4.00(3.00～5.00)次与1.00(0.00～1.00)次,H=52.30;翻正得分:2.90(2.80～2.98)分、2.10(1.90～2.20)分与1.30(1.00～1.40)分,H=53.53;运动能力:3.00(2.00～3.00)分、1.50(1.00～2.00)分与0.00(0.00～1.00)分,H=38.97；吮吸和吞咽协调能力:3.00(2.00～3.00)分、1.50(1.00～2.00)分与1.00(0.00～1.00)分,H=42.87;嗅觉刺激:3.00(3.00～3.00)分、2.00(2.00～2.00)分与1.00(1.00～2.00)分,H=38.43;P均=0.00].反向评分亚组神经行为学得分与顺向评分亚组间存在一定的差异,顺向评分亚组姿势项得分、翻正次数高于反向评分亚组,以对照组和缺氧缺血25 min组孕兔所产新生兔姿势项得分下降最明显[顺向评分亚组与反向评分亚组相比,姿势项:对照组:3.00(3.00～3.00)分与2.00(2.00～3.00)分,T=69.00,P＜0.05；缺氧缺血25 min组:2.00(1.25～2.00)分与1.00(1.00～1.75)分,T=52.00,P＜0.05.翻正次数:缺氧缺血25 min组:4.50(4.00～5.75)次与3.00(2.25～4.00)次,T=47.00,P＜0.05]；反向评分亚组嗅觉刺激项、吮吸和吞咽协调能力项得分略高于顺序评分亚组,但差异无统计学意义(P＞0.05).改良评分亚组各评估项得分与顺向评分亚组相近,表现出高度的一致性(P＞0.05).相关性分析发现,存活新生兔神经行为学评分分别与缺氧缺血时间、纹状体单位面积内脑细胞凋亡数量呈负相关关系(r均＜0,P均＜0.05),其中顺向评分亚组和改良法评分亚组新生兔神经行为学各项得分与缺氧缺血时间、纹状体区域单位面积内凋亡的脑细胞数量间相关系数接近,相关性强(｜r｜≈0.8,P均＜0.05). 结论 对新生兔反复被动运动检查可导致低估新生兔的神经行为学评估结果；经改良的神经行为学量表可准确反映缺氧缺血性脑损伤后新生兔的神经行为学损害程度.     

种痘样水疱病样皮肤NK细胞淋巴瘤1例

目的:报告1例"面、躯干、四肢反复起丘疱疹伴发热6月"的8岁患儿的组织病理及免疫组织化学特征,探讨本病与EB病毒感染的关系,以求做出明确诊断.方法:进行组织病理学、免疫组化及EB病毒原位杂交等检查.结果:组织病理学显示真皮层皮肤附件及小血管周围异型淋巴细胞浸润.免疫组化显示真皮淋巴细胞LCA( + ),CD3( + ),CD45RO( + ),CD56( + ),TIA-1( + ),Ki67 (30%+).皮肤组织及外周血中检测到EB病毒基因.结论:种痘样水疱病淋巴瘤组织病理学特征通常是有小到中等大小的淋巴细胞浸润,没有明显的异型性和多形性.进一步检查包括免疫组化和EB病毒编码的RNA原位杂交检查对于早期诊断至关重要.     

高氧所致慢性肺损伤早产鼠肺纤维化与p16蛋白的变化

目的 观察高氧所致慢性肺损伤早产鼠的肺纤维化与p16蛋白的变化情况.方法将120只早产鼠随机分为对照组、高氧CLD 组和地塞米松组,每组40只,采用高浓度氧诱导CLD模型,于实验第1、3、7、14、21天分别应用酶联免疫吸附法及免疫组织化学技术检测其肺组织Ⅰ型胶原和p16蛋白表达.结果 与对照组比较,高氧CLD组第14天和第21天肺纤维化评分及Ⅰ型胶原水平增加,p16蛋白表达水平降低;产前地塞米松治疗可减轻高氧暴露后早产鼠肺纤维化评分及Ⅰ型胶原水平,但对p16蛋白表达水平降低无影响.结论 高氧诱导早产鼠肺组织p16蛋白表达水平降低,可能与CLD肺纤维化的发生机制有关系.     

错配修复系统hMutS、hMutL的变异与结直肠癌的相关性研究进展

DNA错配修复系统（mismatch repair system,MMR）是重要的复制后修复机制,修复各种类型的碱基错配和插入/缺失环。hMutS、hMutL是MMR中重要的两个子系统,它们的功能缺陷与多种肿瘤,尤其结直肠癌密切相关。hMutS、hMutL系统关键基因SNPs、启动子甲基化水平的变化,都会直接或间接影响MMR的功能,以及由此引起微卫星不稳定性增加,进而影响结直肠癌的发生、发展和预后。本文主要从hMutS、hMutL系统关键基因的SNPs、启动子甲基化和微卫星不稳定三个方面综述了hMutS、hMutL系统关键基因变异与结直肠癌相关性研究的进展。     

维生素B12与蛋氨酸缺乏诱发人类淋巴细胞株微核形成

背景与目的：蛋氨酸合成酶（Methionine synthase,MS）以同型半胱氨酸（Homocysteine,HC）为底物合成蛋氨酸（Methionine,Met）;继而合成S-腺苷蛋氨酸（S-adenosvl methionine,SAM）,为DNA甲基化提供甲基;维生素B12（B12）作为MS的辅酶亦町影响Met的合成。我们研究旨在探讨Met和B12缺乏对人类BRCA1基因突变淋巴细胞株基因组稳定性的影响。材料与方法：以Met和B12生理浓度为依据（分别约25μmol／L和150pmol／L）,实验设置了15μmol／L和50μmol／L的Met分别与100、300、600、800、1200pmol／LB12组合的测试组,常规RPMI1640培养基作为对照（其Met、B12浓度分别为101μmol／L和3690pm／L）,培养携带BRCA1突变的乳腺癌患者淋巴细胞株9d,利用细胞质阻断微核分析（Cytokinesis-block micronucleus assay,CBMN）,评价B12与Met缺乏对该细胞株遗传稳定性的影响。结果：①在15μmol／L Met与B12的所有组合测试组中,双核细胞微核率（Micronucleated binucleated cell,MNBN）均高于Met为50μmol／L、B12在600pmol／L以上的所有组合,除B12在600pmol／L以上的测试组外,其他各组之间MNBN差异均有统计学意义（P〈0．05—0．001）;②当50μmol／LMet与B12组合时,MNBN降幅尤为显著,当B12浓度在600pmol／L以下时各组间MNBN差异有统计学意义,B12浓度为600pmol／L时MNBN降至最低,与800、1200pmol／L以及RPMI培养基中的MNBN差异无统计学意义。结论：结果提示B12、Met在600pmol／L-50μmol／L组合时可维持受试细胞株遗传稳定性的最佳状态。这二种微量营养素的适量补充有可能通过叶酸代谢对带有BRCA1突变的个体遗传物质形成一定的保护作用。鉴于研究提出的B12（600pmol／L）,Met（50μmol／L）浓度高于人体血浆正常生理浓度,有必要以提高基因组稳定性为目标,进一步评价提高这两种微量营养素的摄取量并调整其比例的意义。