华支睾吸虫cDNA表达文库的构建及初步筛选

目的　构建华支睾吸虫cDNA表达文库 ,为筛选特异诊断抗原和疫苗候选抗原奠定基础。　方法　提取华支睾吸虫总RNA ;用Clontech公司SMARTTMcDNA文库构建试剂盒操作方法 ,进行反转录合成双链cDNA ;PCR产物纯化后 ,进行SfiI酶切 ;用ChromaSpin 40 0柱将酶切产物进行分级分离 ,回收 0 .4～ 4kb的组分 ,并与λTriplEx2载体连接、体外蛋白包装 ,产生未扩增文库 ;检测未扩增文库滴度和重组效率后 ,进行文库的扩增 ,并测定扩增文库的滴度及鉴定。　结果　未扩增文库滴度达 7.5× 10 7pfu/ml ,扩增文库滴度达 2 .7× 10 8pfu/ml ;用载体两端的引物进行PCR鉴定 ,显示 :所选噬菌体中均含有重组的cDNA ,大小在 5 0 0bp以上。　结论　已成功地获得一高质量的华支睾吸虫cD NA表达文库     

Flash在药学教学中的应用体会

文章结合药学教学特点，介绍了在教学过程中如何利用Flash软件制作多媒体素材资源的体会。     

甲巯咪唑致胰岛素自身免疫综合征文献分析

目的 探讨甲巯咪唑致胰岛素自身免疫综合征(IAS)的发生规律及特点。方法 检索PubMed、Web of Science、Embase、维普、中国知网和万方数据库(截至2021年1月),收集甲巯咪唑致IAS的病例报告类文献,加上咸阳市第一人民医院收治的1例病例,提取相关数据,分析甲巯咪唑致IAS的特点。结果 纳入分析的患者64例,男性13例,女性51例;年龄15～76岁;其中95.31%的患者为Graves甲亢;51.28%的患者发生低血糖时间无规律,血糖最低可降至0.70 mmol/L;93.88%的患者胰岛素/C肽摩尔比>1;57.28%的患者发生低血糖时表现为神志不清或昏迷;9例患者发生IAS之前使用甲巯咪唑时出现皮疹的不良反应;98.36%的患者胰岛素自身抗体为阳性;大部分患者影像学检查未见明显异常。确诊为IAS的患者中,63例患者停用甲巯咪唑,23例患者同时给予糖皮质激素治疗,64例患者低血糖症状均好转。结论 服用甲巯咪唑时发生低血糖应警惕IAS,停用药物,视病情给予相应治疗,预后良好。     

PRDX6过表达对肝癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其分子机制

目的:探讨过表达过氧化物氧化还原蛋白6(PRDX6)基因对肝细胞癌增殖、侵袭和迁移的影响,并阐明其可能的作用机制.方法:人肝癌HepG2和Hep3B细胞分为过表达PRDX6组(转染过表达质粒PIRES-EGFP-PRDX6)和空载体组(转染对照质粒PIRES).实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western bl...     

肺孢子虫感染大鼠模型的建立及ITS巢式PCR检测敏感性研究

目的 建立肺孢子虫感染大鼠模型并探讨ITS1-5.8S rDNA-ITS2巢式PCR检测卡氏肺孢子虫DNA的敏感性. 方法 大鼠分为实验组和对照组,实验组从第1周开始用每周2次每次每只皮下注射地塞米松1 mg的方法诱导,共8周,并分别在首次注射后第2、4、6、8周解剖大鼠制作肺印片、肺组织匀浆液及支气管肺泡灌洗液(BAL)涂片,并进行六亚甲基四胺银(Gomori's methenamine silver,GMS)染色镜检;对照组不作激素注射,并分别在0周和第10周剖杀染色检查.同时分别提取大鼠BAL和肺组织的肺孢子虫DNA进行巢式PCR扩增,比较GMS法和ITS巢式PCR检测的敏感性. 结果 实验组从第6周开始染色镜检,可见少量肺孢子虫包囊,第8周肺印片、肺组织匀浆液均检测到包囊,检出率为100%(10/10),BAL的检出率为80%(8/10),对照组则均未检出.用ITS1-5.8S rDNA-ITS2巢式PCR法均能检测出实验组第8周大鼠BAL和肺组织卡氏肺孢子虫DNA,阳性率为100%(10/10),对照组均为阴性.比较BAL标本、肺印片和肺组织匀浆液GMS染色法的检出率,BAL最低,肺组织匀浆液最高.其中20%(2/10)大鼠的BAL标本用GMS染色法未能检出,但用巢式PCR方法均能成功扩增.结论成功用地塞米松诱导法建立了肺孢子虫大鼠感染模型;ITS1-5.8S rDNA-ITS2巢式PCR检测卡氏肺孢子虫敏感性高、特异性强,可推广应用于临床诊断肺孢子虫肺炎.     

遵义市湘江河水源水DEP和DBP污染调查

目的检测遵义市湘江河水源水中邻苯二甲酸酯水平。方法沿湘江河地表水区域设4个监测断面,分别于枯水期、平水期、丰水期采集水样。在相同的断面,相同的时间段,连续7天采集湘江河水源水,采用气相色谱-质谱法（GC/MS）对水样中邻苯二甲酸酯（PAEs）含量进行检测。结果湘江河水源水邻苯二甲酸二乙酯（DEP）和邻苯二甲酸二丁酯（DBP）含量分别为ND～4.067 g/L、ND～16.875 g/L,在枯水期和丰水期之间差异无统计学意义（〉0.05）。结论遵义市湘江河水源水质的总体水平符合国家地表水监测标准,仍然存在有机物污染的危险,有必要加强湘江和河水质监管力度。     

广西血吸虫病十年监测分析

目的探索近十年广西新发现的残存钉螺的分布特点及流动人口血吸虫病感染情况,为血吸虫病防治提供科学依据。方法根据查到残存钉螺年份长短将广西原血吸虫病钉螺孳生地分成三类,针对不同螺区分类,对原螺区及毗邻地区采用不同的监测方案。结合血清学方法及粪便检查方法,抽样检查当地居地、原血吸虫病人及流动人口的监测检查工作,对监测结果进行考核。结果近十年来,广西发现5处残存螺点,分别位于玉林、靖西、宜州、横县等地,其中隶属南宁市辖区的横县发现残存钉螺2处。广西未发现本地血吸虫病人,流动人口监测过程中发现输入性病例23例,病人分别来自湖北、湖南、江西和安徽4省,除2例为女性外,其余均为男性。职业则以干部、商人、民工(农民)、学生及武警新兵为主。结论广西虽然保持阻断传播标准的成果,但由于不断新发现残存钉螺及输入性血吸虫病例,广西仍然面临血吸虫病的威胁。     

LRP1基因突变与壮族人群前列腺癌相关性的初步研究

目的 通过对壮族前列腺癌患者癌组织和癌旁组织进行全外显子组测序，探讨可能与前列腺癌易感性有关的基因单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）突变基因。方法 取26例壮族前列腺癌患者癌组织及癌旁组织，提取DNA后进行全外显子组检测，筛选排在前60（TOP 60）的突变基因。在DAVID在线功能通路富集数据库和人类基因变异与临床信息整合数据库中查找TOP 60突变基因中与人类疾病发生相关的基因突变。结果 共突变结果显示，26例前列腺癌患者中，23.1%的患者低密度脂蛋白受体相关蛋白1基因（low density lipoprotein receptor-related protein 1，LRP1）突变；其中检索到LRP1基因的chr12：57556206位点为致病位点，发现 chr12：57603908、chr12：57548363、chr12：57567636、chr12：57554683、chr12：57549979位点可能与前列腺癌发生有关，且各位点均与 chr12：57556206位点相互独立（r ²<0.7）。结论 LRP1基因突变可能与壮族人群前列腺癌发生有关。     

单管-套式/多重聚合酶链反应在间日疟原虫基因型鉴定中的价值

目的对单管-套式多重聚合酶链反应(PCR)鉴定间日疟原虫基因型方法的应用价值进行研究。方法以间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因为模型，综合套式多重PCR、等位特异PCR和标签引物扩增等技术，使用Primer Premier5．0软件和NCBI的BLAST网络改进与优化引物设计，并用矩阵试验法优化反应条件和程序，同时，用单管-套式多重PCR和套式PCR对71份间日疟患者血标本的间日疟原虫基因型鉴定结果作比较。结果单管-套式多重PCR可同时扩增出3种不同长度的基因型/族特异片段，且基本消除了二聚体等噪音。用单管-套式多重PCR鉴定检测71份间日疟患者血标本，62份与套式PCR鉴定结果一致，并新发现6份不同基因型和PV-Ⅱ型的混合感染；还将2份套式PCR鉴定为热带族的血标本纠正为PV-Ⅱ型，1份阴性血样鉴定为温带族。结论研究建立的单管-套式/多重PCR鉴定间日疟原虫基因型的方法，简化了试验步骤，节省了试剂耗材，消除了PCR噪音，提高了检出间日疟原虫混合感染和低度感染的敏感性；是一种具有发展潜力的检测单核苷酸多态性和基因型鉴定的方法。     

广西人体华支睾吸虫病流行现状分析与防制对策

目的了解广西华支睾吸虫病流行现状,提出适合其流行特点的对策。方法采用改良醛醚法或Kato-Katz法调查人群感染率;收集广西两次全国人体寄生虫调查数据及其他既往资料作回顾性分析。结果广西华支睾吸虫病流行区在扩大,人群感染率在升高,感染度在加重。目前全部89个县市中59个有本病,比1994年增加了14个县市;全省14个地级市中13个市的城区有本病流行;与首次全国调查时比较,2002年人群感染率上升7.1倍,中重度感染所占比例由26.3%上升到52.2%。7县18个调查点中,本虫已成为优势寄生虫虫种。提出了“成瘾型”流行区华支睾吸虫病的防制对策。结论广西华支睾吸虫病流行有蔓延、加重的趋势,应采取相应对策加以控制。