过继转移FasL基因修饰的树突细胞对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响

目的:观察过继转移FasL基因修饰的树突细胞(DC)对小鼠自然流产模型胚胎丢失的影响,探讨它在诱导妊娠免疫耐受中的作用。方法:构建鼠源FasL(mFasL)真核表达载体pcDNA3.1-mFasL,用电转染法将它转染给DBA/2雄鼠骨髓来源的DC,将转染成功的mFasL-DC于交配前经腹腔注射给CBA/J母鼠。实验动物分为6组:(1)正常妊娠模型组(CBA/J×BALB/c);(2)未添加干预的流产模型组(CBA/J×DBA/2);(3)转输DC培养基(DCCM)的流产模型组;(4)转输单纯DC(DC)的流产模型组;(5)转输转染空质粒DC的流产模型组;(6)转输转染mFasL质粒DC的流产模型组,于妊娠第12~14天观察孕鼠胚胎丢失率。结果:转输mFasL-DC后孕鼠胚胎丢失率明显低于未添加干预或转输DC培养基的流产模型组(P<0.01),与转输单纯DC或带空质粒的DC组相比,其胚胎丢失率也明显下降(P<0.05),它与正常妊娠组相比胚胎丢失率无显著差异(P>0.05);转输单纯DC或空质粒的DC组与未添加干预流产模型组相比胚胎丢失率有所下降,但没有统计学差异;转输DC培养基组与未加干预组之间胚胎丢失率无统计学差异(P>0.05)。结论:过继转移mFasL-DC能诱导妊娠免疫耐受,降低小鼠自然流产模型孕鼠胚胎丢失率。     

窦卵泡计数及卵巢动脉血流变化与助孕术治疗结局的关系探讨

目的:探讨助孕术前子宫、卵巢的血流动力学变化及窦卵泡数与IVF-ET治疗后妊娠结局的关系。方法:129例拟采用IVF-ET助孕技术治疗的不育症患者,经阴道彩色多谱勒分别检测子宫体积、内膜厚度、血液动力学变化和卵巢体积、血液动力学以及窦卵泡数,比较分析上述指标与IVF-ET后成功妊娠的关系。结果:妊娠成功组的卵巢基质血流PI及RI、S/D指标显著小于妊娠失败组,而卵巢体积、窦卵泡数显著大于妊娠失败组,但是妊娠与否与子宫的相关参数无关。结论:卵巢动脉的PI、RI、S/D、卵巢体积和窦卵泡数数与妊娠结局有密切的关系。     

多囊卵巢综合征患者血小板聚集功能的变化

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血小板聚集功能的改变以及与胰岛素抵抗的关系.方法 32例PCOS患者(PCOS组)及30例正常妇女(对照组)均测定体质量指数和血清生殖激素水平,并行血小板聚集试验(PagT),同期行简化的口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及血清胰岛素水平的测定.结果 PCOS组和对照组相比,空腹血糖值无统计学差异(P＞0.05).PCOS组血清黄体生成素(LH)、睾酮(T)、空腹血浆胰岛素、HOMA法胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、2 h胰岛素和血小板聚集率显著高于对照组(P＜0.05或P＜0.01).相关分析显示血小板聚集率与HOMA-IR和2 h胰岛素呈正相关(P＜0.01,r分别为0.76和0.65).结论 PCOS患者血小板聚集率升高与胰岛素抵抗有关;血小板聚集率升高可能是PCOS患者心血管疾病发生率升高的原因之一.     

来曲唑对大鼠子宫内膜α_vβ_3和HOXA10表达的影响

目的:探讨应用来曲唑促排卵对大鼠围着床期子宫内膜整合素αvβ3和HOXA10表达的影响。方法:将60只Wistar雌鼠随机等分为3组:来曲唑组(letrozole,LE组),克罗米芬组(clomiphenecitrate,CC组),生理盐水组(NS组),分别进行促排卵。用免疫组化法观察大鼠围着床期子宫内膜腺上皮整合素αvβ3的表达变化;应用RT-PCR和Westenblot方法观察大鼠围着床期子宫内膜HOXA10表达情况。结果:LE组大鼠子宫内膜αvβ3表达与NS组无差异(P>0.05),但LE组显著高于CC组(P>0.01);NS组HOXA10表达高于LE组(P>0.05),LE组HOXA10表达高于CC组(P>0.01)。结论:来曲唑促排卵对大鼠子宫内膜容受性的抑制作用比克罗米芬小,有可能成为较为合适的促排卵药物之一。     

早期自然流产患者绒毛Notch受体mRNA和蛋白表达及与妊娠关系的初步探讨

目的:初步探讨早期自然流产患者绒毛Notch受体(Notch1、Notch2、Notch3、Notch4)mRNA及蛋白表达及对滋养细胞的调控作用。方法:用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术和免疫印迹法检测6例自然难免流产患者和12例正常早期妊娠妇女绒毛Notch1、Notch2、Notch3、Notch4的mRNA和蛋白的表达水平。结果:(1)自然流产组绒毛Notch1和Notch3 mRNA表达水平高于正常早期妊娠组(P<0.05);(2)Western-blot检测显示早期自然流产患者绒毛中Notch1、Notch2、Notch3受体蛋白的表达水平高于正常早期妊娠组(P<0.05)。结论:Notch受体蛋白在早期自然流产患者绒毛中表达上调,可能与自然流产的发病原因有关。     

原因不明复发性流产主动免疫治疗前后CD4+ CD25+调节性T细胞表达频率的研究

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tr）在原因不明复发性流产（URSA）患者主动免疫治疗中的作用。方法上海交通大学医学院附属仁济医院对2004-03—2005-05就诊于门诊的18例URSA患者，采用双荧光标记流式细胞分析技术，检测其淋巴细胞主动免疫治疗前后外周血CD4^＋CD25^＋Tr细胞表达频率的变化。结果主动免疫治疗后URSA组外周血中CD4^＋CD25^＋种Tr较治疗前明显增加（P〈0．05），CD4^＋CD25^＋较治疗前降低（P〈0．05）。主动免疫治疗后，妊娠成功的妇女CD4^＋CD25^brightTr显著多于妊娠失败者。结论主动免疫治疗可提高外周血CD4^＋CD25^brightTr数量，CD4^＋CD25^brightTr可能是调控母胎界面局部免疫耐受形成的一个重要因素，有可能成为URSA患者主动免疫治疗的监测指标之一。     

原因不明习惯性流产患者人类白细胞抗原-DQ区域基因多态性的研究

目的探讨原因不明习惯性流产易感性与人类白细胞抗原(HLA)-DQ区域基因多态性的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法(PCR-RFLP),分析32例原因不明习惯性流产患者(研究组)和54例无不良妊娠史正常妇女(对照组)的DQA1和DQB1基因型.结果研究组的DQB1*0604,0605等位基因频率(12.5%)较对照组频率(2.8%)显著增高(P＜0.05),DQB1*0501,0502等位基因频率(3.1%)较对照组频率(11.1%)显著降低(P＜0.05);两组间DQA1各等位基因频率无统计学差异.研究组的DQA1*01-DQB1*0604,0605单元型频率(12.5%)较对照组(2.8%)显著增高(P＜0.05).结论DQB1*0604,0605等位基因与DQA1*01-DQB1*0604,0605单元型可能是该病的易感基因与易感单元型,而DQB1*0501,0502等位基因可能是防止该病发生的保护性因子.     

IL—12以及IL—12P40对子宫内异症患者NK细胞功能的免疫调节

目的通过观察正常人及子宫内膜异位症(EM)患者外周血及腹腔液中IL-12、IL-12P40含量变化,分析其分子诱导NK细胞对子宫内膜细胞的细胞毒效应的影响,探讨IL-12、IL-12P40分子与EM患者NK细胞功能低下的相关性.方法ELISA酶联免疫检测IL-12、IL-12P40含量以及MTT释放法检测NK细胞毒活性.结果①EM患者腹腔上清液可使正常人外周血NK细胞杀伤活性(16.80%±3.6%)明显下降(8.37%±4.5% )(P＜0.05).② EM患者IL-12含量血清为66.38±12.6 pg/ml,低于对照组84.97±13.7 pg/ml(P＜0.05);腹腔液中为77.76±14.6 pg/ml,低于对照组106.92±10.7 pg/ml(P＜0.05).③EM患者IL-12P40含量血清为35.64±10.6 pg/ml, 与对照组无明显差异;腹腔液含量为79.76±12.6 pg/ml, 高于对照组40.54±10.0 pg/ml(P＜0.05), 并与疾病的程度呈负相关.④IL-12能增强NK细胞对子宫内膜细胞的杀伤,并呈剂量依赖.在10 ng/ml浓度诱导后杀伤率为31.90%,高于对照组的16.80%.⑤IL-12P40能拮抗IL-12对NK细胞活性的诱导,当加入IL-12P40后,使IL-12诱导的活性(29.3%)下降为19.36%.结论子宫内膜异位症患者腹腔液中IL-12P40含量的增高可能与NK细胞功能下降有关.     

表皮生长因子对子宫肌瘤发生发展的影响

目的探讨表皮生长因子与子宫肌瘤的关系.方法用酶联免疫吸附法(ELISA)测定22例子宫肌瘤患者子宫肌瘤组织和正常子宫平滑肌组织内表皮生长因子(EGF)水平.结果正常子宫平滑肌组织EGF质量浓度为(16.64±7.69)mg/L,肌瘤组织EGF质量浓度为(21.38±7.75)mg/L,肌瘤组织EGF质量浓度显著高于正常平滑肌组织(P＜0.05).肌瘤组织EGF质量浓度分泌期为(23.94±5.83)mg/L,增生期为(17.23±7.13)mg/L,两者之间有显著差异(P＜0.05).结论EGF在子宫肌瘤的发生、发展中起重要作用,EGF的合成可能受孕激素的调节.