nm23-H1基因点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的GSK-3β激酶活性的影响

背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关.本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β激酶活性的影响,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据.方法将原代人低转移大细胞肺癌细胞株NL9980、原代人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、空载体转染细胞株L9981-pEGFP、稳定转染nm23-H1基因的细胞株L9981-nm23-H1-pEGFP以及稳定转染在44、96、118、120号位点发生突变后的nm23-H1基因的转基因肺癌细胞株L9981-nm23-H1 S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP和L9981-nm23-H1S120G-pEGFP作为研究对象,应用免疫共沉淀同位素闪烁计数法测定上述肺癌细胞株胞质和胞核中的GSK-3β激酶活性.结果nm23-H1基因发生点突变后,所有转基因肺癌细胞株细胞胞质和胞核中的GSK-3β活性均较突变前有所下降.L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1 H118F-pEGFP、L9981-nm23-H1 S120G-pEGFP分别与L9981-nm23-H1-pEGFP比较,胞质与胞核中GSK-3β激酶活性均存在显著性差异(P＜0.05),其中L9981-nm23-H1P96S-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP胞质中GSK-3β活性存在极显著差异(P＜0.01),L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP和L9981-nm23-H1 H118F-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP的胞核中GSK-3β活性存在极显著差异(P＜0.01).结论①nm23-H1基因突变能显著影响其对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981胞质和胞核中GSK-3β激酶活性的调控作用;②nm23-H1基因可能通过调控L9981中GSK-3β激酶活性来抑制L9981细胞株中Wnt信号传导.     

苎麻织物对红色毛癣菌和须癣毛癣菌的抑制作用

目的通过分析苎麻织物对红色毛癣菌和须癣毛癣菌生长的影响,探讨苎麻织物对常见皮肤癣菌的抑制作用。方法实验采用改良的烧瓶振荡法和奎因法。前者是将苎麻坯布分别与红色毛癣菌和须癣毛癣菌混合振荡培养,对照组为棉坯布组,3 d后分别取培养液稀释5倍后涂布培养皿,计算各自的菌落数和抑菌率并进行统计分析。后者是将2种真菌分别接种在苎麻坯布上,培养60 h后与对照组比较菌落生长情况。结果改良烧瓶振荡法结果显示苎麻织物组抑菌率明显高于对照组(P<0.05),苎麻织物对红色毛癣菌、须癣毛癣菌的抑菌率分别为40%和37%;改良奎因法显示苎麻织物组2种真菌的菌团明显小于对照组。结论苎麻织物可抑制红色毛癣菌和须癣毛癣菌的生长。     

寻常型银屑病患者病程演变及其影响因素

目的 探讨寻常型银屑病程演变的规律及其影响因素。方法 对初发病例进行回顾性分析和前瞻性观察,将病程演变进行分型、统计,对可能影响的因素运用病例对照方法进行分析。结果 寻常型银屑病患者发病后的病程演变过程有６种类型,近１／３的患者中长期片地愈状态,复发频率的重症不足１／１０。结论 机体具有一定的自我康复能力,病程演变受治疗措施。家族史的影响。使用抗癌药治疗对病程演变有较大的负面作用,初发病 列切忌     

银屑病患者表皮角质形成细胞中神经生长因子及其受体的研究

神经生长因子 (nerve growth factor, NGF)是最早发现的神经营养多肽 ,它是外周和中枢神经系统某些感觉和交感神经元存活和分化所必需的 [1]。大量研究表明 NGF还是许多细胞的促分裂剂 ,对免疫系统及免疫应答调节也产生重要影响 [2]。近期研究结果表明 :角质形成细胞能合成、分泌 NGF,自分泌和旁分泌的 NGF能通过特异性结合角质形成细胞自身表达的高亲和力 NGF受体 (NGF－ R)发挥作用 ,促进角质形成细胞增殖 [3,4]。我们采用免疫组化技术原位检测了 NGF及其受体在银屑病皮损、非皮损及正常人表皮角质形成细胞的表达情况 ,并对银屑…     

银屑病伴发高脂血症的相关因素分析

目的探讨银屑病伴发高脂血症的相关因素及内在机制。方法对413例住院银屑病患者病例资料进行回顾性统计分析。结果伴有高脂血症的银屑病患者占同期住院银屑病患者总数的25.91%,其住院时平均年龄、平均病程及银屑病平均始发年龄均明显大于不伴高脂血症者;伴高脂血症的银屑病患者中,吸烟者比例及高血压、糖尿病、高尿酸血症、脂肪肝、肝功异常及肾脏损害发生率均高于不伴高脂血症者,而饮酒者比例亦较高。银屑病严重型比例则低于不伴高脂血症者。结论高脂血症是一种与年龄相关的代谢性疾病,银屑病严重型、高血压、糖尿病、高尿酸血症、脂肪肝、肝功异常及肾脏损害可能与银屑病伴发高脂血症有关。     

银屑病患者千万不要乱投医滥用药

银屑病俗称牛皮癣,此病很常见,但它不是真菌感染的癣,没有传染性,而是表现为皮肤发红、皮屑较多的红斑鳞屑性慢性皮肤病。据专家估计,目前我国至少有240万以上的银屑病患者,而且每年约有10多万新病例发生。专家们的调查研究证明银屑病有一定的遗传因素,但外界环境因素也至关重要。如果环境中无诱发因素,此病则不会发     

触摸疗法在临床护理中的研究进展

介绍触摸疗法的概念、机制和理论基础,总结触摸疗法效果评价工具和在临床护理中的应用现状,为触摸疗法的相关研究和临床应用提供科学参考.     

人重组蛋白nm23-H1突变体原核表达纯化与鉴定

目的:构建nm23-H1的S120G,S120G-P96S及S44A突变体原核表达载体,并在大肠杆菌中表达及纯化。方法:通过PCR方法扩增突变型nm23-H1目的片段,利用基因重组技术构建pET28a-nm23-H1突变型原核表达载体,并进行酶切和测序鉴定,鉴定正确克隆转化BL21（DE3）溶源菌,进行蛋白表达及可溶性分析,同时采用NI-NTA镍柱亲和层析法进行纯化,应用Westernblot方法对纯化后蛋白进行鉴定检测。结果:通过酶切和测序鉴定,pET28a-nm23-H1突变型原核表达载体序列正确,编码框正确。转化溶源菌后能够表达目的蛋白,蛋白表达量高;其中,S44A为可溶性表达,S120G以可溶性表达为主,少部分为包涵体表达,而S120G-P96S则大部分为包涵体表达;Westernblot检测结果提示3个突变型nm23-H1蛋白分子量均为20kD,与预计值相符。结论:成功构建nm23-H1的S120G,S120G-P96S及S44A突变体原核表达载体,S120G和S44A蛋白可以用于下一步实验研究,而S120G-P96S突变体则可能不适于下一步研究。