理气活血滴丸含药血清对ISO诱导乳鼠心脏成纤维细胞转分化的影响及其机制研究

目的：研究理气活血滴丸含药血清对异丙肾上腺素（isoprenaline,ISO）诱导的乳鼠心脏成纤维细胞（CFs）转分化的影响及其机制。方法：离体培养SD乳鼠CFs并经CCK-8法筛选理气活血滴丸含药血清的最适工作浓度。将细胞分为正常对照组（NC组）、空白大鼠血清组（BRS组）、ISO诱导模型组（NC+ISO组）、空白大鼠血清+ISO诱导模型组（BRS+ISO组）、理气活血滴丸含药血清+ISO诱导模型组（LQHXDP+ISO组）。生化法和ELISA法分别检测羟脯氨酸（Hyp）和TGF-β1水平,流式细胞术和Western blot分别检测细胞周期分布和CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、IL-6、p-STAT3、STAT3蛋白表达情况。结果：经Vimentin免疫荧光鉴定所得细胞为CFs,10%的理气活血滴丸以175.0 mg·kg–1剂量灌胃大鼠制备的含药血清为最佳工作浓度;与NC和BRS组相比,经ISO诱导的CFs增殖活力显著增加,细胞培养上清液中Hyp、TGF-β1含量显著增加,S期细胞显著增多,CollagenⅠ、CollagenⅢ、α-SMA、IL-6、p-S...     

莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的影响

目的探讨莪术油对人肺腺癌细胞A549增殖的抑制作用。方法体外培养肺腺癌细胞A549,MTT比色法测定莪术油对A549细胞作用24、48、72 h后抑制率;流式细胞术分析莪术油对A549细胞作用24 h后细胞周期的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测莪术油对A549细胞作用24 h后细胞凋亡与坏死情况。结果莪术油对A549细胞增殖的抑制率随时间延长明显升高,随药物浓度增加抑制作用增强;莪术油对A549细胞作用24 h后,细胞周期停滞在G0/G1期,阻止其进入S期;细胞的早期凋亡、晚期凋亡和坏死比例随着莪术油浓度的增加而增加,且坏死细胞的比例高于凋亡细胞。结论莪术油对A549细胞的增殖具有抑制作用,并呈时间、浓度依赖,其作用是通过阻滞细胞周期及诱导凋亡和坏死来实现的。     

黄芪甲苷对博来霉素诱导的小鼠特发性肺纤维化自噬和焦亡的影响

目的:探究黄芪甲苷对特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)小鼠自噬和焦亡的影响及其作用机制,为黄芪抗肺纤维化的研究治疗提供新思路。方法:C57bl/6小鼠随机分为4组,分别为假手术组、模型组、黄芪甲苷组和地塞米松组。小鼠模型行气管切开术,滴注博来霉素(BLM)诱导成模。黄芪甲苷组和地塞米松组每天分别灌胃黄芪甲苷(50 mg·kg-1)和地塞米松(0.125 mg·kg-1),假手术组和模型组每天予等量生理盐水。小鼠于14 d取材,通过组织病理学染色评估黄芪甲苷对IPF诱导的肺损伤的治疗作用,通过蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测肺组织中,LC3Ⅱ,白细胞介素-1β(IL-1β),IL-18和半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1)的水平以评估炎症反应程度和焦亡水平的表达水平。以苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)三色染色观察肺组织形态和胶原纤维的表达水平。免疫组化(IHC)及Western blot分析自噬和焦亡标记蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组肺组织炎症反应明显、胶原蛋白显著增加(P0.05),与模型组比较,黄芪甲苷组明显抑制肺组织炎症反应,下调胶原蛋白表达(P0.05)。IHC和Western blot检测结果均显示,黄芪甲苷能显著提高LC3Ⅱ蛋白表达(P0.05)同时抑制p62蛋白积累(P0.05),降低Caspase-1,IL-1β和IL-18蛋白表达(P0.05,P0.01)的表达水平。结论:黄芪甲苷治疗显着改善了BLM诱导的小鼠肺纤维化,其作用机制可能与抑制焦亡并增强自噬有关。研究表明黄芪甲苷在抑制肺纤维化方面具有的治疗潜力。     

双藤汤醇提取物对寒痹型胶原诱导大鼠关节炎的抗炎作用北大核心CSCD

目的:观察双藤汤(昆明山海棠、黑骨藤)醇提取物对寒痹型胶原诱导关节炎大鼠抗炎作用的影响。方法:取雄性SD大鼠,除空白组外,其余动物采用胶原诱导关节炎模型。成模动物随机分为模型组、双藤汤60、40、20g生药/kg组、青藤碱0. 028g/kg组,每组10只。连续给药4周后测量动物足跖厚度; HE染色观察踝关节和脾脏病理变化; Western-blotting检测脾脏和关节滑膜IKB-α、TAB-2、IKK-α蛋白表达; ELISA检测细胞因子TNF-a、IL-6、IL-1β。结果:与模型组比较,空白组、双藤汤60g、40g生药/kg组和青藤碱0. 028g/kg组能够显著抑制足跖肿胀程度;脾脏和踝关节病理显示双藤汤60g、40g生药/kg组和青藤碱0. 028g/kg组抑制脾小体萎缩减少和保持踝关节面光滑完整,软骨细胞整齐排列; Western-blotting显示双藤汤60、40、20g生药/kg组、青藤碱0. 028g/kg组IKB-α、TAB-2、IKK-α蛋白表达量受到不同程度抑制; ELISA显示双藤汤60g、40g生药/kg组、青藤碱0. 028g/kg组TNF-α、IL-6、IL-1β表达量下降。结论:双藤汤可能通过抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、IKB-α、TAB-2、IKK-α蛋白的过表达起到对寒痹型胶原诱导关节炎大鼠炎症的抗炎作用。     

三棱对家兔在体子宫平滑肌电活动的影响研究

目的:观察三棱水煎液对家兔在体子宫平滑肌电活动的影响。方法:将32只家兔随机分为4组:空白组,三棱高、中、低剂量组。麻醉后微创暴露子宫并置入特制电极,三棱高、中、低剂量组分别按体重给予2g/kg、1g/kg、0.5g/kg的三棱水煎液。观察各组单波的最大振幅和频率,爆发波的峰面积、持续时间和频率。结果:与空白组相比,三棱各处理组能显著增加家兔子宫肌电单波的频率和最大振幅、爆发波峰面积、持续时间和频率(P0.01)。结论:三棱水煎液对家兔在体子宫平滑肌电活动具有明显的兴奋作用,能够促进家兔在体子宫平滑肌收缩活动。     

博来霉素对急性肺损伤小鼠肝毒性的影响

探讨博来霉素对急性肺损失小鼠肝功能的影响     

黄芪对异丙肾上腺素致心肌肥厚大鼠维生素D-FGF-23-Klotho轴的调节作用研究

目的 观察黄芪对异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚模型血清25羟维生素D3、FGF-23、Klotho的影响.方法 选用40只雄性SD大鼠,随机分为4组:对照组,模型组,黄芪8 g·kg-1组,卡托普利0.05 g· kg-1组.异丙肾上腺素2.4 mg·kg-1皮下注射,连续7d,造模结束,药物干预6周后酶联免疫法(ELISA法)检测血清25羟维生素D3[25(0H)D3]、Klotho、成纤维细胞生长因子(FGF-23),大鼠心肌标本HE染色,观察组织病理改变.结果 与对照组比较,模型组血清25(OH)D3、Klotho降低,伴随血清FGF-23升高(P＜0.05).心肌HE染色见心肌排列紊乱,纤维化增生.与模型组比较,黄芪8 g· kg-1干预后,血清25(OH)D3、Klotho升高,FGF-23降低(P＜0.05).心肌纤维化程度减轻.结论 黄芪具有调节异丙肾上腺素致心肌肥厚大鼠模型维生素D-FGF-23-Klotho轴的作用,逆转异丙肾上腺素致大鼠的心肌肥厚.     

加减补肺汤对肺纤维化大鼠的抗氧化作用

目的:探讨加减补肺汤对肺纤维化(PF)大鼠抗氧化作用.方法:SD雄性大鼠40只,随机分为假手术组、模型组、加减补肺汤组,采用一次性气管滴注博来霉素复制PF模型(1mg/只),假手术组滴注等量的生理盐水.术后2d加减补肺汤组ig中药水煎液10 mL·kg-1(含生药16 g·kg-1),模型组和假手术组ig等量生理盐水,14,28 d处死动物,取血和肺脏,测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和肺组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量,实时荧光PCR测定肺组织中细胞外超氧化物歧化酶(ECSOD)mRNA的表达.结果:加减补肺汤明显改善肺纤维化大鼠的生存状态,降低肺组织中Hyp的含量,降低血清MDA含量,增加ECSOD mRNA的表达.结论:加减补肺汤能提高肺纤维化大鼠生存状态,改善纤维化指标,其机制可能与降低血清中MDA含量,上调ECSOD mRNA表达有关.     

何首乌游离蒽醌对兔颈动脉粥样硬化斑块及基质金属蛋白酶-9的影响

目的：研究何首乌游离蒽醌对动脉粥样硬化（ AS）的影响。方法：40只新西兰大白兔,随机分为AS模型组、何首乌高剂量干预组、中剂量干预组、低剂量干预组、血脂康组和正常组,除正常组外,用免疫注射法加高脂饲料喂养法进行兔颈AS模型的复制,全部从兔耳缘静脉注射牛血清白蛋白,在免疫注射当天,同时开始喂食高脂饲料;16周后,给予何首乌游离蒽醌高中低3个不同剂量灌胃,阳性对照组给予血脂康灌服;给药4周后取材,观察兔颈动脉粥样硬化病理改变,取胸主动脉和腹主动脉做实时荧光定量PCR（ RT-qPCR）检测基质金属蛋白酶-9（MMPs-9）。结果：HE结果显示何首乌游离蒽醌中剂量组能延缓AS的发生和发展;MMPs的表达显示,模型组与正常组相比（P﹤0.05）,提示模型复制成功;高中低剂量组、阳性组与模型组相比（P﹤0.05）,有统计学意义,提示何首乌游离蒽醌和血脂康胶囊都能干预 MMPs-9的表达;阳性组与高中低剂量组相比（ P ﹤0.05）,有统计学意义。结论：何首乌游离蒽醌能干预AS的病变发展,其机制可能与影响MMPs-9有关。     

基于网络药理学和分子对接分析薤白治疗心肌缺血再灌注损伤的作用机制

目的：基于网络药理学方法探讨薤白治疗心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法：在中药系统药理学分析平台（TCMSP）上检索和筛选薤白的活性成分、作用靶点;利用OMIM数据库和CTD数据库搜集疾病靶点;找出薤白作用靶点和疾病靶点共有交集靶点,分子对接软件SYBYL验证薤白活性成分与交集靶点结合活性。然后利用String数据库和Cytoscape软件绘制靶点蛋白互作网络,利用DAVID数据库对靶点进行信号通路富集分析,利用Cytoscape软件构建薤白活性成分-靶点-信号通路网络。结果：筛选获得薤白活性成分10个,治疗疾病作用靶点19个。蛋白互作分析结果显示,17个靶点蛋白存在相互作用关系,IL6、TNF、NOS3、CCL2、VEGFA、SOD1、CAT与10个及以上蛋白存在互作关系。信号通路富集结果显示,上述靶点主要与流体剪切应力与动脉粥样硬化、过氧化物酶体、HIF-1信号通路、松弛素信号通路、细胞因子-细胞因子-受体相互作用、IL-17信号通路以及肿瘤坏死因子信号通路等23条信号通路有关。结论：薤白通过多成分、多靶点、多途径治疗心肌缺血再灌注损伤,其作用机制主要通过调控流体剪切应力、氧化应激及炎性反应来发挥作用。