肿瘤坏死因子受体1在原因不明早期自然流产孕妇蜕膜组织及血清中的表达

近年来的研究发现 ,肿瘤坏死因子 α(TNF α)与原因不明自然流产 (不明流产 )的关系密切[1,2 ] 。TNF α主要通过TNF α受体 1(TNFR1)的信号传导产生生物学效应。本研究检测了早期不明流产孕妇蜕膜组织 ,及血清中TNF α膜受体 1(mTNFR1)及其可溶性受体 (sTNFR1)的表达 ,探讨早期不明流产与蜕膜及母体血清TNFR1表达水平的关系 ,为其病因的深入研究以及临床防治 ,提供新的理论依据。一、资料与方法1 研究对象 :选择 2 0 0 0年 3月至 2 0 0 1年 1月 ,在西安交通大学第一医院妇产科门诊的妊娠 6～ 10周 ,以出现原因不明阴道流血和下…     

miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

目的 建立一种用于肝癌早期诊断和监测的血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法。方法 采用Trizol法提取肝癌患者血清中总RNA,以肝癌发生具有代表性的miRNA-125a基因为检测序列,分别设计逆转录引物、扩增引物和Taqman探针; 构建和制备miRNA-125a重组质粒标准品,建立血清miRNA-125a Taqman 实时荧光定量PCR检测方法。结果 成功构建了miRNA-125a重组质粒载体,制备了miRNA-125a重组质粒标准品,建立了血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR扩增体系。经实验验证,所设计引物具有较好的特异性,引物的最低检测限为78.125 copies/μl; 对17例肝癌患者血清miRNA-125a的检测结果在(1.45×10²～3.52×10⁵)copies/μl之间。结论 血清miRNA-125a Taqman实时荧光定量PCR检测方法的建立,为原发性肝癌早期诊断和监测提供一种新的分子诊断定量方法。     

外周血细胞染色体分析在闭经患者诊断中的意义

目的探讨原发性或继发性闭经患者外周血细胞染色体异常及其临床意义。方法按常规外周血淋巴细胞培养方法制备染色体,G显带,显微镜下核型分析。结果在46例闭经患者中共检出染色体异常21例,总异常率占45.6%,其中31例原发性闭经患者染色体异常18例[46,XY 6例、46,XX inv9 3例、45,XO 2例、45,XO/46,XX 3例、45,XO/45,XO m ar2例、46,XX t(3;X)(q 21;q 22)和47,XXX各1例],异常率占58.1%;15例继发性闭经患者中染色体异常3例(45,XO、45,XO/46,XX和46,XO de l X q22各1例),异常率占20.0%,包括染色体数目异常、缺失、倒位及嵌合。结论染色体异常是导致原发性或继发性闭经的主要原因,对闭经患者外周血细胞中进行染色体核型检查分析,特别是对13岁以上第二性征不发育、体矮、智力发育较差的女性应早期诊断。对研究闭经的病因、治疗和估计患者预后具有十分重要的意义。     

鸦油乳与土贝母对肾癌细胞系GRC—1细胞周期的影响

报道了用流式细胞术观察鸦胆子油乳剂和土贝母制剂对人肾颗粒细胞癌细胞系GRC－1细胞周期的影响。实验结果表明：这二种药物均可使细胞周期的S期细胞百分比含量明显减少；使G1期细胞比率明显升高。提示：鸦胆子油乳剂与土贝母制剂对S期细胞敏感，可能通过抑制S期细胞DNA合成发挥其抗癌作用。     

RSV下呼吸道感染患儿辅助性T细胞亚群Th1／Th2及相关因子的研究

目的：探讨辅助性T淋巴细胞Th1/Th2亚群及其相关细胞因子IFN－γ,IL－4在呼吸道合胞病毒（RSV）下呼吸道感染患儿发病机制中的作用。方法：用单克隆抗体双色免疫荧光FITC／PE双标记,流式细胞仪检测30例RSV下呼吸道感染患儿急性期外周血单个核细胞（PBMCs)辅助性T淋巴细胞CD4^ 及其Th1亚群CD4^ ,CD45RA^ ,Th2亚群CD4^ ,CD45RO^ 的表达,并用ELISA方法同时检测患儿血清中细胞因子IFN－γ,IL－4水平。同期检测15例年龄,性别无差异的健康婴儿为对照。结果：RSV下呼吸道感染组患儿外周血辅助性T淋巴细胞CD4^ 明显低于对照组（P＜0．05）,Th1细胞CD4^ CD45RA^ 明显下降（P＜0．05）,Th2细胞CD4^ ,CD45RO^ 虽有下降,但与对照组相比无统计学差异（P＞0．05）,Th1/Th2比值与对照组相比明显降低（P＜0．05）,RSV下呼吸道感染组患儿血清中IFN－γ,IL－4水平均有降低,以IFN－γ水平下降最为明显（P＜0．01）,IFN－γ／IL－4比值降低（P＜0．05）,结论：婴幼儿RSV下呼吸道感染急性期的免疫功能紊乱主要表现为Th1及其功能下降,Th2及其功能对增强,Th1/Th2的失衡是导致该病发生Th2样反应的重要免疫机制。     

人肾癌细胞系RLC－310的建立和生物学特性

新建成的ＲＬＣ－３１０细胞系来自人原发性肾透明细胞癌组织，在体外经过２年的连续培养，已传代１３０次。细胞可重叠生长，群体倍增时间３２小时，集落形成率４４％，具有超二倍体核型，染色体众数６４。细胞无支原体污染，有特异性的ＬＤＨ同工酶谱，培养上清中可测得高浓度的白细胞介素６活性。细胞接种Ｂａｌｂ／ｃ裸鼠可形成移植瘤，并具有原发肾癌的组织学结构     

人肾癌细胞系RLC-310的建立和生物学特性

新建成的RLC-310细胞系来自人原发性肾透明细胞癌组织,在体外经过2年的连续培养,已传代130次。细胞可重叠生长,群体倍增时间32小时,集落形成率44％,具有超二倍体核型,染色体众数64。细胞没有支原体污染,有特异性的LDH同功酶谱,培养上清中可测得高浓度的白细胞介素6(IL-6)活性。细胞接种Balb/c裸鼠可形成移植瘤,并具有原发肾癌的组织学结构。     

平均荧光强度(MFI)在流式法分析HLA-B_(27)中的意义

目的 :探讨流式法检测 HL A- B2 7和平均荧光强度 (MFI)在强直性脊椎炎 (AS)诊断中的意义。方法 :采用 FITC标记的抗 HLA- B2 7抗体直接法 ,流式细胞仪分析。结果 :87例 AS病人中有 79例 HLA- B2 7阳性 ,其中 1 5例为弱阳性 ,其细胞 HL A- B2 7的表达峰为非正态分布 ,细胞间 HLA- B2 7抗原表达的荧光强度在 1 0 0～ 1 0 2 4通道之间。结论 :HLA- B2 7阳性结果判断时 ,应把细胞的 MFI与阳性细胞的百分率结合起来综合考虑。     

应用流式细胞仪检测HLA-B27

人类白细胞抗原(HLA)B27是HLA B座位上的一个重要的等位基因。实验与研究证实,它与强直性脊椎炎(ankylosing spondylitis,AS)具有高度的疾病相关性,已成为临床支持AS诊断的重要依据。目前检测HLA B27的主要方法有补体依赖性微量淋巴细胞毒试验、玫瑰花法、ELISA法、流式细胞法、PCR法等。我们用荧光标记的单克