儿童临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的了解儿童临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的耐药特征。方法收集我院住院患儿中分离的120株多重耐药铜绿假单胞菌，作药敏试验，用琼脂稀释法测定抗菌药物的MIC值，按照2005年CLSI推荐标准判断结果。数据分析使用WHONET5．3软件。结果多重耐药铜绿假单胞菌对氨曲南的耐药率最高（86．7％），头孢他啶仍具较好的抗菌活性；环丙沙星耐药率最低（2．5％）。亚胺培南和美罗培南的耐药率分别达到34．2％、35．8％，两者MIC50和MIC50相同，分别为4和32mg／L。59株细菌对碳青霉烯类抗生素耐药，占49．2％。碳青霉烯类抗生素耐药株与非耐药株对头孢他啶、头孢吡肟、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦的耐药率差异有显著性（P〈0．05）。结论目前从儿科临床分离多重耐药铜绿假单胞菌的多重耐药现象严重。     

16S～23SrDNA内转录间隔区序列聚合酶链技术鉴定凝固酶阴性葡萄球菌

目的采用分子生物学技术鉴定凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)。方法用16S-23SrDNA内转录间隔区序列PcR(ITS-PCR)技术，对6株质控菌和171株已通过AutoScan-4微生物分析仪鉴定过的CNS临床分离株进行分型鉴定。结果质控菌株及经APIStaph系统确证的11种CNS得到各自不同的ITS-PCR电泳类型，建立了该技术在本实验室的CNS初级数据库，包括表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、腐生葡萄球菌、木糖葡萄球菌、华纳葡萄球菌、头部葡萄球菌、孔氏葡萄球菌解脲亚种、松鼠葡萄球菌、耳葡萄球菌和模仿葡萄球菌。只有松鼠葡萄球菌表现了多态性。该ITS-PCR数据库对所研究的临床株的识别率为93．57％(160／171)，准确率达93．75％(150／160)。API Staph系统证明，ITS-PCR法鉴定结果较为准确，AutoScan-4微生物分析仪检测CNS至少有9．36％(16／171)是不确切的。结论ITS-PCR证明是一项有价值，对CNS可选用的简便、快速、可靠，廉价的分子生物学鉴定技术。     

流感嗜血杆菌氨苄西林耐药基因TEM-1、ROB-1的检测

目的探讨我国北京，上海，广州3地2000—2003年流感嗜血杆菌氨苄西林的耐药机制。方法选取2000—2003年上述3地上呼吸道感染患儿鼻咽部分离培养的899株流感嗜血杆菌，采用Etest法检测氨苄西林耐药情况。用头孢硝噻酚纸片进行β内酰胺酶检测，PCR方法检测产酶菌株TEM-1、ROB-1耐药基因携带情况。结果74株氨苄西林耐药菌株均产生β内酰胺酶，PCR检测均为TEM-1基因阳性，未发现ROB-1基因阳性菌株。结论我们研究的儿童上呼吸道携带流感嗜血杆菌对氨苄西林耐药的机制主要是TEM-1型β内酰胺酶的产生。     

儿童患者中对碳青霉烯类耐药的绿脓假单胞菌产金属酶基因型研究

目的研究儿童患者中对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌产金属酶的基因型。方法本研究收集了2003年12月至2005年11月我院住院患儿中分离出的对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌59株。使用E试验法检测产金属酶的耐药表型，PCR技术检测编码金属酶的IMP、VIM、SPM和GIM4种基因型。PCR反应产物进行纯化后，使用双脱氧末端终止法进行DNA测序。将得到的拼接序列与GenBank中Blast进行同源分析，确定其基因亚型。结果59株对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌中，纸片法检测金属酶表型结果阳性29株，占49．2％。PCR检测金属酶基因型阳性39株，占66．1％，其中IMP型阳性35株，占89．7％，VIM型阳性4株，占10．3％。未检测出SPM和GIM型金属酶。测序结果显示，IMP型测序结果均为产IMP．1亚型金属酶的绿脓假单胞菌。VIM型测序结果均为产VIM-2亚型金属酶的绿脓假单胞菌。结论儿童患者中对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌，产金属酶率高于成人报道。产生的金属酶同时存在IMP-1和VIM-2两种基因型，其中以IMP-1亚型为主，少部分为VIM-2亚型。产金属酶是儿童患者对碳青霉烯类抗生素耐药的绿脓假单胞菌的重要耐药机制。在儿科进行对碳青霉烯类耐药的绿脓假单胞菌产金属酶的监测十分重要。     

两种培养基分离A族链球菌的比较

为提高Ａ族链球菌 (ＧＡＳ)检出率 ,我们用选择性与普通培养基对 2 0 1份脓疱疮患儿脓液分泌物标本进行病原菌分离 ,结果报告如下。1 培养基 :普通培养基 :ＴＨＢ培养基 (Ｄｉｆｃｏ公司产品 ) ;选择性培养基 :在ＴＨＢ培养基基础上 ,加入结晶紫0 .15 μｇ/ｍｌ。2 菌种及标本来源 :(1)菌种 :标准ＧＡＳ菌种由俄罗斯圣彼得堡实验医学研究所提供 ,标准金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ2 92 13购自卫生部药品和生物制品检定所。 (2 )临床标本 :收集自 1999年 8～ 9月我院门诊确诊为脓疱疮的 2 0 1份患儿的脓液分泌物。结果 :用普通ＴＨＢ培养基分离Ｇ…     

小儿下呼吸道感染中卡他莫拉菌的分离特点与耐药性分析

目的 了解小儿卡他莫拉菌感染的临床特点、耐药性及预后,指导合理用药.方法 对重庆市儿童医院10 442 例下呼吸道感染(lower respiratory infection, LRI)患儿进行痰培养;对分离出的卡他莫拉菌行药敏试验及β-内酰胺酶检测,并分析其临床特点与预后;同时检测其他呼吸道病原.结果 卡他莫拉菌感染多见于婴幼儿,常见合并其他病原感染;该菌冬季分离率最高;β-内酰胺酶阳性率为63.4%,其中对氨苄西林及复方新诺明的耐药率分别为46.2%和43.4%,对头孢类及含酶抑制剂的抗生素耐药率不超过5.0%;临床治疗较顺利.结论 小儿LRI中卡他莫拉菌的感染与年龄、季节有关,产β-内酰胺酶率较低,对氨苄西林的耐药率居第一,应对其耐药性及产酶率进行连续监测,提供合理用药依据.     

重庆地区儿科第三代头孢菌素的使用与革兰阴性杆菌耐药现状分析

目的:了解重庆地区儿科第三代头孢菌素(TGC)的使用与临床分离G-杆菌的耐药情况,为临床合理使用TGC,遏制G-杆菌耐药分离株的增长提供参考.方法:从医院HIS系统中提取2002年1月至2005年12月所有来院就诊病人消耗的TGC药品资料,并统计TGC的用药频度;微生物室的细菌学检查按照卫生部医政司编写的《全国临床检验操作规程》进行培养,分离鉴定细菌,药敏采用Kirby-Bauer纸片扩散法,收集同期全院所有临床科室在细菌室的送检标本和G-杆菌检测结果的详细资料进行统计分析.结果:4年中消耗TGC的DDDs和金额分别占同期抗生素的6.42%和15.23%,单品种主要集中在头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、头孢哌酮等4个品种上;临床分离菌株以G-杆菌为主,占临床分离菌株的67.96%,其中以大肠埃希氏菌(38.38%)、肺炎克雷伯菌(34.83%)、铜绿假单胞菌(13.36%)和流感嗜血杆菌(9.51%)为主;4年中G-杆菌对4个TGC品种的耐药率分别为45.56%、40.19%、47.75%和48.28%,TGC消耗量(DDDs)与G-杆菌耐药率之间具有相关性(r=0.7751,P=0.039).结论:要遏制G-杆菌耐药性的快速增长,规范和合理使用TGC是关键措施之一.     

上呼吸道感染患儿肺炎链球菌血清群/型及耐药分析

目的了解患上呼吸道感染的0~5岁儿童肺炎链球菌的血清群/型及其对抗生素耐药情况。探讨肺炎链球菌疫苗在中国儿童使用的意义。方法取患儿鼻咽分泌物,分离出137株肺炎链球菌。采用荚膜肿胀法(Quellinngtest)进行血清群/型分析。E-test及K-B纸片扩散法检测对青霉素等13种抗生素的敏感性。结果疫苗相关血清型占63%,最常见的血清群/型为19、6、23、14。青霉素不敏感率为33%,较往年增高。青霉素耐药菌株对头孢类抗生素有交叉耐药性,红霉素、阿奇霉素耐药率达94%,应引起临床高度重视。结论疫苗相关血清群/型在0~5岁儿童覆盖率较高,肺炎链球菌疫苗的使用有利于降低儿童肺炎链球菌感染的发病率,有助于减少抗生素耐药的产生。     

4地儿科临床分离革兰阳性球菌2000—2006年耐药性监测

目的探讨我国不同地区医院儿科主要革兰阳性球菌耐药的情况。方法对2000年1月1日至2006年12月31日5所儿童专科医院检验科报送检标本分离出的4种革兰阳性球菌用Kirby-Bauer琼脂扩散法进行抗生素敏感实验。结果5所医院临床分离出金黄色葡萄球菌共7825株,其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)的检出率为6.87%,红霉素总耐药率为66.39%,并且有逐年上升趋势,未发现对万古霉素耐药或中度敏感菌株。分离出肺炎链球菌4781株,其中青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSP)的平均检出率为68.64%,红霉素耐药率为90.80%,两者耐药率均逐年上升。分离出1301株β溶血性链球菌,对青霉素全部敏感,对红霉素的耐药率为80.94%,且耐药率在逐年增加。分离出肠球菌共2216株,对万古霉素的中度敏感率为3.11%,氨苄西林的耐药率为48.03%,红霉素的耐药率高达86.47%。结论除β溶血性链球菌外,多数革兰阳性菌对广谱青霉素的耐药率都偏高;对红霉素的耐药率居高不下并有逐年上升的趋势,革兰阳性菌对万古霉素和环丙沙星的敏感率较高。MRSA仍在较低水平,本研究未发现耐万古霉素金黄色葡萄球菌(VRSA),但出现对万古霉素中度敏感耐药的肠球菌。因此要加强对革兰阳性球菌耐药性和抗生素使用情况的监测,合理使用抗生素。     

重庆地区2000-2004年儿童常见细菌的耐药性监测

目的：了解重庆地区儿童感染的临床分离细菌对常用抗菌药物的耐药趋势。方法：对2000-2004年我院细菌室临床分离出的前5位革兰阴性菌、革兰阳性菌共7352株进行细菌鉴定及药敏试验．对4234株苛养菌按常规方法鉴定及K—B纸片扩散法进行药敏试验。结果：革兰阴性菌5777株，占78．7％．革兰阳性菌1565株，占21．3％。苛齐菌4234株。结论：革兰阳性菌对常用抗菌药物的总耐药率变化不大。但对复方新诺明有逐年下降趋势；革兰阴性菌对常用抗菌药物的总耐药率有下降趋势．但对复方新诺明有逐年上升趋势。