呼吸道病毒和非典型病原体与下呼吸道感染的相关性研究

目的探讨成人下呼吸道感染患者中常见呼吸道病毒和非典型病原体的感染状况。方法采集2006年1月-2009年4月195例下呼吸道感染患者的支气管肺泡灌洗液(BALF),采用多重PCR技术检测常见的7种(11个亚型)呼吸道病毒和肺炎支原体(LP)、肺炎衣原体(CP)、嗜肺军团菌(LP)。其中62例同时采集BALF、鼻咽拭子(NpS)和血清三种标本进行病原体检测。结果 195例BALF 65例阳性,患者阳性率33.3%(65/195),共检出72种(株)病原体,病原体阳性率36.9%(72/195),14种(型)病原体检出9种(型),以流感病毒A型(F luA)和鼻病毒(RhV)检出率为高,副流感病毒2型(PIV2)、副流感病毒4型(PIV4)、人类偏肺病毒(hMPV)、人类博卡病毒(HboV)和嗜肺军团菌(LP)未检出。患者以社区获得性肺炎(CAP)和慢性阻塞性肺病急性发作期(AECOPD)阳性率高。62例同时三种标本检测阳性率NpS为50.0%(31/62)、BALF 38.7%(24/62)、血清32.3%(20/62)。结论深圳地区成人下呼吸道感染中病毒感染具有较高比例,以F luA和RhV为主。BALF和NpS非典型病原体检出率较低,所有标本均未检测出hMPV、HboV和LP。     

呼吸道病毒与成人下呼吸道感染相关性探讨

目的:探讨成人下呼吸道感染患者病毒感染状况.方法:采集健康体检者106例(对照组)和1年期内下呼吸道感染住院患者208例(观察组)鼻咽拭子,采用多重PCR技术检测常见的7种(11个亚型)呼吸道病毒.结果:对照组106例中4例阳性.其中流感病毒A型3例,鼻病毒1例.观察组208例患者中88例检出107株病毒,患者阳性率42.3%.病毒株检出率51.4%.检出病毒以流感病毒A型、鼻病毒、副流感病毒1型为高,三者占检出病毒株的81.3%(87/107),人偏肺病毒和人博卡病毒未见阳性.13例患者同时检出2种以上病毒:1例同时检出5种病毒,3例同时检出3种病毒,9例同时检出2种病毒.病毒感染者中临床诊断社区获得性肺炎占34.8%(39/112),急性支气管炎47.5%(19/40),慢性阻塞性肺病急性加重55.0%(22/40),支气管扩张50.0%(8/16).病毒尤其是流感病毒A型、副流感病毒1型感染时间分布以一季度为高.结论:深圳地区成人下呼吸道感染患者中病毒感染具有较高比例,以流感病毒A型、鼻病毒、副流感病毒1型为主,且具有一定比例的2种以上病毒混合感染率.     

迈瑞系列血细胞分析仪检测指标可靠性评价分析

<正>为了解国产迈瑞(MINDRAY)BC-5500和迈瑞(MIND-RAY)BC-3000两种型号血细胞分析仪的主要性能指标和情况,根据1984年国际血液学标准化委员会(international committee for standardization in haematology,ICSH)公布的关于自     

MRFQ SYBR Green I-PCR结合融解曲线快速检测产ESBLs菌耐药基因

目的 探讨SYBRGreenⅠ实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析方法快速检测常见超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药基因的可行性。方法选取经测序验证携带有tern、shy、ctx—m-1组、ctx-m-9组耐药基因的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作为阳性菌株,建立细菌耐药基因SYBRGreen1实时荧光定量多重PCR检测体系,这四种耐药基因的扩增产物片段长度和融解温度（Tm值）都不同,可通过结合融解曲线分析加以区别。用此体系检测110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌,根据特异性Tm值的有无和差别判断是否携带有耐药基因及携带耐药基因型别。结果与耐药表型、琼脂糖电泳、测序结果对照。结果经SYBRGreenⅠ实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析,分别有47株（42．7％）大肠埃希菌和34株（36．2％）肺炎克雷伯菌携带有这四种常见的ESBLs耐药基因,与表型确证实验和电泳结果比较达到100％的一致性;根据Tm值的不同,对耐药基因进行鉴别,携带单个耐药基因菌株的检测与电泳结果和测序结果比较达到100％的一致性;对携带多个耐药基因菌株的检测不能达到较好的分辨性。结论SYBRGreenI实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析方法可以快速筛查常见超广谱β-内酰胺酶（EsBI曲耐药基因,对携带单个耐药基因的细菌的基因型能进行准确鉴定。这对指导临床医生合理使用抗生素进行临床治疗和对耐药细菌的流行病学监测具有重要价值。     

孕妇早产与病原生物感染的相关性

目的分析梅毒螺旋体（TP）、解脲支原体（UU）、沙眼衣原体（CT）及弓形体（Tox）、风疹病毒（RuV）、巨细胞病毒（CMV）、单纯疱疹病毒（HSV）（合称TORCH）系列病原生物感染与早产的相关性. 方法对315例早产妇女和100例正常育龄而无自然流产史妇女,采用酶联免疫法 （ELISA）进行梅毒螺旋体和TORCH系列病原体血清IgM抗体检测,同时采用胶体金快速检测法和培养法进行宫颈分泌物CT抗原检测和UU分离. 结果早产组血清TP、Tox、CMV、RuV、HSV IgM阳性率分别是8.57%、16.19%、23.65%、 20.00%、39.05%、对照组阳性率分别是0、2.00%、7.00%、4.00%、9.00%;宫颈分泌物UU、CT抗原检出率早产组分别为37.78%、13.65%,对照组分别为18%、5%,对照组与早产组差异显著（P＜0.05）. 结论 TP、 UU、CT及TORCH系列病原微生物感染是引起孕妇流产的一个不可忽视的重要原因,孕前及孕期进行相关病原微生物检测,对保证胎儿健康出生具有重要的临床意义.     

脑钠肽前体及氨基末端脑钠肽前体基因的克隆与表达

目的在大肠杆菌中表达脑钠肽前体(proBNP)及氨基末端前体蛋白(NT-proBNP)。方法采用分子生物学技术构建重组质粒PGEX-20T-proBNP和PGEX-20T-NT-proBNP,分别对其进行PCR、双酶切和测序鉴定,然后将已测序鉴定的包含两种重组质粒的工程菌,转化至大肠杆菌BL21菌中表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,并用Western-blot鉴定纯化的重组蛋白。结果在大肠杆菌中成功的表达脑钠肽前体及氨基末端前体蛋白,两种蛋白均以可溶性形式表达,更有利于保存其生物学活性。结论两种蛋白的成功表达将有利于后续的单抗制备及检测试剂盒的开发奠定基础。     

深圳市儿童秋冬季腹泻诺如病毒检测及基因型分析

目的 了解深圳市儿童秋冬季腹泻中诺如病毒（Nov）的感染状况,并对阳性株进行基因型分析.方法 收集深圳地区多家医院2009年9月至2010年1月腹泻患儿粪便标本307份,通过逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法进行诺如病毒核酸扩增,部分阳性标本的PCR产物经纯化、测序,结合GenBank参考株相应核酸序列构建系统进化树并进行基因型分析,采用SimPlot3.5.1对重组株进行分析和鉴定.结果 307份粪便标本中诺如病毒核酸阳性38例,阳性率为12.4％,以6～24个月龄婴幼儿感染为主,占全部病例数的81.6％（31 /38）,感染的发病高峰为10、11月份,占全部病例数的73.7％ （28/38）;26份测序标本中25株属于GⅡ.4型2006b变异体,1株为GⅡ.12/GⅡ.3型重组株.结论 诺如病毒是深圳市儿童秋冬季腹泻的重要病原体,优势流行株为GⅡ.4型2006b变异体,深圳首次检出的诺如病毒重组株为GⅡ.12/GⅡ.3型.     

人巨细胞病毒多肽抗原的免疫原性分析

目的分析人巨细胞病毒多肽抗原的免疫原性强弱,寻求与早期诊断相关的抗原成分。方法应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹技术对比分析细胞抗原与病毒抗原的差异,确定病毒多肽抗原的存在,利用不同时期免疫动物的多克隆抗体分析病毒多肽抗原的免疫原性。结果SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和多克隆抗体免疫印迹结果表明分子量为65kD和72kD的人巨细胞病毒多肽抗原免疫原性较强,分子量为51kD和58kD的病毒多肽抗原免疫原性较弱,分子量为150kD的抗原免疫原性最弱。结论65kD和72kD的人巨细胞病毒多肽抗原可以应用于病毒感染的临床确诊。     

泌尿生殖道解脲和人型支原体感染及药敏分析

目的：了解本地区泌尿生殖道支原体感染状况及药敏分析。指导临床合理用药。方法：用液体培养的方法分离鉴定解脲支原体和人型支原体并做计数和9种药敏试验。结果：1378例患者支原体培养阳性430例。占31．20％；其中单纯UU377例，占27．4％；单纯NH10例。占0．73％；UU＋NH混合感染43例，占3．12％。泌尿生殖道支原体感染以UU为主，占87．7％；其次为NH占2．3％和UU＋NH占10％。药敏结果显示UU、NH和UU＋NH感染三种模式，均对强力霉素、米诺环素的敏感性强（65～90％），对罗红霉素的敏感性最差（0～6％）；除UU对克拉霉素的敏感性为76％。对其余抗生素敏感性均小于50％以下。结论：米诺环素、强力霉素可以作为目前治疗UU、NH和UU＋NH感染的首选。支原体耐药性的长期监测是指导临床治疗的重要依据，临床医生应根据药敏结果合理选择抗生素。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌基因型分析

目的分析肺炎克雷伯菌临床分离株产超广谱β-内酰胺酶(ESBL s)的主要基因型。方法用表型确定的临床分离产ESBL s的肺炎克雷伯菌34株,分别用TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M-9扩增引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物进行序列分析。结果PCR扩增结果显示TEM,SHV,CTX-M-1,CTX-M-2和CTX-M 9的阳性率分别为47.06%,85.29%,26.47%,32.35%和52.94%,CTX-M型总阳性率为88.24%,序列分析证实扩增为目的产物。结论34株ESBL s肺炎克雷伯菌的主要基因型是CTX-M型和SHV型,且同时携带2种以上基因的菌株占所测菌株的82.35%,需引起临床的高度重视。