胼胝体胶质瘤的显微手术及综合治疗策略

目的:探讨胼胝体胶质瘤的临床特点、显微手术可行性和术后综合治疗策略以改善预后。方法：回顾性分析1995年1月至2007年12月我院收治的82例胼胝体胶质瘤患者的临床特点、诊治经过及预后。术前根据影像特点选择最佳手术入路和切除的策略。术中应用神经导航8例,B超监测4例,超声吸引手术刀(CUSA) 辅助切除肿瘤5例。术后病理学证实为胶质瘤且级别Ⅱ级以上者行放化疗。化疗方案：替尼泊苷（VM-26）+甲环亚硝脲（Me-CCNU）和(或)替莫唑胺。放疗方案：根据病理级别和胶质瘤范围,以普通外照射为主要方式进行个体化设定。采用门诊、电话及邮件等方式进行随访。结果：82例患者临床表现为头痛、呕吐44例,癫16例,精神症状12例,记忆力减退10例,轻偏瘫20例。显微手术经纵裂入路44例,经皮质入路24例,经纵裂-皮质联合入路5例,活检7例,仅放化疗2例。术中见肿瘤主体位于胼胝体嘴部6例,膝部36例,体部30例,压部10例;镜下全切除45例,次全切除13例,部分切除15例,活检7例。病理证实为星形胶质细胞瘤48例,少突胶质细胞瘤11例,室管膜瘤2例,胶质母细胞瘤19例。获得随访61例,临床症状改善45例,无明显变化9例,加重7例;1年生存率为89%,2年71%,3年62%,5年39%,最长生存期140个月,中位生存时间47个月。COX生存分析提示年龄大、肿瘤病理级别高、切除不完全是预后较差的相关因素。结论：胼胝体胶质瘤是位置特殊的肿瘤,术前应充分了解肿瘤解剖位置、毗邻关系、血供等,正确的手术入路和策略可降低致残率并取得良好疗效,经纵裂入路是常用入路,神经导航、术中超声监测结合显微技术可提高肿瘤切除程度和减少损伤及改善预后。     

Id2 shRNA慢病毒载体的构建及其转染后对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的构建能高效敲减分化抑制因子2(Id2)基因的短发夹状小干扰RNA(shRNA)慢病毒载体,并观察敲减Id2对胶质瘤细胞株U251增殖和凋亡的影响。方法设计并合成特异性针对Id2基因的shRNA序列,将其构建到慢病毒载体pGCSIL-GFP中。以含有Id2基因的质粒为模板,扩增Id2基因cDNA序列的特异性片段,插入真核表达载体pEGFP-N1-3FLAG。构建含Id2基因质粒和不同靶点的RNAi慢病毒载体,共转染入工具细胞293T,筛选出适合浓度慢病毒感染U251细胞株。MTT法检测敲减Id2后胶质瘤细胞增殖的改变,RT-PCR检测Id2敲减后U251细胞caspase 3的表达。结果构建后载体的PCR鉴定及DNA测序结果与预期一致。与对照组相比,转染Id2 shRNA的U251细胞增殖降低,凋亡率升高,caspase3表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建的针对Id2基因的RNA干扰慢病毒载体体外转染可抑制胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡。     

新生大鼠上丘脑组织培养研究

目的探讨新生大鼠上丘脑组织培养方法,并对其在培养过程中的变化进行观察.方法取出生4 d的SD乳鼠上丘脑组织,分别在鼠尾胶原玻片、多聚赖氨酸玻片和Biocoat培养小室上进行组织培养,使用相差显微镜动态观察组织块生长情况.48 h后观察组织块贴壁率,在培养5d时使用图像分析仪观察细胞迁移情况,测量最大迁移距离.使用乳酸脱氢酶试剂盒,测量组织培养液中乳酸脱氢酶活性的动态变化.常规HE染色形态学观察,并使用透射电镜观察组织块超微结构.结果与传统的培养载体相比,上丘脑组织在Biocoat培养小室上进行培养可以获得较高的组织贴壁率和细胞迁移距离.上丘脑组织在接种后3～15 d,其培养液中乳酸脱氢酶活性保持在较低水平.培养早期上丘脑组织块边缘出现细胞突起,胶质细胞迁移,随着培养时间延长,细胞出现凋亡,组织结构破坏.结论Biocoat培养小室是进行新生大鼠上丘脑组织培养的理想载体,接种3 d后组织生长趋于旺盛,而在2周后多数组织的生长逐渐衰退.     

大鼠神经干细胞通过Wnt/β-catenin途径抑制神经胶质瘤生长

[摘要]目的探讨大鼠神经干细胞对C6成胶质细胞瘤细胞生长的影响,并探讨可能的作用机制。方法采用0.4 μm孔径的Transwell小室将C6成胶质细胞瘤细胞和大鼠神经干细胞(NSCs)按不同比例[(C6NSCs):51(2×1054×104)、11(2×1052×105)、15(4×1042×105)]在无血清培养基中共培养7 d作为实验组,以单独培养的C6成胶质细胞瘤细胞作为对照组。采用SCID荷瘤动物模型观察共培养体系中C6成胶质细胞瘤细胞的成瘤能力;利用半定量RT-PCR及蛋白质印迹等方法分析在共培养体系中C6成胶质细胞瘤细胞凋亡相关基因(BMP2、c-Myc、Bcl-2、p53 mRNA)及Wnt信号分子蛋白(β-catenin、survivin)的表达。结果与实验组相比,对照组的组织切片中肿瘤细胞恶性程度高,有较多的核分裂像,核/质比例高;大片区域出现单核或多核瘤巨细胞。在实验组中,随着共培养体系中起始神经干细胞比例增高,肿瘤细胞异型性逐步降低。随着共培养体系中起始神经干细胞比例增高,C6成胶质细胞瘤细胞p53 mRNA的表达水平逐步增高,BMP2、c-Myc、Bcl-2 mRNA表达水平则逐步降低(P<0.05),β-catenin、survivin蛋白表达水平逐步降低(P<0.05)。结论大鼠神经干细胞在胶质瘤微环境中可能通过Wnt/β-catenin途径促进神经胶质瘤细胞凋亡进而抑制神经胶质瘤生长。     

大鼠海马神经元癫(癎)模型中神经元凋亡及caspase 3基因的表达

目的：探讨体外培养大鼠海马神经元癫痫模型中神经元丢失的分子机制。方法：制备大鼠海马神经元癫痫样放电细胞模型,以膜片钳全细胞记录对模型放电进行检测,采用RT-PCR法克隆大鼠全长caspase3 cDNA,采用原位杂交和流武细胞术检测模型中caspase3基因表达和神经元凋亡情况。结果：成功克隆获得大鼠全长caspase3 cDNA,其序列与文献报道一致。模型组海马神经元癫痫样放电3h后caspase 3基因表达开始增多,6h后凋亡细胞开始明显增加,两者均较对照组明显增加。结论：癫痫样放电可能启动神经元caspase3表达,继而介导神经元凋亡。     

海绵窦区硬脑膜动静脉瘘的栓塞治疗

目的　探讨海绵窦区硬脑膜动静脉瘘的治疗方法。方法　海绵窦区硬脑膜动静脉瘘共 12例 ,经颈外动脉以微粒栓塞 3例 ;以正丁基氰基丙烯酸异丁酯 (NBCA)栓塞 2例 ;经颈外动脉插入海绵窦以NBCA栓塞1例 ;经岩下窦以机械可脱性弹簧圈 (MDS)栓塞 1例 ;经眼上静脉以MDS栓塞 5例。结果　瘘口完全消失 8例 ;瘘口残留 4例 ,其中 2例瘘口残留患者 3个月后症状好转。结论　根据不同的类型 ,经静脉栓塞和经动脉栓塞均可作为海绵窦区硬脑膜动静脉瘘的有效治疗方法     

中国人脑星形胶质细胞瘤中表皮生长因子受体的表达

目的：研究中国人脑星形胶质细胞瘤中表皮生长因子受体（EGFR）的表达，并探讨其临床意义。方法：应用免疫组化方法（Evision-HRP法）检测人脑星形胶质细胞瘤标本（含配对瘤周组织）以及体外培养的多株人和大鼠胶质瘤细胞系的EGFR表达。结果：人脑星形胶质瘤组织EGFR阳性表达率为70．3％（26／37），明显高于瘤周组织（32．4％，12／37），两者差别非常显著（P＜0．01），病理分级为Ⅲ-Ⅳ级肿瘤标本EGFR阳性表达率为21／25，显著高于I－Ⅱ级者（5／12，P＜0．01）。体外实验显示人脑胶质瘤细胞株U251MG、U87MG以及大鼠脑胶质瘤细胞株C6和EGFR平均表达水平分别为“ ”、“－～＋”、“＋”。结论：中国人脑星形胶质瘤存在EGFR的过度表达，提示EGFR可能是恶性脑胶质瘤细胞的重要标志物。     

立体定向间质内放射治疗丘脑胶质瘤的临床分析

报告采用ＣＴ引导下立体定向间质内放射治疗丘脑胶质瘤２６例，其中男１６例。女１０例，肿瘤位于左侧丘脑１１例，右侧丘脑１５例，其中胶质瘤Ⅰ级７例，Ⅱ级１５例，多形胶质母细胞瘤４例。随访时间最长３年零５个月，随访中发现死亡１２例，死亡率为４２．３％。本组无手术死亡。术后均未发生偏瘫。本文着重讨论了两种手术方法的结果；不同剂量照射后影像学的改变及并发症的预防和治疗问题。     

慢性硬脑膜下血肿钻孔引流术后并发症的诊治

慢性硬脑膜下血肿钻孔引流术后并发症的诊治陈少军，梁玉敏，张光霁，卢亦成我院近１０年来采用钻孔引流治疗慢性硬脑膜下血肿（ＣＳＤＨ）２２８例，现对其中２２例术后并发症进行总结，探讨其发生机理及防治等问题。临床资料一般资料本组根据病史、临床表现、影像学诊断...     

扩大经蝶入路显微手术治疗蝶斜区肿瘤

目的探讨采用扩大经蝶窦入路切除蝶斜区肿瘤的方法。方法1999～2005年采用扩大经蝶入路切除蝶斜区肿瘤25例,肿瘤直径1.9～4.2cm;采用标准经鼻中隔蝶窦入路,先行切除经蝶入路视野内的肿瘤,而后调整Hardy扩张器方向指向斜坡方向,进行手术入路的扩大。根据术前影像学资料、术中"C"型臂监测、神经导航、神经内镜以及术者的经验决定斜坡骨质磨除或咬除的范围,直至显露正常骨质和硬脑膜。结果全切21例(84%),次全切除3例(12%),部分切除1例(4%)。结论采用扩大经蝶窦入路切除蝶斜区肿瘤,肿瘤显露满意,肿瘤全切除率高,无明显手术并发症。神经导航及内镜的辅助使得扩大经蝶入路更为安全、有效。