人脑胶质瘤细胞株中RIZ1基因启动子甲基化状态的研究

检测4种人脑成胶质细胞瘤细胞株中成视网膜细胞瘤蛋白结合锌指结构基因1（retinoblastoma protein-interacting zinc finger gene1,RIZ1）基因启动子区的甲基化状态,进一步认识RIZ1在胶质瘤发病机制中的作用。方法：应用甲基化特异性PCR法（methylation specific PCR,MSP）检测4种人脑成胶质细胞瘤细胞株U87、U251、A172和T98中RIZ1基因启动子区的甲基化水平,其中U87细胞发生甲基化,被选为后续实验对象。RT-PCR检测U87细胞经5-Aza-CdR处理前后RIZ1 mRNA表达量的变化,MTT检测5-Aza-CdR对U87细胞生长增殖的影响。结果：4种人脑成胶质细胞瘤细胞株中U87和U251细胞中检测到RIZ1基因启动子区域发生甲基化;U87细胞经5-Aza-CdR处理后其RIZ1 mRNA的表达量上调;MTT法检测显示5-Aza-CdR能抑制U87的生长增殖,且与5-Aza-CdR的浓度和作用时间呈负相关。结论：RIZ1基因启动子高甲基化是人脑成胶质细胞瘤细胞株中RIZ1基因表达下调的重要机制。     

RNA干扰在脑胶质瘤分子靶标研究中的进展

脑胶质瘤是神经外科中最常见的神经肿瘤,发病率约占颅内肿瘤的44.69%,其中恶性胶质瘤占70%[1-2] ,目前标准的治疗方法是最大限度地进行手术切除,并结合放、化疗和其他治疗方式.但由于胶质瘤存在恶性增殖和侵袭性强的特点,手术很难完全切除,且术后极易复发,如何控制胶质瘤的恶性增殖和侵袭是目前研究的焦点.     

后筛窦气化发育对蝶鞍区手术的影响

目的为了了解后筛窦气化发育对前颅底外科及蝶鞍区手术的影响及术前指导意义.方法取50具成人头颅标本,行冠状位、矢状位及水平位薄层CT扫描,从不同层面及不同方位观测后筛窦的气化发育情况.结果发现属管前型的占23%(23侧);半管型的占28%(28侧);全管型的占33%(33侧);蝶鞍型的占16%(16侧).其中两侧气化分型完全相同者占33例(66侧);两侧气化不相同者占17例(34例).发现属I°后筛窦的占43%(43侧);属Ⅱ°后筛窦的占35%(35侧),其中Ⅱa°后筛窦的占19%(19侧),属Ⅱb°后筛窦的占16%(16侧);属Ⅲ°后筛窦的占22%(22侧).其中两侧分度完全相同者占29例(58侧);两侧分度不相同者占21例(42侧).另外,测得最后筛房的矢状径位于5.82～21.48mm之间;垂直径位于9.36～26.02mm之间;左右径位于5.88～23.64mm之间.其中,最后筛房大于或等于同侧蝶窦腔的有23%(23侧).结论后筛窦影像解部分型分度对前颅底外科及蝶鞍区手术具有实际的指导意义.     

前颅底的影像解剖学研究及其临床意义

目的为临床开展前颅底外科提供前颅底筛板区及嗅凹的影像解剖学资料.方法取50具成人头颅标本,行鼻窦冠状位及矢状位薄层CT扫描,重点观测前颅底筛板区域内筛顶板的形状、筛板的形状以及筛顶板与筛板的关系等.结果筛顶板为一向内向后倾斜的骨板,测得筛顶板的左右径为前部左10.68±2.52m,右11.38±3.84mm;中部左9.86±3.84mm,右9.08±2.52mm;后部左11.18±4.66mm,右10.24±3.68mm.筛顶板的厚度平均为1.62±0.78mm.筛板的左右径为前部左2.08±0.52mm,右1.96±0.44mm;中部左2.68±0.68mm,右2.64±0.68mm;后部左2.16±0.64mm,右2.24±0.56mm.筛顶板与筛板平移的占46%;而形成嗅凹的占54%.在形成嗅凹的资料中,前筛顶板与筛板之间形成的高度差的平均值为8.82mm,后筛顶板与筛板之间形成的高度差的平均值为2.84mm,前后嗅凹深度之间经T检验相差非常显著(P<0.01).结论了解筛顶板及筛板的影像解剖及嗅凹的形成对减少前颅底外科手术并发症的发生具有十分重要的意义.     

后筛窦气化发育对蝶鞍区手术的影响

目的:为了了解后筛窦气化发育对前颅底外科及蝶鞍区手术的影响及术前指导意义。方法:取50具成人头颅标本,行冠状位、矢状位及水平位薄层CT扫描,从不同层面及不同方位观测后筛窦的气化发育情况。结果:发现属管前型的占23％(23侧);半管型的占28％(28侧);全管型的占33％(33侧);蝶鞍型的占16％(16侧)。其中两侧气化分型完全相同者占33例(66侧);两侧气化不相同者占17例(34例)。发现属Ⅰ°后筛窦的占43％(43侧);属Ⅱ°后筛窦的占35％(35侧),其中Ⅱa°后筛窦的占19％(19侧),属Ⅱb°后筛窦的占16％(16侧);属Ⅲ°后筛窦的占22％(22侧)。其中两侧分度完全相同者占29例(58侧);两侧分度不相同者占21例(42侧)。另外,测得最后筛房的矢状径位于5.82～21.48mm之间;垂直径位于9.36～26.02mm之间;左右径位于5.88～23.64mm之间。其中,最后筛房大于或等于同侧蝶窦腔的有23％(23侧)。结论:后筛窦影像解部分型分度对前颅底外科及蝶鞍区手术具有实际的指导意义。     

TNF-α反义寡核苷酸对犬颅脑爆炸伤后颅内压的影响

为探讨TNF-α反义寡核苷酸对颅脑爆炸伤后致伤犬颅内压的影响.将18只犬随机分为人工脑脊液组(ACSF)、正义链组和反义链组,利用已建成的颅脑爆炸伤模型装置致伤,伤前经小脑-延髓池分别注入人工脑脊液、TNF-α正义寡核苷酸和TNF-α反义寡核苷酸,比较3组动物脑组织含水量和颅内压的变化.与人工脑脊液组和正义链组相比,伤前经小脑-延髓池脑内局部应用TNF-α反义寡核苷酸组,颅脑爆炸伤后脑组织内含水量明显减少(P<0.05),颅内压明显降低(P<0.05).提示TNF-α反义寡核苷酸可以减轻颅脑爆炸伤后脑水肿,降低颅内压.     

构建胶质原纤维酸性蛋白原核表达载体及蛋白表达鉴定

背景:胶质原纤维酸性蛋白在神经损伤的发生发展过程中具有重要作用.目的:对胶质纤维酸性蛋白进行基因克隆,构建原核表达质粒并加以鉴定.设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-09/1 1在上海市长征医院神经外科实验室完成.材料:中间载体pGEM-T Easy质粒购于Promega公司,原核表达质粒pGEX-4T-2由上海市长征医院神经外科实验室保存.方法:从人脑胶质瘤组织提取mRNA,采用反转录一聚合酶链反应的方法扩增胶质纤维酸性蛋白序列并表达,然后与载体pGEX-4T-2连接,转化宿主菌BL21构建重组质粒,诱导表达后纯化,Westem-blot鉴定.主要观察指标:总RNA鉴定结果,聚合酶链反应扩增产物分子质量的鉴定,重组表达载体的酶切鉴定,Western-blot鉴定.结果:抽提肿瘤组织总RNA后,电泳清晰可见rRNA28S、18S、5S 3条带.且总RNA的A260nm/A280nm值为1.903.聚合酶链反应结果显示,在约1 300 bp左右有一条特异性条带,与预期的胶质原纤维酸性蛋白基因大小一致.重组表达载体的酶切鉴定及测序结果与GenBank的胶质原纤维酸性蛋白序列一致,经Western-blot验证为目的蛋白.结论:用双酶切、DNA测序与Western.blot的方法证实原核表达载体构建成功.     

脑脊液漏的诊断和治疗

目的 探讨脑脊液漏的规范化诊断和治疗方法以改善患者预后.方法 回顾性分析我院自1994年1月-2007年3月收治的75例脑脊液漏的病例资料,其中鼻漏51例,耳漏9例,切口或伤口漏15例;外伤性漏39例,手术后漏32例,自发性漏4例.23例通过体位休息和药物治疗治愈,16例通过脑脊液引流和(或)伤口局部处理获愈;手术治疗36例,其中开颅修补17例,颅外修补17例,分流5例(其中3例为修补术后再行分流).结果 治愈64例,好转10例,死亡1例.结论 规范化的诊断、治疗方案有助于提高脑脊液漏的治愈率,减少并发症.     

血管内栓塞治疗脑动静脉畸形369例

【目的】评价应用α- 氰基丙烯酸正丁酯(NBCA)血管内栓塞治疗脑动静脉畸形(AVMs)的效果。【方法】经股动脉插管用微导管技术超选择注入病灶NBCA栓塞治疗脑AVMs,共369例。男159例,女210例,年龄4~75岁,平均32. 4岁。首发症状头痛头晕246例,癫痫发作48例,意识障碍(昏迷) 36例,肢体麻木16例,肢体无力(偏瘫)23例。AVM的直径1. 5~8cm,其中病变大于6cm者141例, 3 ~6cm者194例,小于3cm者34例。单支供血动脉58例, 2支108例, 3支以上203例。栓塞加手术切除巨大型脑AVMs27例。【结果】完全栓塞病变74例, 90%以上104例, 70% ~90% 129例, 50% ~70% 51例,栓塞<50%者11例。【结论】NBCA应作为栓塞治疗脑AVMs的首选材料。根据脑AVM的部位、大小以及供血动脉数,酌情选择血管内栓塞、手术切除、栓塞加手术切除、γ-刀或栓塞加γ-刀治疗。     

VEGF反义寡核苷酸对C_6胶质瘤细胞VEGF表达和内皮细胞生长的抑制作用

目的　探讨VEGF反义寡核苷酸作为抗肿瘤血管生成治疗新药的可能性。方法　观察VEGF反义、正义、错义寡核苷酸制备的条件培养基对牛血管内皮细胞生长的抑制作用。应用免疫荧光流式细胞技术观察三者分别对C6胶质瘤细胞VEGF表达的影响。结果　反义寡核苷酸对C6胶质瘤细胞VEGF的表达和内皮细胞生长有明显抑制作用 ,而且抑制作用存在浓度依赖性。结论　反义VEGF寡核苷酸通过抑制C6胶质瘤细胞VEGF的表达 ,进而抑制内皮细胞的生长。