重组流感血凝素三聚体蛋白疫苗的制备及免疫原性评价

目的制备重组流感病毒血凝素(hemagglutinin, HA)三聚体蛋白疫苗并进行相关表征分析, 研究重组HA三聚体在小鼠模型中的免疫原性。方法构建稳定表达HA三聚体蛋白的CHO细胞株, 通过Western blot、单向免疫扩散试验、蛋白质粒径检测和N-糖基化位点分析对重组蛋白进行定性及定量分析。根据剂量、佐剂等处理条件的不同将BALB/c小鼠分为11个组, 并进行一致的免疫程序。初次免疫后56 d检测血清中和抗体效价, 以评价免疫原性。结果构建的CHO细胞株能够分泌表达HA三聚体。HA三聚体具备生物学活性能够在单向琼脂免疫扩散试验中形成沉淀环, 蛋白质粒径大小约为18.79 nm, 具有10个N-糖基化位点, 包括高甘露糖型、复合糖型和杂合糖型;HA三聚体重组蛋白疫苗在2次免疫小鼠后, 3.75 μg剂量配伍RFH01佐剂与对照组单价疫苗原液15 μg引起的中和抗体效价差异无统计学意义(P=0.431 2, U=36), 配伍佐剂组免疫后血清抗体效价均高于未加佐剂组, 其中15 μg HA三聚体+RFH01组效价最高, 为1 280。结论成功制备了流感病毒重组HA三聚体蛋白, 其...     

基于结构的流感疫苗设计进展

流感病毒在人类中的传播已有百余年的历史, 然而由于其高度可变的抗原结构, 常规疫苗难以构建持久的保护作用, 开发具备跨亚型保护能力的疫苗成为研究人员面临的挑战。而近十余年发展形成的基于结构的疫苗设计策略有着不同的设计思路, 它注重抗原表位的作用, 将蛋白质结构信息用于抗原设计, 以得到稳定、高效且具有跨亚型保护作用的重组抗原, 为流感疫苗的开发提供了新的突破口。本综述汇总现阶段流感病毒中常见抗原的结构特点与表位特征, 主要针对流感病毒的3种表面蛋白血凝素(HA)、神经氨酸酶(NA)和基质蛋白2(M2), 分别讨论结构疫苗学在这些抗原设计中的应用与进展。     

EC-SOD在同型半胱氨酸致单核细胞源性巨噬细胞氧化应激中的作用研究

目的探讨细胞外超氧化物岐化酶(EC-SOD)在同型半胱氨酸(Hcy)致巨噬细胞氧化应激中的作用及机制。方法将THP-1单核细胞用佛波酯刺激48 h后演变成巨噬细胞,用0、50、100、200、500μmol/L Hcy作用细胞72 h,并加设叶酸+维生素B12(Vit B12)干预组(100μmol/L Hcy+30μmol/L叶酸+30μmol/L Vit B12)。微板法检测氧化应激指标(H_2O_2、O_2~-、OH-)的变化;实时荧光定量PCR检测巨噬细胞中EC-SOD的mRNA表达水平;Western blot检测巨噬细胞中EC-SOD的蛋白表达水平;EC-SOD测定试剂盒检测EC-SOD活性。分别构建EC-SOD重组质粒和干扰质粒转染细胞,检测EC-SOD的mRNA及蛋白的表达水平以及超氧阴离子的表达。结果与对照组相比,100、200、500μmol/L Hcy组H_2O_2、OH-活性显著增高(P0.01),EC-SOD mRNA和蛋白表达明显降低(P0.01)。与对照组相比,100、200、500μmol/L Hcy组EC-SOD活性分别下降了13.92%、8.62%、10.32%(P0.05,P0.01)。与100μmol/L Hcy组相比,叶酸+Vit B12干预组EC-SOD mRNA的表达升高了47%。分别转染EC-SOD重组质粒和干扰质粒后,与100μmol/L Hcy组相比,EC-SOD重组组O_2~-含量降低了63.89%,干扰片段-596组O_2~-含量则增加了33.59%(P0.05,P0.01)。结论 EC-SOD参与了Hcy导致的单核细胞源性巨噬细胞的氧化应激。在抑制Hcy诱导动脉粥样硬化的过程中,EC-SOD可能发挥着重要的作用。     

强化剂量瑞舒伐他汀与阿托伐他汀辅助治疗急性心肌梗死效果比较

目的 观察强化剂量瑞舒伐他汀与阿托伐他汀辅助治疗对急性心肌梗死(AMI)患者肝肾功能和血清炎症水平的影响。方法 选取2020年7月至2022年2月在该院住院治疗的AMI患者114例，随机分为观察组与对照组各57例。两组患者入院接受阿司匹林和替格瑞洛药物负荷后，规律口服阿司匹林(100 mg/次，1次/d)和替格瑞洛(90 mg/次，2次/d)。所有患者行经皮冠状动脉介入治疗后接受卧床、吸氧、控制血压、β受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂等常规治疗。在此基础上，对照组口服强化剂量阿托伐他汀40 mg，观察组口服强化剂量瑞舒伐他汀20 mg，均每日1次。比较两组治疗前、治疗3个月后肝肾功能和血清炎症因子水平等差异。结果 治疗后观察组GPT、GOT、CRP、白细胞介素-1β、白细胞介素-6和肿瘤坏死因子-α水平优于对照组，差异均有统计学意义(t=2.81、7.00、6.37、7.23、7.90、5.22,P <0.01)。观察组药物不良反应发生率(3.5%,2/57)低于对照组(10.5%,6/57)，但差异无统计学意义(χ²=1.21,P> 0.05)。结...     

四价流感病毒亚单位疫苗配伍RFH01佐剂在小鼠体内的免疫原性研究

目的评价四价流感病毒亚单位疫苗配伍RFH01佐剂在小鼠模型中的免疫原性。方法按照《中国药典》2020年版(三部)的方法对4种单价流感病毒亚单位疫苗原液进行鉴别试验。在研究配伍RFH01佐剂的四价流感病毒亚单位疫苗小鼠模型中, 采用随机分组法将460只雌性6～8周龄BALB/c小鼠分为实验组、疫苗对照组、阴性对照组和空白组, 共46组, 每组10只。在研究四价流感病毒亚单位疫苗在老年和青年小鼠模型中, 采用随机分组将80只雌性10月龄和80只雌性10周龄BALB/c小鼠同时分为单价流感病毒疫苗、四价流感病毒亚单位疫苗、四价流感病毒亚单位疫苗+RFH01佐剂组、鸡胚四价流感病毒裂解疫苗对照组和PBS组, 共16组, 每组10只。均采用肌内注射免疫, 初次免疫21 d后, 采血分离血清, 并用相同程序和剂量进行加强免疫, 第42天采血分离血清。血凝抑制试验检测小鼠血清抗体水平。结果两次免疫后, 所有配伍RFH01的疫苗组阳转率均达到100%, 且血清抗体效价几何平均滴度(geometric mean titer, GMT)显著高于不含佐剂的疫苗组。配伍RFH01佐剂的单价流感病毒疫苗和四价流...     

收缩力在非实性结节影像良恶性鉴别中的应用分析

目的 探讨非实性结节良恶性影像特征表现，评估收缩力在腺癌影像诊断中的应用价值。方法 选取我院CT检出的纯磨玻璃结节和混合磨玻璃结节共计104例，经病理及临床检查确诊为肺腺癌患者87例、良性结节患者17例，对比分析两组患者毛刺征、胸膜牵拉征、胸膜凹陷征及结节内部血管形态改变的显示率；同时将肺腺癌结节按照病理分为原位腺癌(AIS)组、微浸润性腺癌(MIA)组及浸润性腺癌(IAC)组，分别评估三组收缩力相关表现。结果 腺癌结节收缩力影像表现显示率均显著高于良性结节组(P<0.05);AIS组结节收缩力低于MIA和IAC组，差异有统计学意义(P<0.05),IAC组结节收缩力表现略高于MIA组，但差异无明显统计学意义(P>0.05)。结论 非实性结节收缩力的CT影像特征表现有助于良恶性结节的鉴别，值得在结节定性诊断中加以评估。     

名老中医刘寿山治疗膝关节急性创伤性滑膜炎经验

<正>膝关节急性创伤性滑膜炎(Acute Traumatic Synovitis of the Knee)是一种常见的骨科临床急症，往往由膝关节扭挫跌撞等创伤引起，也是一种非特异性炎症反应性疾病。其主要临床表现为膝关节的疼痛、肿胀积液、屈伸受限，浮髌试验阳性，可合并半月板损伤、侧副韧带或交叉韧带损伤^[1]。研究表明中药口服疗法能够减少炎症因子(如IL-1β、TNF-α)对关节的损害，促进滑膜渗出液的吸收，预防软骨损伤^[2-3]，从而实现对症、对因的同步治疗。     

不同诱导剂量异丙酚辅助硬膜外阻滞麻醉的临床比较

目的：探讨异丙酚辅助硬膜外阻滞麻醉行上腹部手术时最佳的诱导剂量、注入时间及镇静、抑制内脏牵拉反应的临床效果。方法：６４例病人分为两组：组１异丙酚诱导量１．５ｍｇ·ｋｇ－１、１ｍｉｎ静脉注入，３ｍｉｎ后接维持量２～３ｍｇ·ｋｇ－１ｈ－１；组２诱导量０．７～１ｍｇ·ｋｇ－１，２ｍｉｎ注入。即接同组１的维持量，均以微量药物注射泵（Ｇｒａｓｂｙ３１００）持续注药，用药时间４０～２５０ｍｉｎ。结果：组２诱导后血压下降幅度小，无呼吸暂停和ＳｐＯ２严重降低，Ｒａｍｓａｙ均值低于组１，两组间有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。在异丙酚注药后１０ｍｉｎ内，两组血压、心率、ＳｐＯ２均达到用药前水平（Ｐ＞０．０５）。结论：以异丙酚低诱导剂量０．７～１ｍｇ·ｋｇ－１，２ｍｉｎ注入，维持量２～３ｍｇ·ｋｇ－１·ｈ－１微量泵持续静注方式给药，抑制内脏牵拉反应的效果确切，对呼吸、循环抑制轻，比较安全。