胰腺癌33例临床分析

近年来,胰腺癌的发病率在世界范围内呈明显上升的趋势。上海市统计资料表明,近20年发病率增加了4倍。早期诊断极为困难,手术切除率仅10％～15％,其5年生存率低于10％。本文总结我院1993年11月至1997年5月收治的33例胰腺癌的诊治现状。     

创伤性膈肌破裂的诊治体会

我院1990年1月-2006年1月共收治26例创伤性膈肌破裂患者,现将临床资料回顾性分析如下.     

重组人Tim-3蛋白的制备及基于亲和超滤-液质联用技术的天然配体筛选

目的 构建人T细胞免疫球蛋白黏蛋白-3（Tim-3）-His表达载体，表达纯化Tim-3重组蛋白，建立亲和超滤-液质联用技术筛选Tim-3蛋白天然配体。方法 利用DNA重组技术构建人Tim-3-His表达质粒，转染HEK293细胞表达Tim-3重组蛋白，通过Ni柱亲和色谱柱进行蛋白纯化，十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析Tim-3重组蛋白纯度。10 μL受试物（黄芪甲苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、白术内酯Ⅰ、芒柄花黄素、毛蕊异黄酮）溶液、180 μL磷酸盐缓冲溶液（pH 7.4，50 mmol·L^-1）与10 μL Tim-3（0.84 mg·mL^-1）混合，在37℃黑暗孵育1 h后，转移至1×10⁴超滤离心管中以12 000 r·min^-1离心10 min ，将沉淀加入200 μL甲醇-水（90∶10）中室温解离10 min，12 000 r·min^-1离心10 min，收集滤液，进行UPLC-MS/MS分析。通过比较受试物组和Tim-3蛋白变性组中超滤液中待测物的峰面积，计算各待测物特异结合率。结果 经双酶切及测序鉴定证明，人Tim-3-His重组表达质粒构建正确；纯化的人Tim-3重组蛋白质量分数达90%以上；建立的亲和超滤-液质联用筛选体系专属性、精密度、重复性、稳定性良好；白术内酯Ⅰ可与Tim-3蛋白特异性结合。结论 成功表达了可溶性、高纯度的人Tim-3重组蛋白，成功建立亲和超滤-液质联用筛选体系，白术内酯Ⅰ可与Tim-3蛋白特异性结合。