奶母果水提物对免疫低下小鼠胸腺和脾脏系数的影响

目的观察奶母果对免疫低下小鼠免疫功能的影响。方法 120只昆明种小鼠,雌雄各半,随机分为6组:正常对照组、模型对照组、奶母果高中低剂量组和阳性对照组,采用腹腔注射环磷酰胺法制作免疫功能低下小鼠模型,奶母果低中高三个剂量组分别给予1.517 g/(kg.d)、3.033 g/(kg.d)、6.066 g/(kg.d)奶母果提取物,阳性对照组给予1.820g/(kg.d)淫羊藿提取物,给药10 d,测定胸腺、脾脏系数。结果模型对照组小鼠的胸腺系数、脾脏系数显著低于正常对照组,奶母果3个剂量组及阳性对照组对模型小鼠下降的胸腺、脾脏系数均有升高作用,奶母果中剂量组的作用优于低剂量组和高剂量组。结论奶母果水提取物可升高免疫低下小鼠的胸腺和脾脏系数,从而增强机体免疫功能。     

腺病毒介导的人基质细胞衍生因子-1基因转移促进间充质干细胞的迁移

目的 初步探索在活体状态下基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在骨髓源间充质干细胞(MSC)迁移中的作用及其信号转导机制.方法 以MSC为实验材料,将纯化的hSDF-1α重组腺病毒100 μl加入单个散在分布的MSC培养基中,分别于转染后1,2,3 d观察MSC迁移的变化.随后于hSDF-1α重组腺病毒转染MSC后12 h,以50 μnmol/L渥曼青霉素,10 μmol/L LY294002,50 μmol/L PD98059,10 μmol/L U73122,0.1 g/L AMD3100以及50 nmol/L维拉帕米等分别处理MSC,观察转染SDF-1的MSC迁移的信号机制.结果 转染SDF-1重组腺病毒的MSC呈聚集的集落样生长,渥曼青霉素、LY294002、PD98059、U70312、AMD3100、维拉帕米等处理后,MSC聚集的集落样生长趋势明显降低,尤以U73122、AMD3100对其阻断效应最为显著.结论 SDF-1促进了MSC的迁移,其作用与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)和蛋白激酶C(PKC)等信号分子有关.     

PEP-1-SOD1融合蛋白转导入大鼠肝脏组织的能力及酶活性

目的研究PEP．1-SOD1融合蛋白转导入大鼠肝脏组织的能力及其酶活性。方法实验分为SOD1组和PEP1-SOD1组,分别经尾静脉注射500μgSOD1和500μg PEP-1-SOD1融合蛋白入大鼠体内,于0．5,1,2,4,8和24h时间点取肝脏（n=6,每组,每个时间点）。免疫荧光技术检测PEP-1-SOD1的转导能力。黄嘌呤氧化酶法测定肝脏组织SOD1活性。结果SOD1蛋白不能进入肝脏组织内。PEP-1-SOD1可转导入肝脏组织内,SOD1活性于注射后0．5h开始升高,1h达高峰,持续存在达24h,两组各个时间点比较,差异有统计学意义（P〈0．01）。SOD1组内各时间点比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论PEP-1-SOD1以天然酶活性形式转导入肝脏组织,为进一步的动物模型实验及临床疾病进行蛋白质治疗提供理论基础。     

PEP-1-CAT融合蛋白预处理对在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的:研究PEP-1-CAT融合蛋白预处理对在体大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用,探讨其可能的作用机制。方法:60只SD大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组)、缺血/再灌注组(I/R组)、低剂量预处理组(I/R+100μgPEP-1-CAT)、中剂量预处理组(I/R+300μgPEP-1-CAT)、高剂量预处理组(I/R+500μgPEP-1-CAT)。假手术组和缺血/再灌注组预先注射1mL的0.9%氯化钠溶液,低中高剂量预处理组分别注射100、300、500μg的PEP-1-CAT融合蛋白,7h后结扎冠状动脉前降支1h,再灌注2h后,检测心肌组织中的丙二醛(MDA)和血液中乳酸脱氢酶(LDH)及肌酸激酶(CK)含量,TTC染色测定心肌梗死面积,一步法TUNEL测定凋亡率,免疫荧光测定凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达。结果:与I/R组相比,低中高剂量预处理组显著减少心肌梗死面积(P<0.05或P<0.01),减少MDA的形成(P<0.01)和LDH、CK的释放,使凋亡率下降(P<0.01),下调Bax的表达,上调Bcl-2的表达,使Bax/Bcl-2比值下降。结论:PEP-1-CAT融合蛋白预处理能够明显减少心肌缺血/再灌注损伤,其机制可能与PEP-1-CAT融合蛋白具有抗氧化、抗凋亡作用有关。     

牡丹籽油生肌膏治疗压疮的疗效观察

<正>压疮(pressure sores)又称褥疮(decubitus),是一种常见的外科疾病,多见于老年患者、半身不遂、下肢瘫痪、骨折、久病重病长期卧床不起的患者。目前,压疮的治疗多采用抗生素类药物,但该类药物对创面有较强的刺激性,且换药时易损伤新生的肉芽组织,不利于创面的愈合~([1])。压疮不仅给病人带来痛苦,而且大大降低了病人的生活质量,严重者会出现感染、全身衰竭等危象~([2])。此外,压疮的发生加大了护理人员的工作量,增加了医疗经济负担,因此预防与治疗压     

携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒的构建及其在人血管平滑肌细胞中的表达

目的:构建携带绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)基因的重组腺病毒质粒pAd-GFP,制备重组腺病毒Ad-GFP,并使GFP在血管平滑肌细胞中得到高效表达。方法:将线性化的穿梭质粒pRNAT-H1.1与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在感受态BJ5183内进行同源重组,并筛选出阳性重组子pAd-GFP;用Pac I酶切线性化pAd-GFP,线性化的腺病毒质粒经脂质体转染AD293细胞,进行重组腺病毒的包装和扩增。采用CsC1密度梯度离心进行病毒浓缩和纯化。获得的腺病毒感染人血管平滑肌细胞(human vascular smooth muscle cell,hVSMC),观察其感染效率和GFP表达水平。结果:通过Pac I酶切证实腺病毒载体构建成功,包装出携带GFP基因的腺病毒,滴度达到4.5×1012pfu/mL,获得的腺病毒对hVSMC的感染效率约为100%。结论:利用细菌内同源重组方法成功地构建了携带绿色荧光蛋白的重组腺病毒,并能够在hVSMC细胞中高效地表达,为利用GFP作为报告基因的研究奠定了实验基础。     

调整心态 真诚服务

针对近年来医患之间的不和谐事件频繁发生,著名院士钟南山强调：“提高医护人员的人文修养格外重要”。 如何提高医护人员的人文修养？我认为：医护人员在医疗服务中应该拥有良好的心态。因为心态是人的内心活动,是人生情绪和意志的遥控器,它决定着人生的生活与工作质量。心态是服务之基,是成功之根。     

血管内皮生长因子通过PKC途径促进骨髓源间充质干细胞迁移

目的:探索PKC信号通路在血管内皮生长因子(VEGF)介导的骨髓源间充质干细胞(MSC)迁移中的作用及其机制。方法:以P3MSC为实验材料,利用Tanswell体外迁移体系,观察不同浓度的VEGF对MSC迁移的影响,在Straurosporine、G06976、Pseudo Z等信号转导途径阻断剂的干预下观察VEGF对迁移的影响。结果:MSC体外迁移能力随VEGF浓度(0.1,1,10,20,50 ng/mL)的递增而逐渐增强,20 ng/mL浓度时,MSC迁移到滤膜上的细胞数接近于峰值;Straurosporine、G06976、Pseudo Z对MSC迁移均有影响,其中Straurosporine、Pseudo Z对MSC迁移阻断的效应最显著。结论:VEGF所介导的MSC迁移与蛋白激酶C信号途径有关,且PKC-ζ途径可能处于中心环节。     

阿霉素诱导大鼠心衰模型的建立

目的:通过阿霉素(Adriamyc in,ADR)腹腔注射给药(Adriamyc in,ADR)试图造成大鼠心衰,探讨建立大鼠阿霉素心衰动物模型的给药方案,为研究心衰的发病机制和有效治疗措施提供理想的动物模型。方法:雄性W istar大鼠25只,随机分成模型组(n=15)和对照组(n=10)。模型组:腹腔注射ADR(4 mg/kg,用注射用水配制成2 mg/m l溶液,即2 m l/kg,每周1次,共6周,累积总量24 mg/kg;对照组:注射相同体积的注射用水。于末次注射停药后2周,测量体重(BW)、心室质量(VW)、动脉收缩压(ASP)、动脉舒张压(ADP)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)及左室最大压力上升及下降速度(±dp/dtm ax),并作病理切片观察其组织学变化。结果:与对照组相比,模型组ASP、LVSP、±dp/dtm ax均明显减小,LVEDP明显升高;病理学结果证实符合心肌病样改变。结论:多次间断腹腔注射一定剂量的阿霉素可明显损害心脏的功能,是建立大鼠慢性充血性心力衰竭模型的一种简便可靠的方法。     

大鼠心肌缺血再灌注后心功能变化与心有肌梗死面积的相关性分析

目的 大鼠左冠状动脉前降支不同处结扎处理后,分析心功能的变化与缺血再灌后心肌梗死面积的相关性.方法 雄性 Wistar 大鼠 70 只,随机分为 6 组即:假手术组,结扎(15、30、45、60 min)再灌注、结扎非再灌注.于处理后行心导管插管测量动脉收缩压(ASP)、动脉舒张压(ADP),左室收缩压(LVSP),左室舒张末压(LVEDP)及左室压力上升及下降最大速度(±dp/dtmax).结果 引起明显的心肌粳死至少需要结扎 30min.结扎(45、60min)再灌注、结扎非再灌注的心肌梗死明显,并观察到梗死区域心肌绝大部分已纤维化,且梗死面积变化较恒定.同时测定不同结扎时间心功能的变化发现,结扎(45、60 min)再灌注或结扎非再灌注各组 ASP、DAP、LVSP、±dp/dtmax显著下降,LVEDP明显升高;不同结扎时间处理后,大鼠心功能的变化与心肌粳死后的梗死面积变化密切相关.结论 大鼠左冠状动脉前降支中上1/3处结扎45 rnin以上的大鼠出现明显的心肌梗死灶,而且心肌缺血再灌注后心功能的降低与心肌梗死面积的增加呈负相关关系.