多重环介导等温扩增快速检测沙门菌、副溶血弧菌和单核细胞增生性李斯特菌方法的建立

目的：建立能够同时检测沙门菌、副溶血弧菌（VPH）和单核细胞增生性李斯特菌（LM）的多重环介导等温扩增（mLAMP）方法。方法分别针对沙门菌 bcfD 基因、VPH 的 tlh 基因和 LM的 iap 基因设计 mLAMP 引物,以LAMP 进行单重 LAMP 检测。实时浊度监测扩增结果,优化引物浓度配比,进而建立此3种食源性致病菌的mLAMP 检测体系,以 PCR 检测灵敏性作为比较,进行特异性和灵敏性分析。结果实时浊度监测表明,该 mLAMP体系具有良好特异性,可在45 min 内一次性检测以上3种致病菌,且无非特异扩增产生。这3种菌的检测最低限分别为300 fg／μl、4．2 pg／μl 和4．5 pg／μl,与 PCR 检测灵敏度相当。结论该多重 LAMP 可同时检测食品中的沙门菌、VPH 和 LM,可作为大规模样品的初筛或传统方法的辅助方法,用于快速判定样品中是否含有这3种致病菌。     

10-HCPT对人肝癌细胞QGY和HepG2生长增殖的抑制作用

目的:探讨10-HCPT对人肝癌细胞QGY和HepG2生长增殖的影响.方法:分别用不同浓度10-HCPT作用QGY和HepG2细胞48h和相同浓度作用不同时间,以MTT法检测细胞生长指数(GI),软琼脂克隆形成试验检测细胞克隆形成率.结果:10～360μg/ml和30～360μg/ml 10-HCPT分别作用QGY和HepG2细胞48h后,均有显著性生长抑制作用(P＜0.05),且呈量效依赖关系.100μg/ml 10-HCPT作用24h、36、48和72h对两种细胞均具有显著性抑制作用(P＜0.05).实验组两种细胞克隆形成率较对照组均显著降低(P＜0.05).结论:10-HCPT对人肝癌细胞QGY和HepG2体外生长增殖均具有抑制作用.     

心脏神经官能症患者的心理干预

心脏神经官能症是神经官能症的一种特殊类型。发病主要因素与患者所处的环境、工作压力大有关,一般多见于女性。     

IL-13对大鼠急性肾缺血再灌注时IL-6表达的影响

目的观察白细胞介素13(IL-13)对急性缺血再灌注肾损伤大鼠IL-6表达的影响。方法将Wistar雄性大鼠37只随机分为假手术组、I/R组、C组、T-S组和T-L组。阻断大鼠双侧肾脏血流45 min,再灌注24 h建立急性肾缺血再灌注模型;T-S组和T-L组于阻断血流后分别从双侧肾动脉开口注射入鼠重组白细胞介素13 0.5μg/kg和1.5μg/kg;C组以生理盐水代替。检测各组大鼠IL-6血清水平和肾脏表达情况以及肾功能和肾脏病理变化。结果 T-L组肾脏IL-6基因和蛋白表达明显减少,IL-6血清水平也明显下降;T-L组肾功能障碍、肾组织病理变化明显减轻,肾小管损害评分明显减少;血清IL-6水平和肾组织IL-6 mRNA与BUN、Cr均呈正相关。结论 IL-13能有效抑制大鼠急性肾缺血再灌注损伤IL-6的表达和保护肾功能。     

基于颜色判定的DNA环介导恒温扩增法快速检测金黄色葡萄球菌

目的建立基于颜色判定的DNA环介导恒温核酸扩增法（100p—mediatedisothermalamplificationofDNA,LAMP）快速检测金黄色葡萄球菌（SAU）技术。方法利用LAMP法针对SAU特异基因rtUC基因设计7套引物,通过对7套引物扩增效率进行比较得到最佳引物组合来快速检测SAU,采用两种结果判断方法在50min内完成反应。结果LAMP方法检测核酸的最低浓度为7．16pg／μl,灵敏度为PCR法的10倍（PCR法为71．6pg／μ1）,同时采用22种同源或相似菌种进行特异性检测,结果表明具有良好的特异性。结论LAMP方法检测过程简单,实验装置简便,反应结果肉眼可视化辨别,灵敏度高,特异性强,特别适合基层防疫与检疫部门对SAU的快速检测。     

hTERT脱氧核酶对白血病细胞HL-60凋亡相关基因的影响

[目的]探讨hTERT脱氧核酶对白血病细胞(HL-60)凋亡相关基因表达的影响。[方法]合成针对hTERTmRNA的"10～23"型脱氧核酶及其类似物,转染白血病细胞后,用PCR-ELISA法测定端粒酶活性;RT-PCR和荧光免疫测定Bcl-2和Bax的表达。[结果]脱氧核酶DzT转染白血病细胞后,能够显著降低白血病细胞端粒酶活性(P<0.01)和Bcl-2基因的表达(P<0.05),抑制白血病细胞的生长(P<0.05),上调Bax基因的表达(P<0.05)。[结论]脱氧核酶能降低白血病细胞的端粒酶活性,促进白血病细胞凋亡。     

连接蛋白26在肝细胞癌中的表达及意义

目的:研究Cx26在肝细胞癌及正常肝组织中的表达情况.方法:免疫组化和RT-PCR检测Cx26和PCNA 的表达.结果:①Cx26 mRNA在正常肝组织组和肝癌组的表达水平分别为0.82±0.37和0.38±0.10:Cx26mRNA在HCC高分化组中的表达高于其在低分化组中的表达水平,分别为0.48±0.12和0.21±0.05.②Cx26在所有正常肝组织中均高表达,其在肝癌组织中的阳性率为64.71%,Cx26的表达随着肝癌分化程度的增加而增强.③在肝癌组织中.PCNA-LI在Cx26蛋白阳性表达组和阴性表达组分别为32.72%±4.21%和56.67%±7.21%,Cx26蛋白阳性者的PCNA-LI明显低于阴性者,PCNA表达水平与Cx26蛋白表达呈负相关.结论:①在肝癌组织中,Cx26的表达随着组织分化程度的降低而降低.②Cx26可作为评价肝癌预后的指标之一.     

脱氧核酶对端粒酶RNA的切割和乳腺癌细胞凋亡相关基因表达的作用

目的 探讨脱氧核酶对端粒酶RNA组分(hTR)的切割作用及对人乳腺癌细胞凋亡相关基因bcl-2和bax表达的影响。方法 针对hTR基因的核苷酸序列,合成“10~23”型脱氧核酶及其类似物,提取总RNA在体外切割hTRRNA;转染乳腺细胞后,用RT-PCR扩增hTR基因片段,用PCR-ELISA法测定端粒酶活性,用RT-PCR和荧光免疫测定凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果 未经修饰的脱氧核酶DzT和在DzT的3’末段添加倒位连接T碱基的脱氧核酶DzTi在体外能够有效地切割hTRRNA;在转染乳腺癌细胞后,DzTi比DzT对hTRRNA表现出更强的切割作用,DzTi能够显著地降低乳腺癌细胞端粒酶活性(P<0.05),但对乳腺癌细胞的生长和细胞凋亡相关基因bcl-2和bax基因没有明显的影响(P>0.05)。DzT和DzTi的催化中心的一个碱基被替换后形成的脱氧寡核苷酸DzT’和DzTi’在胞外和胞内均不表现对hTRRNA的切割作用。结论 人工合成的脱氧核酶确实能够高效特异地切割端粒酶hTRRNA,并降低乳腺癌细胞的端粒酶活性。作为一种新发现的催化性核酸,脱氧核酶在肿瘤的基因治疗领域中可能具有极其重要的应用价值。     

益生菌A. muciniphila改善大肠杆菌诱导的小鼠腹泻

目的：以产肠毒素大肠杆菌（enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC）诱导肠道菌群失调性腹泻模型,分析益生菌嗜黏蛋白阿克曼氏菌（Akkermansia muciniphila,A. muciniphila）对ETEC诱导腹泻的改善效果。方法：用ETEC诱导小鼠腹泻模型。实验小鼠随机分为PBS组、模型组、干预组。干预组给予灌服A. muciniphila菌液（浓度为1×109CFU/mL）0.2 m L/d,连续5 d,模型组口腔灌服ETEC菌液（浓度为1×109CFU/mL）0.5 mL/d。记录小鼠身体状况、体重、腹泻率和死亡率的变化;HE染色观察结肠组织病理变化;ELISA检测血清白细胞介素（interleukin,IL）IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量;RT-PCR检测结肠组织IL-1、TNF-α、IL-6 mRNA的表达;收取小鼠粪便进行16S rRNA高通量测序并进行统计分析。结果：干预组与模型组相比,身体状况明显改善,腹泻率降低了66%,死亡率降低了30%;血清IL-1...     

早期运动联合中医康复对急性心肌梗死急诊PCI术后心脏功能及生活质量的影响

目的:观察早期运动联合中医康复对急性心肌梗死(AMI)急诊经皮冠状动脉介入(PCI)术后心脏功能及生活质量的影响。方法:将以AMI为诊断并采取PCI手术治疗患者总计200例,采取随机数字表法分成2组各100例,对照组采取常规护理康复指导,研究组在对照组基础上采取早起运动联合中医康复干预。比较2组干预前后心脏血容量指标、心脏功能指标、6 min步行距离及生活质量评分。结果:干预后,2组血容量指标较前改善(P<0.05),且研究组血容量指标优于对照组(P<0.001)。干预后,2组心脏功能指标及6 min步行距离较前改善(P<0.05),研究组心脏功能指标及6 min步行距离优于对照组(P<0.001)。干预前,2组生活质量评分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。干预后,2组生活质量评分较前改善(P<0.05),且研究组各项生活质量评分高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在AMI后行PCI手术治疗的患者中,采取早期运动联合中医康复干预,可明显改善患者的心功能指标,增加6 min步行距离,改善生活质量。