胃癌c－Ha－ras基因突变分析方法的建立及临床应用研究

本文应用多聚酶ＤＮＡ链延伸反应产物限制性酶切片段多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）和单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）两种方法同时检测了２０例胃癌中ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变．本文显示ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＳＳＣＰ均是检ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因突变的简便、快速和敏感的方法，适用于临床大批量肿瘤标本的检测。     

C－Ha－ras癌基因高表达与胃癌临床行为的关系

应用ＲＮＡ斑点杂交、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ和免疫组织化学技术检测了２０例胃癌病员癌组织中ｃ－Ｈａ－ｒａｓｍＲＮＡ和Ｐ２１蛋白的表达。统计学结果表明，胃癌组织中ｃ－Ｈａ－ｒａｓｍＲＮＡ过度表达和肿瘤淋巴结转移状态密切相关（Ｐ＝０．０３３），随着胃癌临床病程进展，肿瘤细胞中ｃ－Ｈａ－ｒａｓＰ２１表达水平逐渐升高（Ｐ＝０．１１２）。提示ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因高表达可能是胃癌形成过程中的关键步骤，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ癌基因产物可作为胃癌新的生物学标志来判定肿瘤的预后并指导临床治疗。     

c—Ha—ras反义DNA及其衍生物对转化细胞恶性表型的逆转

应用突变ｃ－Ｈａ－ｒａｓ质粒ＤＮＡ转化小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２纤维细胞，发现细胞获得恶性表型。本文合成了反义ＤＮＡ，它与ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因前４个密码子及其上游正链序列互补；并发现ｏｌｉｇｏ可有效地抑制恶性转化细胞内ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因表达、细胞在软琼脂中集落形成以及细胞在裸鼠体内的致瘤作用。补骨脂素修饰ｏｌｉｇｏ后，其生物学活性增强。     

c－Ha－ras反义DNA及其衍生物对转化细胞恶性表型的逆转

应用突变ｃ－Ｈａ－ｒａｓ质粒ＤＮＡ转化小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２纤维细胞，发现细胞获得恶性表型。本文合成了反义ＤＮＡ（ｏｌｉｇｏ），它与ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因前４个密码子及其上游正链序列互补；并发现ｏｌｉｇｏ可有效地抑制恶性转化细胞内ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因表达、细胞在软琼脂中集落形成以及细胞在裸鼠体内的致瘤作用。补骨脂素修饰ｏｌｉｇｏ后，其生物学活性增强。