牛蒡子甙元体内抗甲1型流感病毒作用的研究

目的:从体内抗病毒实验观察牛蒡子抗甲1型流感病毒作用.方法:以病毒滴鼻感染小鼠,观察肺指数、病毒致小鼠死亡率等的影响.结果:牛蒡子甙元在100 μg/kg及10 μg/kg口服均明显抑制甲1型流感病毒引起的小鼠肺炎实变;牛蒡子甙元100 μg/kg浓度组对甲1型流感病毒感染的小鼠有死亡保护作用.结论:牛蒡子甙元是一种治疗流行性感冒的有效药物.     

虎杖中白藜芦醇成分研究新进展

虎杖始载于(名医别录)，别名斑杖，为蓼科植物虎杖Polygonum cuspidatumSieb．etzucC的干燥根茎和根。味苦、酸，性微寒。归经肝、胆及肺经，具有利湿退黄、清热解毒、活血通经、祛痰止咳等功效。近年来研究发现从虎杖中也可提取出大量高纯度成份的白藜芦醇(Resveratrol，RES)。过去研究白藜芦醇大都取自葡萄或花生壳。白藜芦醇具有抗氧化、清除自由基、防止老化、抗肿瘤、保护心血管、植物雌激素作用和保肝的功效，故引起现今医学界的重视与热烈的讨论。法国人常吃高脂食物，     

广谱抗呼吸道病毒中药研发的价值与途径

包括新型冠状病毒(SARS-CoV-2)在内的呼吸道病毒为世界公共卫生及人类的生命安全带来巨大威胁.呼吸道病毒易感染、易变异、易流行和跨物种传播的特点为传统抗病毒药物及疫苗的研发提出挑战,安全有效的广谱抗病毒药物研发势在必行.中药多成分、多靶点、多途径的作用特点使其在抗呼吸道病毒新药开发方面具有极大的优势和潜力.本文在...     

急性上呼吸道感染病毒病原学调查及临床特征的分析

目的研究引起急性上呼吸道病毒感染的病原体分布及临床特征。方法入选2009年1月至2010年2月广东省中医院的669例急性下呼吸道感染的患者进行病原体检测。采用离心培养法对病毒进行分离鉴定,收集患者的临床资料。结果在669例进行病毒分离的患者中,329份病毒分离培养阳性,总检出率为49．2％,病毒分离结果提示以流感病毒为主,甲型流感占据主要地位。在时问分布方面,副流感病毒、腺病毒感染病例以散发为主,甲型流感感染病例全年可见,有7月及11月2个明显高峰期。乙型流感感染病例2009年主要在2-8月,高峰期在5月。临床特征方面,甲型流感感染病例发热最高体温明显高于乙型流感感染病例（P〈0．01）,恶寒症状发生率高于乙型流感感染病例（P〈0．05）,白细胞、中性粒细胞计数要明显高于乙型流感感染病例,但在频数分布方面对比无明显差异。甲型H1N1流感轻症病例与季节性甲流感染病例两组的临床症状、体征及辅助检查的结果比较无明显差异（P〉0．05）。结论2009年1月至2010年2月广东省中医院成人急性上呼吸道感染的患者中,流感病毒的感染占据主要地位,又以甲型流感的检出率最高。受甲型H1N1流感流行的影响,09年7月后甲型流感的检出率维持较高的水平。乙型流感在2009年2～8月也出现了小流行甲型H1N1流感与季节性甲型流感可在同一时期流行,甲型流感与乙型流感未出现同时的流行。甲、乙型流感均以鼻塞、流涕、咳嗽、肌肉酸痛等“流感样症状”为主要表现,甲流流感的引起的全身中毒症状较乙型流感重。在甲型H1N1流感与季节性流感的对比方面,两者的症状、体征的发生率无明显差异,甲型H1N1流感轻症与季节性流感临床特征基本相似。     

臭灵丹抗甲1型流感病毒FM1株感染小鼠的药效学研究

【目的】观察臭灵丹抑制甲1型流感病毒FM1株感染的体内药效。【方法】采用小鼠流感病毒性肺炎模型,通过检测小鼠体质量变化和肺指数、肺组织病理变化确认药物的体内抗病毒药效。【结果】病毒对照组的肺指数较正常对照组显著升高(P<0.001),表明该模型复制成功;臭灵丹高、中、低剂量组均未能有效缓解流感病毒感染小鼠的体质量下降(P>0.05);臭灵丹高、中、低剂量组可显著降低流感病毒感染小鼠的肺指数(P<0.05)。小鼠肺组织病理检查结果显示:臭灵丹低剂量组可以缓解肺组织病理性炎症。【结论】臭灵丹对甲1型流感病毒FM1株感染小鼠的病毒性肺炎具有一定的抑制作用。     

呼吸道合胞病毒NS1基因原核表达及其免疫原性分析

目的：原核表达呼吸道合胞病毒（RSV）非结构NSl蛋白,并对其免疫特性进行研究。方法采用PCR技术获得NS1基因,将其插入pET41a（＋）载体上,导人大肠杆菌后诱导表达;利用GST亲和层析柱对诱导表达的NS1蛋白进行纯化,免疫动物制备抗体,Westernblot法鉴定抗体的特异性。结果重组质粒经酶切鉴定和DNA序列测序完全正确．经IPTG诱导后融合蛋白在大肠杆菌BL21-DE3中得到高效表达．表达产物经超声破碎和GST亲和层析纯化获得重组蛋白,分子量约42000Mr,以抗NS1蛋白的多克隆抗体为一抗进行Westernblot检测,结果只有RSV感染细胞的样品在15000Mr处有特异性带显示,其他病毒感染的细胞和阴性对照没有相应条带。结论NSl基因得到高效表达,免疫制备得到的抗体与RSV感染细胞有特异性反应,与其他常见呼吸道病毒感染细胞无交叉免疫反应。     

应用单一和双重荧光定量PCR法快速检测军团菌

目的 建立单一和双重荧光定量PCR方法分别和同时进行军团菌属及嗜肺军团菌的检测.方法 利用军团菌属16 S rRNA基因和嗜肺军团菌mip基因设计引物和探针,两条基因探针分别标记FAM和HEX,并将相关反应体系和条件进行优化.分别应用单一基因探针(单一荧光定量PCR)和双重基因探针(双重荧光定量PCR)对嗜肺军团菌、非嗜肺军团菌及非军团菌进行检测,并验证两种方法的特异度、敏感度.应用双重荧光定量PCR检测空调水样滤膜样品和DNA提取样品,比较两者结果的一致性.结果 针对军团菌属及嗜肺军团菌,应用荧光定量PCR,16 S rRNA基因和mip基因均能较好的检出,16S rRNA和mip的最低检出限分别为8和10个拷贝.经优化得到了最佳反应体系.单一荧光定量PCR方法所检的8株嗜肺军用菌及4株非嗜肺军团菌16 S rRNA基因均为阳性,嗜肺军团菌mip基因阳性,非嗜肺军团菌mip基因阴性.双重荧光定量PCR方法所检的23株嗜肺军团菌中有2株为假阴性,9株非嗜肺军团菌和非军团菌属中有1株为假阳性.49份空调水样滤膜直接检测和提取DNA后检测的结果一致,其中26份水样军团菌阳性,20份为嗜肺军团菌,6份为非嗜肺军团菌;1份弗朗西斯菌检测HEX阳性(假阳性),占实际培养分离的1/26.结论 单一及双重荧光定量PCR法特异、快速、敏感,一次同时检测嗜肺与非嗜肺军团菌,满足对空调和环境水样军团菌监测的要求.     

四种腺病毒核酸提取方法的比较

目的通过蛋白酶K法、苯酚法、病毒DNA/RNA提取试剂盒、腺病毒荧光PCR检测试剂盒等四种腺病毒核酸提取方法的比较,为进一步研究腺病毒的分子生物学特性选择合适的方法提供参考。方法以腺病毒感染的A549细胞为样品,分别以蛋白酶K法、苯酚法、病毒DNA/RNA提取试剂盒、腺病毒荧光PCR检测试剂盒等四种方法提取核酸,核酸经紫外分光光度计检测A260/A280的比值后,用荧光定量PCR方法检测核酸中腺病毒拷贝数浓度,并记录四种腺病毒核酸提取方法所需的操作时间。结果蛋白酶K法、苯酚法、病毒DNA/RNA提取试剂盒、腺病毒荧光PCR检测试剂盒等四种方法提取核酸的A260/A280的比值依次为1.85532、1.7377、1.81474和1.43934,核酸中腺病毒拷贝数浓度依次为4.9×105copies/mL、3.94×103copies/mL、2.66×106copies/mL和6.15×106copies/mL,提取核酸所需的时间分别为1.5、15、0.5和0.5h。结论四种腺病毒核酸提取方法中,蛋白酶K法简单快捷、成本低廉,适合一般实验室使用;苯酚法适合用于提取细胞培养上清中病毒的核酸;病毒DNA/RNA试剂盒...     

反向斑点杂交检测甲/乙型流感病毒及其基因分型的方法研究

目的建立一种特异、灵敏的检测甲/乙型流感病毒并对其进行基因分型的反向斑点杂交方法。方法应用生物软件针对甲/乙型流感病毒的膜蛋白（Matrix Protein）基因和血凝素（Hemagglutinin,HA）基因的保守区域设计引物及探针,通过优化PCR和杂交的反应条件,建立检测甲/乙型流感病毒并对其进行基因分型的反向斑点杂交方法,验证方法的特异性和敏感性,并与直接免疫荧光法分别对相同的临床咽拭子标本进行检测,比较两者的检测结果,以评价该方法的临床应用价值。结果该方法对甲/乙型流感病毒的检测具有特异性,对呼吸道合胞病毒、柯萨奇病毒A型、副流感病毒3型、鼻病毒和腺病毒3型均无交叉反应,检测灵敏度为102～103copies/μL。在111例发热门诊病人的咽试子标本中,免疫荧光检测出3例甲型流感病毒、0例乙型流感病毒,阳性率为2.7%;反向斑点杂交检测出3例甲型流感病毒,其中1例H1、2例H3、0例H5、0例H9,4例乙型流感病毒,阳性率为6.3%。结论初步应用结果表明,本研究建立的检测甲/乙型流感病毒并对其进行基因分型的反向斑点杂交方法具有特异、灵敏的特点,为该方法的后续临床应用奠定基础。     

骨水泥型加长柄人工髋关节置换治疗高龄股骨粗隆间骨折

目的 探讨骨水泥型加长柄人工髋关节置换治疗高龄股骨粗隆间骨折的疗效.方法 自2005年1月至2008年12月采用骨水泥型加长柄人工髋关节置换治疗高龄股骨粗隆间骨质疏松性不稳定性骨折19例.结果 按Harris评分标准进行功能评定,优6例,良9例,可3例,差1例.优良率达78.9%,未出现骨折畸形,无感染、无人工关节脱位、假体松动、下沉等情况发生.结论 选择骨水泥型加长柄人工髋关节置换治疗高龄股骨粗隆间骨折是一种安全有效的方法.