高压氧治疗促进HIBD新生大鼠内源性神经干细胞的迁移与分化

目的：该研究探讨了高压氧（HBO）对缺氧缺血性脑损伤（HIBD） 新生大鼠内源性神经干细胞（NSCs）的迁移与分化的影响。方法：7 日龄 Sprague-Dawley 新生大鼠随机分为对照组,模型组及HBO组。采用 Rice-Vannucci 方法制成 HIBD 模型。造模后 3 h 内行HBO 治疗。分别于 HBO治疗后 7 d、14 d、 28 d,采用 BrdU/DCX,BrdU/β-tubulin,BrdU/GFAP和BrdU/O4免疫荧光双标法,用共聚焦显微镜动态检测侧脑室室管膜下区（subventricular zone, SVZ）与大脑皮层内源性 NSCs的迁移与分化。结果：治疗后7 d,HBO 组损伤侧SVZ 区 BrdU+DCX+细胞数（84±21 个/mm2）增加,多于对照组（39±14 个/mm2）与模型组（68±17 个/mm2）（P<0.05）;治疗后14 d,SVZ区BrdU+DCX+ 细胞数减少,而皮层区BrdU+DCX+ 细胞数增加,HBO组明显多于对照组(P<0.01）;治疗后28 d,各组大脑皮层BrdU+DCX+ 细胞数减少,大脑皮层出现BrdU+β-tubulin+,BrdU+GFAP+,BrdU+O4+细胞。HBO组BrdU+β-tubulin+与BrdU+O4+细胞数显著高于对照组与模型组（P<0.05）。结论：高压氧可促进 HIBD 新生大鼠内源性NSCs迁移到大脑皮层并分化为成熟的神经细胞。［中国当代儿科杂志,2009,11（9）：749-752］     

体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为胰岛素分泌细胞(英文)

目的：探索大鼠骨髓间质干细胞体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法。为解决胰岛移植物来源匮乏这一问题提供新的思路。方法：采用横向分化技术,将成年大鼠骨髓间质干细胞诱导成为胰岛素分泌细胞。间接免疫荧光法鉴定诱导前后细胞nestin、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素及Pdx-1的表达,RT-PCR法检测诱导前后细胞nestin,胰岛素-1,葡萄糖转运子-2,葡萄糖激酶及其转录因子Isl-1,Pdx-1,Pax-4和Pax-6 mRNA的表达;测定24 h胰岛素分泌量和胰岛素刺激实验评价诱导前后细胞的功能。结果：诱导5 h,nestin阳性细胞为(44.6±7.3)％;诱导24 h,nestin阳性细胞增至(61.8±8.4)％;此后,nestin阳性细胞数目开始下降,诱导第14天后,nestin表达基本消失。诱导后的胰岛素分泌细胞可以表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素和Pdx-1等蛋白;表达胰岛素-1、葡萄糖转运子-2、葡萄糖激酶及其多种转录因子mRNA;胰岛素分泌量增加;胰岛素刺激实验反应敏感等。而诱导前MSCc不县备上述特点。结论：大鼠骨髓间质干细胞体外可以诱导成为胰岛素分泌细胞,为胰岛移植开辟新的研究思路。     

第二届全国婴儿高压氧舱治疗新生儿缺氧缺血性脑病协作组研讨会会议纪要

20 0 3年 1 1月 1 0日在长沙举行了第二届婴儿高压氧舱治疗协作组会议。首都医科大学北京儿童医院、浙江大学儿童医院、华中科技大学同济医院、四川大学华西第二医院、暨南大学华侨医院、深圳市人民医院、九江市妇幼保健院、深圳保安区妇幼保健院、广西壮族自治区妇幼保健院、广东中山市妇幼保健院、广东南海人民医院、湖南省妇幼保健院和中南大学湘雅医院等协作单位的代表参加了本次会议。香港大学玛丽医院张璧涛教授列席了会议。卫生部高压氧舱培训中心主任吴中琪教授和卫生部新生儿学科顾问陈自励教授出席了会议并作了重要讲话。杨于嘉教…     

百日咳菌液致脑水肿时大鼠脑组织细胞因子的变化及机制

目的了解白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在感染性脑水肿(感脑)时的变化及其产生的可能机制.方法99只大鼠分成空白对照组(C组)、生理盐水组(NS组)、百日咳菌液组(PB组).NS组和PB组大鼠按注NS或PB后断头处死时间又分别分为30min、60min、120min、240min4个亚组.ELISA法测各组大鼠脑组织匀浆中的IL-1β和TNFα蛋白质水平,RT-PCR测定脑组织TNFαmRNA表达水平,电泳迁移率改变法(EMSA)检测核因子-κB(NF-κB)活性.结果注菌液后240min大鼠脑组织匀浆中的IL-1β(384.1±37.7pg/g)、TNFα(768.4±86.3pg/g)的含量明显增高,与C组、NS30min、NS60min、NS120min、NS240min及PB30min、PB60min和PB120min比较差异有非常显著性(P<0.01).RT-PCR发现TNFαmRNA表达信号在PB60min组开始增加,PB240min达高峰.NF-κB活性在PB60min组开始增加,PB120min和240min达高峰.结论脑组织中IL-1β、TNFα含量显著增加与感脑脑损害有关,其IL-1β、TNFα含量增多与NF-κB活性增加相关.     

儿科临床教学中培养学生创新思维的理论与实践

该文从理论上阐述了培养创新型医学人才的必要性与可行性、医学生创新能力培养的主要制约因素。从实践上对培养儿科专业创新型医学人才的主要措施进行了探讨,为培养创新型医学人才积累了经验。     

兔急性颅高压时颅内容积与压力的关系

作者在以往的颅高压动物实验中,观察到容积-压力的关系为-S 形曲线。通过数学推导,提出颅内容积-压力关系的方程式:p=b/(1+Ce~(-Mv))(其中 C 和 M 为常数,b 为颅内压的峰值)。然后通过对8只免采用侧脑室持续灌注生理盐水的方法,引起急性颅高压,考察其容积-压力变化,结果符合上述方程式表达的关系。     

新生儿前囟压24 h动态监测及临床意义

小儿颅内高压的早期由于未闭的前囟或颅缝起一定的缓冲作用，患儿可无明显临床症状。因此颅内压力监测对于颅高压早期的诊断有重要的临床意义。无创性前囟压力测定(anterior fontanel pressure，AFP)与腰穿测压有很好的相关性，可以很好地反映颅内压(intracranial pressure，ICP)的变化，对前囟未闭的患儿作AFP测定有助于诊断颅内压增高和监测治疗效果。     

脑组织比重测定梯度柱的制作及影响其可靠性的因素

本研究用不同数量的煤油和溴苯混合成后配制 两种不同比重的备用液 A(0.9750)与 B(1.0650)。再利用备用液 A 与 B 连续制成了14个梯度柱。用5种已知比重的标准比重液测定其在梯度柱内下沉深度呈直线负相关。相关系数(r)的变化在-0.9991～-0.9999之间,P<0.0005,说明标准比重液在梯度柱内下沉的深度是可信的。本研究对28个正常与50个脑水肿大白鼠脑组织样本所测得的脑组织比重与用干湿法测得的含水量进行相关回归分析,发现二者密切相关。     

新生大鼠神经干细胞的分离培养

目的： 探讨新生大鼠神经干细胞的分离培养方法及其外源报告基因在神经干细胞中的表达情况。方法： 采用无血清细胞培养技术，间接免疫细胞化学染色法及其绿色荧光蛋白转导技术。结果： 从新生大鼠脑组织分离的细胞具有连续克隆能力，表达神经上皮干细胞蛋白，诱导分化后的细胞表达成熟神经细胞和星形胶质细胞特异性的蛋白。绿色荧光蛋白报告基因转导神经干细胞后能够有效表达。结论： 该方法分离培养的神经干细胞保持了干细胞的未分化属性，具有自我更新、增殖能力和多分化潜能，而且外源报告基因在神经干细胞中能够有效表达。