早期干预对缺氧缺血性脑病患儿智能和心理运动发育的影响

背景：围产期缺血缺氧性脑病易导致脑损伤，对患儿智能发育产生影响。目的：观察早期干预对缺氧缺血性脑病患儿智能和心理运动发育的影响，研究早期干预的时间和效果的关系，从而找到最佳干预时机。设计：非随机化同期对照，不同时相点随访。单位：中南大学湘雅医院及湘雅医学院。对象：选择1999—01／2001-05中南大学湘雅医院新生儿科诊治的进行早期干预缺氧缺血性脑病患儿(干预组n=32，中度10例，重度22例)，与未行早期干预而在门诊确诊的缺氧缺血性脑病患儿(对照组n=36，中度10例，重度26例)作比较。方法：采用新生儿行为神经测定，中国科学院心理研究所和中国儿童发展中心共同编制的婴幼儿智能发育量表分别对两组的患儿进行测定评估。主要观察指标：两组患儿智能发育指数、心理运动发育指数比较。结果：①智能发育指数／心理运动发育指数3，6，18个月时干预组(90．50&;#177;11．12／90．34&;#177;12．49，94．06&;#177;14．96／92．03&;#177;13．07，90．78&;#177;7．46／91．38&;#177;13．87)比对照组明显增高(62．28&;#177;7．44／62.67&;#177;6．06．59．11&;#177;4．74／58．19&;#177;4．92，58．83&;#177;6．44／58．17&;#177;5．33，P&;lt;0．01)。②随访结果显示，干预组智能发育指数在临界水平者1例，心理运动发育指数在临界水平者2例，其余患儿智能发育指数和心理运动发育指数检测结果均在中等范围以上；对照组36例患儿均为智能缺陷患儿。结论：干预在3个月时就出现量化效果，说明早期干预对促进缺氧缺血性脑病的患儿智能发育具有重要意义。     

诱导脐血间充质干细胞分化为神经细胞的研究进展

脐血间充质干细胞是从脐带血中分离和培养的一种多潜能成体干细胞,具有向神经细胞分化的潜能。近年来,脐血间充质干细胞治疗神经退行性疾病、神经损伤、卒中等神经系统疾病成为医学研究的热点之一,并取得了一定的进展。     

高压氧对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠细胞凋亡及Caspase-3 mRNA表达的影响

目的　探讨高压氧 (HBO)对缺氧缺血性脑损伤 (HIBD)新生大鼠细胞凋亡及半胱天冬酶 -3m RNA(Caspase- 3m RNA)表达的影响 ,并探讨其可能的机制。方法　健康新生 7d龄 SD大鼠随机分为正常对照组 (CON组 ,n=8) ,左颈总动脉结扎 HIBD组 (n=8)及 HIBD+HBO治疗组 (简称 HBO组 ,n=8)。用免疫组化及原位杂交方法检测各组细胞凋亡及 Caspase- 3m RNA的表达情况。结果　TU NEL 免疫组化结果显示 :CON组的左脑及 HIBD组的右脑未见或偶见阳性细胞 ,HIBD组大鼠左脑组织各个部位均可见到阳性凋亡细胞 ,经 HBO治疗者左脑阳性细胞比未治疗者减少 [(2 5 2 .96± 6 8.5 9)vs(342 .2 4± 74 .16 ) ],差异有显著性意义 (P<0 .0 5 )。Caspase- 3m RNA原位杂交检测结果显示 :CON组无或仅少量阳性细胞出现 ,HIBD组和 HBO组脑皮质、纹状体及海马均可见 Caspase- 3m RNA阳性细胞表达 ,但 HBO组信号明显减少。结论　与 CON组比较 ,HIBD组病变侧脑组织阳性凋亡细胞数增多及Caspase- 3m RNA的表达增强 ;经 HBO治疗后 ,与不经 HBO治疗的 HIBD组比较 ,病变侧脑组织阳性凋亡细胞明显减少 ,Caspase- 3m RNA的表达明显减弱 ,提示 HBO可能通过抑制 Caspase- 3m RNA的表达 ,起到减少细胞凋亡、保护神经元的作用。     

高浓度氧对新生大鼠肺氧自由基损伤及其发育的影响

[目的]观察持续吸入高浓度氧后新生大鼠发育中肺的病理及肺组织内脂质过氧化物的变化,探讨高浓度氧对新生大鼠肺发育的影响.[方法]新生大鼠出生后分别在90%以上氧和空气中持续暴露,于d3、d7、d14、d21,动态观察肺组织病理学改变和胶原染色面积的变化以及肺组织8-异前列腺素F2α含量.[结果]与空气对照组比较,高氧组肺泡发育受阻,出现肺泡变大且结构简单化、肺泡数目减少等肺泡发育不良的慢性肺疾病病理表现,肺损伤逐渐加重,最终纤维化;胶原染色阳性面积于d7时高于对照组,随时间延长而逐渐增加;8-异前列腺素F2α含量d3时升高,d7时最高,以后下降但至d21仍高于对照.[结论]高氧对新生大鼠肺有明显损害,使其肺发育受阻,最终出现胶原增加的纤维化改变;氧化损伤可能是引起慢性高氧肺损伤的原因之一.     

黄芩苷对缺氧缺血性新生鼠脑缺氧诱导因子-1α的影响

目的　研究黄芩苷 (BC)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (HIBD )时缺氧诱导因子 (HIF) 1αmRNA、半胱天冬酶 (Caspase) 3及脑细胞凋亡的影响。 方法　新生 7日龄SD大鼠随机分为假手术组 (n =12 )、缺氧缺血组 (HIBD组 ,n =15 )、黄芩苷治疗组 (BC组 ,n =13 )。BC组在HIBD后当日起给予BC 0 .12mg/g腹腔注射 ,每日 1次 ,共 7d。观察大鼠体重增长率、左右脑重比值及脑组织病理形态学 ;采用末端脱氧核苷酸介导的X DUTP缺口末端标记 (TUNEL)法检测脑细胞凋亡 ;采用定量逆转录 多聚酶链反应 (RT PCR)法检测鼠脑HIF 1αmRNA ;采用免疫组织化学法检测鼠脑Caspase 3蛋白。 结果　BC组体重增长率与HIBD组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ,BC组左右脑重比值较HIBD组明显增加、脑神经元坏死较HIBD组减轻 ,脑细胞凋亡数较HIBD组减少。BC组鼠脑HIF 1α基因的表达较HIBD组减弱。BC组Caspase 3阳性细胞数较HIBD组减少。结论　BC可减轻HIBD ,减弱HIF 1αmRNA及Caspase 3表达 ,减少脑细胞凋亡。     

脑脊液渗透浓度测定在小儿急性脑水肿治疗中的应用和意义

目的　探讨脑脊液渗透浓度监测在急性脑水肿患儿中的作用及其与预后的关系。方法　收集 5 6例诊断为急性脑水肿患儿的脑脊液标本共 115例次 ,同时采集血液做渗透浓度测定行相关分析。选择小儿正常脑脊液标本共 2 1例作为本方法测定的正常参考值。使用美国产微量渗透压仪 (Model 330 0 )测定渗透浓度。结果　① 2 1例小儿正常脑脊液参考值为 (2 84 8± 8 7)mmol/L ,5 6例急性脑水肿患儿共 115例次脑脊液标本渗透浓度范围 2 5 3～ 35 3mmol/L ;② 10例不同急性脑水肿患儿同一时间的血和脑脊液渗透浓度分别为 (2 92 2± 2 3 6 )mmol/L和 (2 90 4± 2 7 5 )mmol/L ,两者具有高度正相关 (r =0 933,P <0 0 1) ;③ 5例死亡患儿 (共 11例次 )的脑脊液渗透浓度为 (334 8± 16 5 )mmol/L ,与正常参考值比较差异有非常显著性意义 (P <0 0 1) ;当脑脊液渗透浓度超过 32 0mmol/L时 ,病死率明显增加 ;④结脑患儿治疗前脑脊液渗透浓度值为 (2 6 5 4± 11 1)mmol/L ,较正常参考值明显下降 ,差异有显著性意义 (P <0 0 5 ) ;经治疗后脑脊液渗透浓度上升至 (2 80 2± 15 9)mmol/L ,与治疗前比较差异有显著性意义 (P <0 0 5 )。结论　①脑脊液与血渗透浓度具有高度相关性 ,故临床上可用血液替代脑脊液进行渗透浓     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠非髓鞘组织病变的特征及意义\

目的：探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）大鼠非髓鞘组织病理变化的特征及临床意义。方法：48只Wistar大鼠随机分为对照组（CON,24只）和EAE组（24只）,比较两组大鼠行为学;用苏木精-伊红染色、LOYEZ髓鞘染色、免疫组化及TUNEL方法观察EAE大鼠脊髓的炎症反应、脱髓鞘改变、神经丝蛋白和神经元的损伤。结果：行为学及组织学证实EAE大鼠模型复制成功。同时发现EAE组大鼠免疫诱导7 d后神经丝蛋白密度开始减低,排列紊乱,可见轴索断裂及轴索脱失,14 d达高峰,免疫诱导7 d、14 d及21 d神经丝蛋白密度均明显低于对照组,差异有统计学意义（P< 0.01）;免疫诱导7 d、14 d及21 d神经元的凋亡指数与对照组相比明显升高,差异有统计学意义（P< 0.01）。结论：EAE大鼠模型除了炎性脱髓鞘病变外,在疾病早期开始出现明显轴索损伤及神经元的凋亡,与神经功能障碍有关。     

神经干细胞移植对HIBD新生大鼠学习记忆的影响

目的：探讨脑内移植胚鼠神经干细胞 (NSCs)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后学习记忆的影响。 方法： 分离孕龄14 d的Sprague-Dawley（SD）大鼠胚胎前脑皮质，采用无血清悬浮培养的方法获得细胞克隆；7 d龄新生大鼠随机分为假手术组（n=10）、HIBD组（n=11）和移植组（n=13），后两组结扎左侧颈总动脉联合8%氧吸入制作HIBD模型，损伤后3 d利用立体定位仪分别在左侧海马区植入培养基作为对照或BrdU 标记的NSCs，观察植入4 周后大鼠学习记忆功能的恢复情况。计数海马CA1区正常神经元，间接免疫荧光法观察移植细胞在脑内的存活、迁移情况。 结果： 在放射形迷宫测试中，移植组较对照组表现出明显的改善，觅水时间缩短(61.40 s±24.83 s vs 89.32 s±31.52 s)，错误次数（2.65±0.57 vs 3.78±0.41）及重复次数明显减少(0.32±0.43 vs 0.81±0.47)(P<0.05)。BrdU间接免疫荧光显示移植后4周，在脑内可见存活的NSCs在海马内广泛分布；尼氏染色显示移植可明显减少海马CA1区的细胞丢失。 结论： 脑内移植胚鼠NSCs对HIBD新生大鼠的学习记忆恢复有良好的促进作用。     

兔大脑缺血再灌流新模型

本文报道了兔大脑缺血再灌流新模型。方法为结扎双侧椎动脉(VA),同时可逆性阻断双侧颈内动脉(ICA)和双侧颈外动脉(ECA),即6-动脉阻断(6AO),60分钟后复流双侧ICA和ECA 120分钟。实验结果显示,脑电活动明显受抑制,脑组织含水量增加至80.41±0.82%,对照组78.13±0.53%((?)±SD),P<0.01。超微结构提示在缺血60分钟时有细胞毒性脑水肿存在,当再灌流120分钟时,细胞毒性和血管源性脑水肿同时存在。与传统的双侧VA和和颈总动脉(CCA)阻断(4AO)模型比较,6AO造成的再灌流损伤较4AO方法更为严重,且不必同时降低全身血压,避免了低血压造成其他重要脏器损伤的可能性。