人骨髓基质细胞脑移植改善大鼠缺氧缺血性脑损伤

目的观察人骨髓基质细胞(BMSCs)移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的保护作用,探讨BMSCs脑移植治疗HIBD的可行性.方法36只新生大鼠随机分为对照组、HIBD组和移植组(均n=12).HIBD组和移植组大鼠7日龄时结扎左侧颈总动脉后吸入8%氧气2h制成HIBD模型.对照组仅分离左颈总动脉,不予结扎和缺氧.分离培养人BMSCs,损伤后3 d将BMSCs立体定位脑移植到移植组大鼠左侧感觉运动皮层.3～4周龄时,观察大鼠行为学和组织学的改变,并用免疫荧光检测移植细胞的存活情况.结果缺氧缺血后3周,HIBD组海马DG区和皮层单位面积内神经元数目较正常组减少[海马DG区:(39.2±5.6)个vs(51.1±3.9)个,P＜0.001;皮层:(12.3±3.0)个vs(17.8±3.0)个,P＜0.001].BMSCs移植后海马DG区和皮层单位面积内神经元数目[海马:(44.9±3.1)个,皮层:(17.5±3.1)个]较HIBD组增加(P＜0.01).与对照组比较,HIBD组在T迷宫、感觉运动功能测试中表现出明显的不足.BMSCs脑移植组各项行为学测试成绩较HIBD组均有明显改善.免疫荧光显示移植后3周,BMSCs在脑内存活.结论BMSCs脑移植可以改善新生鼠HIBD.     

黄芩苷对胰岛细胞瘤细胞系增殖的影响

目的：探讨黄芩苷对胰岛细胞瘤细胞的影响及其分子机制。方法：应用光学显微镜、MTT测定、流式细胞仪和Western blotting等方法,研究 0,100,200,400μg/ml黄芩苷处理胰岛细胞瘤细胞24h,或200μg/ml黄芩苷处理胰岛细胞瘤细胞不同时间后,黄芩苷对细胞增殖速度、细胞存活率、细胞周期分布的影响。结果：随黄芩苷浓度增加,细胞增殖受到抑制,细胞的生存率逐渐下降;随着黄芩苷作用时间的延长,细胞的生存率也逐渐下降;流式细胞仪结果显示,随着黄芩苷处理浓度增加,S 期细胞明显减少,从38.2％ ( 0μg/ml)下降至9.4％ (400μg/ml),G0/G1期细胞所占百分率增加,从56.4％(0μg/ml)上升至85.9％(400μg/ml),细胞出现G1阻滞。同时,Western blotting结果显示细胞周期蛋白cyclin D1表达显著下调。结论：黄芩苷能抑制胰岛细胞瘤细胞株增殖;黄芩苷诱导所致细胞周期蛋白cyclin D1表达下调在其中起着重要作用。     

黄芩甙、川芎嗪对兔百日咳菌液脑水肿与颅内高压的治疗作用

目的 对比观察甘露醇（ＭＮ），川芎嗪（ＴＭＰＺ），黄芩甙（ＢＣ）等对兔百日咳菌液（ＰＢ）脑水肿与颅内高压的疗效。方法：动物分成５组，生理盐水组（ＮＳ组）百日咳菌液未治疗组（ＰＢ组），甘露醇治疗组（ＭＮ组），川芎嗪治疗组（ＴＭＰＺ组）黄芩甙治疗组（ＢＣ组）经左侧颈内动脉注入ＰＢ建立感染性脑水肿模型，采用光导纤维颅内压监测方法监测颅内压（ＩＣＰ），观察用药后４ｈ内ＩＣＰ变化及４ｈ脑组织含水量（ＷＣ），     

冷冻伤性脑水肿的发生机制及尼莫地平治疗作用的实验研究

目的研究大鼠冷冻伤性脑水肿不同时间脑组织伊文思兰（ＥＢ）、突触体内［Ｃａ２＋］ｉ及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性变化与脑含水量变化之间的规律，以探讨冷冻伤性脑水肿的发生机制和类型。方法干湿法测定脑组织水分含量，甲酰胺法测定ＥＢ含量，Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光标记法测定突触体内［Ｃａ２＋］ｉ，微量定磷法测定线粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性。采用尼莫地平进行治疗，研究其对ＥＢ含量、［Ｃａ２＋］ｉ、Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性和脑水肿的影响。结果冷冻伤后３０分钟即已发生Ｃａ２＋超载，伴随Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性下降及脑组织水分含量及ＥＢ含量增加。尼莫地平治疗后ＥＢ含量和［Ｃａ２＋］ｉ明显下降，而Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性明显恢复，脑水肿明显减轻。结论ＢＢＢ的通透性增加和细胞内钙通道开放，钙离子浓度超载在脑水肿的发生与发展过程中起了重要作用。冷冻伤性脑水肿在早期既有细胞毒性脑水肿，又有血管源性脑水肿，即混合性脑水肿。     

100例新生儿甲皱毛细血管袢观察

本文观察了100例新生儿甲皱毛细血管袢的形态,并分析了性别、日龄、体重、胎次、胎龄和窒息等因素对管袢阳性率的影响。结果日龄<3天组管袢阳性率为70％:≥3天组为87.5％,两组差别显著(x~2=4.15,p<0.05)。其他因素对管袢阳性率的影响无显著意义(p>0.05)。此外,还报告1例足月宫内死亡胎儿离体手挠动脉墨汁灌注标本的制作方法和观察结果。     

NMDAR1基因表达及其受体活性在大鼠感染性脑损伤时的变化

用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交和放射性配基结合法，检测了百日咳杆菌脑损伤时大鼠大脑皮质ＮＭ－ＤＡ受体的变化。结果显示：注菌组Ｋｄ值较对照组小（Ｐ＜０．０５），ＮＭＤＡＲ１ｍＲＮＡ表达及Ｂｍａｘ值较对照组差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。提示ＮＭＤＡ受体主要表现为受体功能的激活，亲和力增加，并非基因表达的改变而使受体的数量变化。     

临床科研设计与体会(一)

临床科研设计的基本程序大体可分为五个步骤:立题、假说的建立、假说的验证、资料的整理与论文的写作。立题临床工作中诸如某种中药的治疗是否真的有效?对哪种疾病有效?对这个疾病的哪个类型、哪些症状有效?疗程与剂量多久、多少为宜?有无毒副作用等等问题。有些经过查阅书刊、杂志、集体讨论、请教专家等使可迎刃而解,但另一些问题就需立题并进行研究。科研立题非常重要,课题的要求:(1)目标要小、     

U74500A及去铁胺对内毒素血症小鼠心脏损伤的保护作用

本研究试图探讨铁离子依赖性脂质过氧化物在小鼠内毒素血症时心脏损伤中的作用以及铁离子螯合剂U74500A和去铁胺对此损伤的作用。实验分四组:1.对照组;2.内毒素组;尾静脉注射750亿/kg灭活大肠杆     

用多聚酶链反应检测母乳HBV和CMV在乳源筛选中的意义

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ）检测产妇初乳中ＨＢＶＤＮＡ和ＣＭＶＤＮＡ。结果显示：母血ＨＢＶＭ阴性者其初乳全呈ＰＣＲ阴性;母血ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ及ＨＢｃＡｂ阳性者其初乳排毒率为８１２５％;ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｂ及ＨＢｃＡｂ阳性者其初乳排毒率为４５２４％;仅ＨＢｅＡｂ与ＨＢｃＡｂ阳性者其初乳排毒率为２３０８％。说明产妇体内ＨＢＶ复制活跃、乳汁排毒率高,传播给婴儿的危险性大。母血ＣＭＶＩｇＭ阳性者其初乳ＣＭＶＤＮＡ阳性率为４２８６％～７０００％,传播给婴儿的可能性较大。提示母乳入库条件应为母血ＨＢＶＭ及ＣＭＶＩｇＭ阴性且ＨＢＶＤＮＡ与ＣＭＶＤＮＡ阴性者。ＰＣＲ是筛选乳源特异而敏感的方法     

不同种类的百日咳菌液致大鼠感染性脑水肿模型的比较

目的 :了解不同种类的百日咳菌液致大鼠感染性脑水肿 (感脑 )模型的差异 ,以寻找一种新的感脑模型。方法 :SD大鼠随机分为生理盐水对照组 (NS) ,粗制百日咳菌液组 (PBR)和精制百日咳菌液组 (PBP)。分别使用粗制百日咳菌液和精制百日咳菌液制作感脑模型后 ,检测脑组织含水量、伊文思蓝 (EB)含量和钠钾离子含量。结果 :PBR组和PBP组大鼠脑含水量、钠离子含量和EB含量较NS组明显增高 ,钾离子含量明显降低 (P <0 .0 1)。PBR组全部大鼠左半球脑组织明显蓝染 ;而PBP组仅 6只大鼠脑组织出现蓝染。PBR组大鼠脑组织EB含量明显高于PBP组 (P <0 .0 1)。结论 :粗制百日咳菌液和精制百日咳菌液均可致大鼠感脑模型 ,前者以混合性脑水肿为主 ,后者以细胞内毒性脑水肿为主