心包腔内注入腺病毒-血管内皮生长因子165基因治疗心肌缺血的实验研究

目的:探讨经心包腔途径转染血管新生基因对缺血心肌的血管生成及舒缩功能的影响。方法:第一部分:随机将12头中国小型猪分为实验组和对照组,每组6头。两组猪均采用球囊堵塞前降支第一对角支远端以建立心肌梗死模型,心肌梗死模型建立后即刻,采用经皮剑突下穿刺方法,将中心静脉导管插入心包腔内转染Ad-LacZ。以胶原酶1200 u及透明质酸酶3000u预处理心包后,在心包腔内注射含Ad-LacZ基因2.0×109pfu。对照组心包腔内注射生理盐水。分别于注射后3天、7天及28天处死动物,对缺血心肌进行染色及病理观察。第二部分:随机将20头中国小型猪分为实验组和对照组,每组10头,每组又分3天(n=2)、7天(n=6)及28天(n=6)三个亚组。注射后3天、7天及28天分别用免疫组化、超声心动图对缺血心肌血管新生情况进行检测,并以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆、心包及心肌组织中Ad-VEGF165的表达。第三部分:20头小型猪随机分为心包转染组(心包组)和冠脉转染组(冠脉组)。心包组和冠脉组均注射Ad-VEGF1651.0 ml(2×109pfu),于注射前及其后3、7、28天分别测定组织内VEGF水平、微血管密度(MVD)、心功能。结果:①实验组注射Ad-LacZ基因后第3天、第7天及28天后X-gal染色有阳性细胞,以第7天最明显,对照组无阳性细胞。②Ad-VEGF165基因经心包腔转染缺血心肌组织后,在心包及组织中成高表达,于7天达到高峰,28天降至基线水平,血浆中无目的基因的表达;28天时,实验组缺血心肌微血管密度(MVD)、心功能均明显高于对照组[MVD,517.0±75.7/mm2vs 226.5±54.1/mm2,P=0.009;LVEF72.11±5.2%vs 55.14±4.37%,P=0.005]。③心包组和冠脉组的心脏均表达有VEGF165基因,组织内VEGF水平在7天时达高峰,28天时降至基线水平,前组高于后组(702±85pg/ml vs 592±59 pg/ml,P=0.026)。而两组的MVD、心功能随转染时间延长均明显增加,但心包组优于冠脉组(28d,MVD,517.0±75.7/mm2vs 326.4±24.1/mm2,P=0.001;FS,32.9±2.2%vs 30.6±2.1%,P=0.049;LVEF,72.11±5.2%vs 65.87±2.16%,P=0.034)。结论:①应用球囊堵塞法可成功建立猪急性心肌梗死模型,胶原酶及透明质酸酶预处理心包后,腺病毒载体可转染缺血心肌,并持续表达4周。②用胶原酶及透明质酸酶预处理心包腔后,经其转染Ad-VEGF165可以诱导急性心肌梗死模型局部VEGF蛋白表达,促进缺血心肌组织血管新生并能改善心功能。③导管介导的心包腔与冠脉转染Ad-VEGF165基因治疗心肌缺血是有效的、切实可行的,而前者可能是更有前途的新方法。     

肝癌组织差异表达基因cDNA序列的筛选与鉴定

目的：筛选并鉴定肝癌组织特异表达基因。方法：通过菌落原位杂交技术筛选用抑制消减杂交法构建肝癌与癌旁肝组织差异表达基因消减cDNA文库，用PCR方法进一步筛选出有插入片段的阳性克隆，将阳性克隆进行DNA测序和同源性比较分析，用Northern印迹方法对新的cDNA序列进行初步鉴定。结果：从消减文库中随机挑取的100个白色克隆中筛选出13个阳性克隆，DNA测序获得11个不同的cDNA序列；同源性比较分析表明，6个cDNA片段与在基因高度同源，5个cDNA片段为新的序列。其长度大于300bp的3个新序列，Norther印迹证实它都来源于肝癌组织。结论：用抑制消减杂交方法构建的肝癌差异表达基因消减cDNA文库富含肝癌特异表达基因，经验证的3个新的cDNA序列可能为肝癌特异的基因序列。     

过敏性哮喘患儿外周血嗜酸性粒细胞及淋巴细胞CCR3的表达

目的 观察过敏性哮喘患儿外周血嗜酸性粒细胞及淋巴细胞表面趋化因子受体CCR3与CCR5表达的改变。方法 以16例急性发作及25例缓解期过敏性哮喘患儿和20例健康儿童为主要观察对象,用流式细胞术测定外周血粒细胞群及淋巴细胞群中CCR3与CCR5的表达。结果 过敏性哮喘患儿缓解组CCR3~+淋巴细胞亚群百分率[(4.2±1.9)％],尤其是CCR3~+嗜酸性粒细胞百分率[(3.5±1.6)％]较正常组[(3.0±1.3)％,(1.2±0.5)％]明显增高;急性发作组CCR3~+淋巴细胞亚群与嗜酸性粒细胞百分率[(3.5±1.5)％,(2.2±1.0)％]虽也高于正常组,但较缓解组则出现下降。发作组CCR5~+淋巴细胞亚群仅见增高趋势。结论 CCR3~+嗜酸性粒细胞与淋巴细胞亚群异常升高可能为过敏性哮喘患儿免疫系统异常的一个特征性表现;与缓解组比较,发作组CCR3~+嗜酸性粒细胞及淋巴细胞亚群反而降低,可能和该类细胞向炎症部位趋化并参与了过敏性免疫炎症反应有关。     

哮喘模型大鼠气管的张开角及残余应变

对哮喘模型大鼠气管的无载荷状态和零应力状态进行分析。与正常组相比，模型大鼠气管软骨剪开的张开角及所对应的残余应变绝对值均较正常组显著增大（P〈0．05），而且随着x／L的增大而呈明显上升趋势。模型大鼠气管肌肉剪开的张开角及所对应的残余应变绝对值无显著变化，且沿气管轴向变化不明显。结果表明哮喘大鼠气管为了适应外在应力环境的变化，肌肉部分不断进行代偿性生长，导致哮喘大鼠气道重建。     

骨质疏松症患者运动处方及运动疗效

目的探讨运动疗法对骨质疏松症(OP)的疗效及治疗OP的运动处方。方法将26例原发性骨质疏松症(OP)患者按病情平分成A、B两组,B组的运动负荷约为A组的75%,治疗18个月后对比两组患者治疗前后腰椎的骨密度值以及两组的疗效。结果骨密度值都明显增大(P<0.01或P<0.05),并且A组的增幅大于B组;经疗效评定,A组治愈率为69.2%,好转率为23.1%,B组治愈率为38.5%,好转率为53.8%,A组的疗效优于B组(P<0.01)。结论不同运动对原发性OP患者的治疗作用及疗效有所不同;运动负荷强度影响着治疗效果。     

低频电针刺激与音乐疗法对急性有氧运动疲劳恢复的效果比较

目的:比较电针刺激足三里与聆听放松音乐疗法对急性有氧运动疲劳的恢复效果。方法:实验于2004-10/2005-01选取南京体育学院48名健康男大学生志愿者,随机分为自然恢复组、音乐治疗组、低频电针组,16名/组。①以80%～85%的乳酸阈强度即65W为初始功率,受试者进行1min的准备活动后,正式开始有氧运动直至疲劳。判断疲劳的标准为自我感觉疲劳、且一再鼓励后仍不能维持预定的运动强度。②一次性有氧运动至疲劳后,音乐治疗组卧位,戴耳机听放松音乐,音量以感觉舒适为度,一般控制在45.0～63.5dB。低频电针组卧位,双足三里针刺得气后,以1Hz的低频脉冲给予电刺激。自然恢复组静卧休息,不给予任何治疗。各组治疗时间均持续15min。③比较各组治疗前后心率、下肢肌力、下肢围度、血糖、尿蛋白、血乳酸、视觉简单反应时、主观体力感觉等生理、生化及心理指标的变化。结果:按意向处理分析,实验纳入健康男大学生志愿者48名,全部进入结果分析。①运动前、运动后即刻各项指标的组间比较:经统计学检验,各组间心率、大腿围、小腿围、下肢肌力、简单反应时、主观体力感觉值、血乳酸、血糖及尿蛋白等指标在运动前、运动后即刻均基本相似(P>0.05)。②运动前后各项指标的配对检验结果:与运动前比较,运动后即刻心率、大腿围、小腿围、主观体力感觉值均显著增加(P<0.01);血糖及尿蛋白均显著下降(P<0.01,P<0.05);简单反应时及血乳酸无明显变化(P>0.05)。运动后10min心率平均值为(81.82±10.29)次/min,与运动后即刻心率相比显著降低(P<0.01),而与运动前相比显著升高(P<0.01)。③受试者运动后即刻自觉症状统计结果:48名受试者中,汗多者占75.00%,口干者占54.17%,下肢乏力者占52.08%,脚跟发软及下肢酸痛、僵硬者分别占16.67%和14.58%。④治疗后各项指标的组间比较:音乐治疗组尿蛋白显著低于自然恢复组和低频电针组(P<0.01,P<0.05),其余各项指标各组间均无显著性差异(P>0.05)。⑤各组运动后即刻与干预治疗后各项指标的配对检验结果:与运动后即刻比较,治疗后15min音乐治疗组心率、大腿围、小腿围、主观体力感觉值、尿蛋白均显著降低(P<0.05或P<0.01),低频电针组心率、大腿围、小腿围、主观体力感觉值、乳酸均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:低频电针足三里对消除心血管疲劳及清除乳酸的效果较佳,而音乐疗法依从性强、操作简单,具有较好的促进中枢、骨骼肌及心理疲劳恢复、增强肾脏调节能力的作用。     

心源性休克介入治疗后心肌灌注分级和死亡率的关系

目的:探讨急性心肌梗塞后心源性休克经皮冠状动脉介入治疗后心肌灌注分级和死亡率的关系。方法:选择2 0 0 1- 0 1～2 0 0 4 - 0 1我院收治的急性心肌梗塞所致的心源性休克患者4 1例,急诊行经皮冠状动脉介入治疗,男2 9例,女12例,中位年龄(6 7±13)岁。用心肌灌注分级将患者分为无复流(MBG0 / 1)和复流(MBG2 / 3)两组,观察院内死亡率和随访死亡率;用L ogistic多元回归方法分析心源性休克介入治疗后死亡的相关因素。结果:心源性休克介入治疗后心肌灌注分级无复流组的院内死亡率和随访死亡率均显著高于复流组(81%比14 % ,81%比2 9% ,P<0 .0 1)。多因素回归分析上述因素与死亡率的关系显示年龄与死亡率呈正相关(OR3.8,P=0 .0 4 ) ,MBG2 / 3与死亡率呈负相关(OR0 .0 6 ,P=0 .0 1) ,而高血压、糖尿病、TIMI3级血流获得率及治疗前收缩压未显示与死亡率的相关性。结论:心肌灌注分级是急性心肌梗塞所致心源性休克介入治疗后较强的死亡预测因子。     

血清CA125和HE4测定对子宫腺肌症和子宫肌瘤的诊断意义

目的 探讨血清CA125和HE4测定在子宫腺肌症和子宫肌瘤鉴别诊断中的价值.方法 分别用化学发光法和酶联免疫法检测56例子宫腺肌症、78例子宫肌瘤患者及120例健康对照者血清CA125和HE4的水平.子宫腺肌症组CA125值（81.62±40.51）IU/mL,阳性率为77.8%,HE4值（48.04±26.32）pmol/L,阳性率为66.1%;子宫肌瘤组CA125值（33.24±21.37）IU/mL,阳性率为15.4%,HE4值（23.62±11.48）pmol/L,阳性率为78.9%;健康对照组CA125值（23.47±15.53）IU/mL,阳性率为9.2%,HE4值（12.36±5.31）pmol/L,阳性率为11.7%.子宫腺肌症组的CA125和HE4均值及阳性率较子宫肌瘤组和健康对照组为显著增高,差异有统计学意义（P〈0.01）;子宫肌瘤组患者血清CA125和HE4水平与健康对照组差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 结合其他检查手段,血清CA125和HE4可以作为子宫腺肌症与子宫肌瘤鉴别诊断及疗效评价的一个指标.     

中老年男性血清睾酮与代谢综合征的关系

目的 探讨中老年男性代谢综合征(MS)患者血清睾酮下降的原因.方法 选取45～ 83岁的中老年男性56例为研究对象,分别测量其血压、身高、体质量,计算体质量指数(BMI),检测空腹状态下生化指标[血糖(FBG)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、空腹胰岛素(FIN)及血清睾酮,并用稳态公式(HOMA)计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).根据CDS建议的MS诊断标准,将研究对象分为MS组及非MS组,分析睾酮浓度与各指标的关系.结果 中老年男性MS组血清睾酮浓度明显低于非MS组[(9.97±3.87)nmol/L与(13.73±3.93)nmol/L,t=3.337,P＜0.01],多因素回归分析显示,血清睾酮浓度与年龄、腰围、HOMA-IR呈负相关(回归系数分别为-0.214、-0.329、-0.317,标准回归系数分别为-0.730、-0.597、-0.313,t值分别为-5.833、-4.681、-2.686,P均＜0.01).结论 中老年男性MS患者血清睾酮浓度下降,血清睾酮浓度与年龄、腰围、胰岛素抵抗密切相关.     

封闭负压引流技术对创面微循环流速和血管口径影响的实验研究

目的：探讨负压引流增加创面血供的机理。方法：以兔耳背急性全层皮肤缺损创面为模型。分别给予－５．３２、－９．９８、－１４．６３和－１９．９５ｋＰａ负压引流,用微循环显镜观察施加负压前后创缘血管网的血流速度和微血管口径的变化,并用微循环 像分析系统定量分析。结果：施加负压后,－９．９８、－１４．６３和－１９．９５ｋＰａ压力组的流速较负压前有非常显的增加（Ｐ〈０．０１）,－１９．９５和－１４．６３ｋＰａ负压吸引后微血管口径增大,与吸引前相比差异非常显（Ｐ〈０．０１）。结论：封闭负压引流提高创面微循环血流速度,扩张微血管,从而增加创面血供,改善血液循环。