利用抑制性消减杂交技术构建太空诱变宫颈癌细胞cDNA消减文库

目的利用抑制性消减杂交技术构建太空诱变宫颈癌细胞的消减文库,为进一步从基因表达水平研究空间特殊环境影响肿瘤细胞生物学行为改变的分子机制奠定基础。方法采用SuperSMART和SSH技术,以太空诱变的宫颈癌48A9细胞株作为Tester,地面正常对照组宫颈癌细胞株作为Driver,分离太空诱变的宫颈癌48A9细胞中差异表达的基因片段;连接T载体,转化宿主菌,构建太空诱变的宫颈癌48A9细胞cDNA抑制性消减文库。结果经蓝白筛选后随机挑取300个阳性克隆,以接头1和2R内侧序列为引物进行菌液PCR扩增鉴定阳性克隆,结果显示其中288个克隆有插入片段,阳性率为96％,大小分布在0．2—1．0kb间。结论本实验利用抑制性消减杂交技术成功的构建了高质量的太空诱变宫颈癌细胞消减文库,为进一步从基因水平阐明太空特殊环境对肿瘤细胞生物学行为改变的分子机制奠定了基础。     

"协调"在兵团团场卫生防疫管理工作中的作用

兵团团场卫生防疫站是一个由卫生、防疫、地方病、检验、妇幼保健、卫生监督及爱国卫生等工作组成的综合性业务单位。兵团团场卫生防疫站肩负着团场预防保健工作的重任,通过多年的工作实践表明,由于团场各级领导的高度重视,各部门的紧密配合,采取了一系列强有力的措施,使我团的预防保健工作取得了显著的成效。笔者深深体会到,团场预防保健工作应注意各部门的协调工作,协调工作的好坏是保证预防保健工作顺利开展的基础。1认识协调人们在整个社会活动中,协调起着至关重要的作用。协调在人们的学习、工作、生活过程中无处不在。协调是人们在各…     

1194名小学生现时营养状况调查分析

为了解我团小学生营养状况:进一步采取改善措施以提高儿童青少年的健康水平,我站组织有关人员,于2002年5—6月份对团中心小学在校学生现时营养状况进行了调查,现将结果报告如下: 1 调查对象及方法 1.1 对象为我团一所中心小学7～12岁的学生     

EGFL7的重组表达及其抗体制备和初步应用

目的:新近研究发现EGFL7蛋白与肝癌密切相关。本研究对基因egfl7进行克隆、表达并制备多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础。方法:通过RT-PCR方法,从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增egfl7目的片段,利用基因重组技术构建pET21a(+)-TRX-EGFL7原核表达载体,用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。His-tag磁珠纯化试剂盒纯化重组蛋白EGFL7,SDS-PAGE鉴定。将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA、Western blot方法检测抗体的灵敏度和特异性,并测定临床血清标本中EGFL7蛋白水平。结果:成功地构建了原核表达质粒pET21a(+)-TRX-EG-FL7。并在大肠杆菌BL21(DE3)内得以高效表达,且以包涵体的形式存在。SDS-PAGE和Western blot证实,重组EGFL7蛋白质与预期结果一致,抗血清能够特异地识别重组蛋白和血清蛋白质。结论:成功制备了EGFL7蛋白质和多克隆抗体,能用于后续研究。     

高效液相色谱法测定活血通络片中特女贞苷的含量

目的：探讨活血通络片中特女贞苷含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱：C18（岛津WonderatODS2150×4．6mm,5μm）;流动相：甲醇-0．05％磷N2（34：66）;检测波长：224nm;柱温：35℃;流速：1．0mL／min。结果：特女贞苷进样量在0．29～2．61μg范围内具有良好的线性关系;平均回收率为97．87％,RSD=1．21％。结论：本测定方法简便可行、重复性好．可用于活血通络片的质量控制。     

生脉超微颗粒与其散剂的体外溶出度研究

目的:对生脉超微颗粒与其散剂中人参总皂苷、五味子醇甲、总多糖的体外溶出度及溶出动力学进行考察.方法:采用浆法,以自制生脉散为参比制剂,采用分光光度法测定了人参总皂苷、总多糖的体外累计溶出度;采用HPLC法测定了五味子醇甲的体外累计溶出度,并以Weibull方程进行溶出动力学模拟.结果:生脉超微颗粒中人参总皂苷、五味子醇甲、总多糖的的Td和T50均明显小于生脉散.结论:生脉超微颗粒的溶出度和溶出速率均优于生脉散.     

HPLC 法测定小儿利湿止泻合剂中没食子酸含量的研究

目的 建立以高效液相色谱法测定小儿利湿止泻合剂中没食子酸含量的方法,改进原含量测定方法.方法 色谱柱为Polaris C-18,流动相为甲醇∶0.1%磷酸溶液(15 ∶85),检测波长为273 nm,流速为1.0 ml /min,柱温为室温,进样量为10 μl.结果 没食子酸进样量在0.049 ～0.368 μg 范围内与峰面积积分值线性关系良好(R 2＝0.9993 ),平均回收率为96.61 %RSD ＝0.76 %.结论 本方法简便、快捷、专属性强、重现性好,克服了原薄层扫描法背景干扰较大、重复性较差等缺陷,可用于小儿利湿止泻合剂的质量控制.     

中医药治疗动脉硬化的临床进展

动脉硬化性疾病作为一类慢性复杂性疾病,既是多种病理因素的结果,也是多种疾病的病因.近年来由于生活水平的提高,不健康的生活方式使本病发生率增高,现已跃居导致人口死亡的主要原因之列[1].动脉硬化的防治已成为临床多种疾病,尤其是心脑血管疾病治疗的重要途径之一.中医药治疗本病有独特的疗效和方法.笔者就近年来对老中医药专家治疗本病的学术思想及临床经验概述如下.     

金精固体饮料的HPLC指纹图谱研究

目的：建立金精固体饮料的HPLC指纹图谱,为有效评价其质量提供参考。方法采用HPLC法对10批金精固体饮料样品进行测定,以Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长327 nm,流速1.0 ml/min,柱温35℃。采用中药色谱指纹图谱相似度评价软件对结果进行评价。结果建立了金精固体饮料的 HPLC 指纹图谱,并标定了包括绿原酸在内的12个共有峰,10批样品的相似度均＞0.9。结论该法操作简便可靠,所建立的指纹图谱重现性良好,可作为控制和评价金精固体饮料质量的方法。     

益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、VEGF/KDR表达的影响

目的:观察益气化瘀解毒方对人肝癌裸鼠HepG2移植瘤MVD、HIF1a、VEGF/KDR表达的影响。方法:建立人肝癌移植瘤模型,分为7组,分别以益气化瘀解毒方、黄芪、莪术、重楼、壁虎、顺铂药物干预21 d后,取瘤组织行免疫组化检测。结果:①对MVD的影响:全方组与除顺铂外的其它组比较有统计学意义(P<0.05);除黄芪、莪术外的其它组与空白组比较有统计学意义(P<0.05)。②对HIF1a的影响:全方组与除黄芪外的其它组比较有统计学意义(P<0.05);各组与空白组比较有统计学意义(P<0.05)。③对VEGF表达的影响:全方组与除顺铂外的其它组比较均有统计学意义(P<0.05);莪术组与空白组比较无统计学意义(P>0.05)。④对KDR表达的影响:全方组与其它各组比较均有统计学意义(P<0.05);黄芪组与空白组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:益气化瘀解毒方能明显抑制人肝癌裸鼠移植瘤MVD、HIF1a、VEGF和KDR的表达而发挥抗血管生成作用;各单味药对其作用各有侧重,但作为整方的有机组成从不同环节发挥了协同作用。