眼镜蛇药材质量标准提升研究

目的 通过研究眼镜蛇性状、鉴别、检查等项目,建立眼镜蛇特异性鉴别方法,完善眼镜蛇药材地方标准,探讨其列入行业、地方或国家标准的可能性。方法 收集眼镜蛇、蕲蛇、乌梢蛇、金钱白花蛇等共3科6属8种23条蛇类,对眼镜蛇进行外观性状和显微鉴别研究;通过比对GenBank数据库中收集蛇类的线粒体COI基因序列,设计眼镜蛇特异性引物,提取DNA进行PCR扩增及电泳检测,并对其特异性和适用性进行了考察与验证;测定了眼镜蛇水分、灰分、浸出物等检查项目,完善眼镜蛇质量标准。结果 眼镜蛇外观性状鉴别要点为“颈背部具眼镜状白色斑纹”“腹前段有1个黑褐色横斑,横斑前有1对黑色斑点”等,显微特征有角质鳞片、表皮、横纹肌、骨陷窝、骨小管等;眼镜蛇特异性引物YJS203-F/YJS303-R能够准确鉴别出眼镜蛇及其他蛇类;16批眼镜蛇样品的水分、灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物的平均值分别为5.71%,21.10%,0.16%,20.32%,13.16%。结论 COI基因序列能够对眼镜蛇进行特异性鉴别,该方法快捷高效、结果准确;在原有地方标准的基础上,完善了眼镜蛇药材的质量标准,为眼镜蛇药材质量评价体系的制定和完善提供科学依据。     

尖吻蝮蛇毒研究进展

尖吻蝮(又名五步蛇,中药材名为蕲蛇)蛇毒,是从尖吻蝮毒腺中分泌的毒液,内含磷脂酶A₂、丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶、C型凝集素、L-氨基酸氧化酶等多种蛋白类成分和肽类成分,具有多种生物活性,在抗肿瘤、抗血栓、抗炎、抗菌等方面发挥着重要作用。近年来,蛇毒研究日益广泛,但目前仍缺乏对尖吻蝮蛇毒全面系统的研究。本文通过检索尖吻蝮蛇毒的相关研究进展,在其来源、鉴别、活性成分、毒性研究及质量研究等方面进行总结与分析,以期为尖吻蝮蛇毒进一步开发利用提供参考。     

肺复方联合顺铂对气阴两虚Lewis肺癌荷瘤小鼠的影响

目的:研究气阴两虚Lewis肺癌荷瘤模型小鼠的行为学特征、饮水量、摄食量、体质量及肺复方对上述指标及脏器指数的影响.方法:取C57BL/6J小鼠40只,将其随机分为空白组8只、造模组32只.造模组灌服热性中药水煎液合并烟熏制备气阴两虚模型(造模第一阶段,共14 d),于第15天移植Lewis肺癌细胞(造模第二阶段,共1...     

用EBV转化的肝癌患者B细胞构建噬菌体单链抗体库

目的 构建抗肝癌人源噬菌体单链抗体库.方法 体外致敏并用EBV转化肝癌患者的PBMC.用PCR分别扩增VH和VL基因并组成ScFv基因.将ScFv基因与载体连接后,转化大肠杆菌MC1061,构建噬菌体呈现型ScFv库.结果 经EBV转化的4例肝癌患者PBMC,ELISA检测均有抗肝癌抗体产生,经多次PCK,扩增出6种vH(γ、μ)和9种VL(κ、λ)基因,经连接组成54种ScFv基因.将ScFv基因与载体连接后.导入大肠杆菌MC1 061.经四环素抗性筛选,得到库容为1.0×108的初级噬菌体抗独特型抗体库,噬菌体DNA中全长ScFv基因的插入率为80%.结论 用体外致敏法结合噬菌体抗体库技术,制备全人源抗肿瘤单链抗体(ScFv),这一策略是完全可行的.     

γ-氨基丁酸对肝癌细胞株HepG-2恶性表型的影响

目的：研究γ-氨基丁酸（GABA）对肝癌细胞株HepG-2增殖能力及恶性表型的影响。方法：用不同浓度的GABA与人肝癌细胞HepG-2作用后,用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞生长速度,并测定其倍增时间,流式细胞仪检测细胞周期的改变,软琼脂细胞集落形式实验和裸鼠成瘤实验检测细胞的恶性表型。结果：MTT实验结果表明实验组细胞的生长速度明显快于对照组细胞的生长速度,且呈剂量依赖性,其细胞周期分布也发生改变,G1期细胞减少,S期细胞增多;对照组细胞和各浓度组细胞的平均倍增时间分别为39.0,30.6,30.0,27.3,26.6和38.2 h,软琼脂细胞集落形成率依次为3.2%,4.2%,5.4%,6.6%,6.5%,3.5%,Balb/c裸鼠成瘤实验显示,对照组和实验组的肿瘤平均质量依次为0.285和1.382 g,其差异有统计学意义（P＜0.01）。结论：GABA能促进细胞增殖,并引起细胞恶化改变。     

正交试验法优选猫爪草中总黄酮的提取工艺

目的:采用正交试验优选猫爪草中总黄酮的最佳提取工艺。方法:以总黄酮提取量和浸膏得率为综合考察指标,采用L9(34)正交试验考察溶剂体积、乙醇浓度、提取时间及提取温度对猫爪草中总黄酮提取工艺的影响。结果:影响猫爪草中总黄酮提取的因素依次为:提取时间溶剂浓度加乙醇量提取温度。猫爪草中总黄酮的最佳提取工艺为:在60℃的温度条件下,猫爪草粗粉加乙醇回流提取2次,第1次加8倍量75%乙醇提取1.5h,第2次加7倍量75%乙醇提取1 h。结论:通过正交试验优选的提取工艺经验证稳定、简便易行、预测性好,为猫爪草的进一步研发奠定基础。     

HPLC法测定妇炎消片中大黄素含量的研究

妇炎消胶囊是国家食品药品监督管理局颁布的国家药品标准品种,标准编号：WS-10343（ZD-0343）-2002,笔者将其改为片剂,大黄是妇炎消胶囊中的主要药物,大黄素是大黄的指标性成分,原标准中对方中大黄的大黄素（C10H10O4）进行了含量测定,2010版《中国药典》大黄药物中大黄素采用的也是高效液相色谱（HPLC）法,     

五积散浓缩丸中麻黄等药味水提取工艺的研究

目的 对五积散浓缩丸水提工艺进行研究.方法 采用HPCE法测定盐酸麻黄碱含量,采用HPLC法测定甘草苷、甘草酸含量,考察微粉动态提取与其传统饮片水煎对提取率的影响.结果 微粉低温动态提取浸出物、盐酸麻黄碱、甘草酸、甘草苷提取率均较传统饮片煎煮高.结论 五积散浓缩丸中,麻黄、甘草等的水提取可采用微粉动态提取的工艺.     

医学模拟教学中心发展的实践探讨

医学模拟教学是我国新兴且处于发展阶段的教育教学手段与方法。目前各高校的模拟教学中心发展迅速,但如何提高中心运行的有效度是需要探讨的课题。结合自身经验,分析了医学模拟教学中心发展的相关因素,从团队建设、师资培训、对接需求、人员配备等方面进行总结和论述,为各校医学模拟中心的建设提供参考和思路。     

远志HPLC指纹图谱及rbcL序列分子鉴定研究

目的 建立14批不同产地远志药材HPLC指纹图谱并利用化学计量学方法对其进行质量评价。采用DNA分子鉴定技术对远志药材进行物种鉴定,为远志药材质量控制提供依据。方法 选用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,0.5μm）,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长316 nm,进样量10μL,运用软件“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”（2012版）对14批远志药材进行相似度评价,确认共有峰,对测定结果进行聚类分析和主成分分析,并结合正交偏最小二乘-判别分析对样品进行模式识别。提取14批远志以及白薇、瓜子金样品的DNA进行序列分析和物种鉴定,并从NCBI数据库下载混淆品的序列,借助MEGA-X计算遗传距离并构建系统发育树。结果 建立了14批远志药材的HPLC指纹图谱,标定了20个共有峰,相似度均大于0.918,化学计量学分析将14批远志药材分为3类。经DNA分子鉴定,14批远志药材均为远志科植物远志Polygala tenuifolia,遗传距离和NJ树分析可将远志与混淆品区分开。结论 所建立的H...