Liguzinediol调控心肌细胞线粒体动力学和自噬改善心肌梗死后大鼠心功能的机制

目的：观察川芎嗪衍生物2,5?二羟甲基?3,6?二甲基吡嗪（liguzinediol,Lig）对左冠状动脉前降支结扎致心肌梗死大鼠的心功能改善作用及其潜在机制。方法：结扎大鼠心脏左冠状动脉前降支复制大鼠心肌梗死模型,给予不同剂量Lig（5、10、20 mg/kg）及阳性药地高辛（0.033 2 mg/kg）治疗12周。超声心动图检测心功能;试剂盒检测心肌损伤标志物脑钠肽（brain natriuretic peptides,BNP）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）和三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）含量;HE染色观察心肌形态;电镜检测线粒体形态;Western blot检测线粒体动力学相关蛋白的表达水平;免疫组织化学染色检测线粒体自噬相关蛋白的表达水平。复制氧糖剥夺（oxygen glucose deprivation,OGD）H9C2细胞模型。使用Lig干预细胞,并将自噬激动剂和抑制剂与Lig结合使用。Western blot检测线粒体自噬相关蛋白的表达;转染LC3B腺病毒检测自噬水平;荧光标记检测线粒体膜电位、活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平和细胞凋亡。结果：Lig各个剂量均能显著升高心肌梗死模型大鼠射血分数（ejection fraction,EF）、左室短轴缩短率（fractional shortening,FS）,减小左室收缩末期内径（left ventricular dimension in systole,LVIDs）。Lig可显著降低心肌梗死模型大鼠血清BNP、LDH,并增加大鼠心脏中ATP水平。Lig改善心肌梗死大鼠心肌细胞及线粒体形态,调节心肌梗死大鼠心脏中线粒体动力学相关蛋白表达并促进自噬。在体外,Lig减少OGD模型H9C2细胞的ROS含量,促进线粒体自噬和融合,保护线粒体膜电位,减少H9C2细胞凋亡。自噬激动剂与Lig的合用部分增加了Lig对OGD模型H9C2细胞的保护作用,自噬抑制剂则可改变Lig对OGD模型H9C2细胞线粒体的调节作用及对凋亡的抑制作用。结论：Lig可促进线粒体自噬和融合,维持线粒体形态和功能完整,减少心肌细胞凋亡,改善心肌梗死大鼠的心功能。     

Liguzinediol对普罗帕酮诱导的急性心衰大鼠心功能的影响

目的：观察川芎嗪衍生物（Liguzinediol）对普罗帕酮诱导的急性心力衰竭大鼠心脏的保护作用及机制。方法：静脉注射普罗帕酮复制大鼠急性心力衰竭模型,给予不同剂量的Liguzinediol（5.0、10.0、20.0 mg/kg）及阳性药西地兰（Digilanid C 0.045 mg/kg）,用RM6240多道生理信号采集处理系统记录给药0、5、10、20、40、60、90、120 min时左心室内压最大上升/下降速率（±dp/dtmax）、左心室收缩压（left ventricular systolic pressure,LVSP）、平均收缩压（mean systolic pressure,MSP）、平均舒张压（mean diastolic pressure,MDP）和心率（heart rate,HR）的变化;Western blot、q?PCR检测钙离子（Ca2+）转运相关蛋白表达并探索其作用机制。结果：Liguzinediol 5.0、10.0和20.0 mg/kg均能有效升高模型大鼠+dp/dtmax、?dp/dtmax、LVSP、MSP、MDP和HR。Western blot和q?PCR结果显示Liguzinediol可增加钙调素依赖蛋白激酶Ⅱ（Ca2+/calmodulin?dependent protein kinaseⅡ,CAMKⅡ）及其磷酸化蛋白P? CAMKⅡ、肌浆网Ca2+?ATP酶（sarcoplasmic reticulum Ca2+?ATPase2a,SERCA2a）和磷酸化受磷蛋白（P?phospholamban,P?PLN）的表达,而兰尼碱受体2（ryanodine receptor 2,RyR2）和FK506结合蛋白12.6（FK506 binding protein 12.6,FKBP12.6）表达无显著差异。结论：Liguzinediol可明显改善急性心衰大鼠的血流动力学指标,其作用机制可能是通过调控CAMKⅡ改变细胞内Ca2+浓度来增强心肌收缩力,改善心衰。     

六味地黄丸对去卵巢ApoE-/-AS小鼠动脉粥样硬化的作用及机制研究

目的 探讨六味地黄丸（LWDHF）对更年期动脉粥样硬化的影响,阐明雌激素受体β和热休克蛋白27磷酸化在其中的作用。方法 HE染色观察ApoE-/-小鼠动脉损伤情况,免疫组织化学法检测血管内HSP27磷酸化水平。MTT法和流式细胞术分别检测VSMC增殖和细胞周期。通过伤口愈合实验和F-actin染色观察VSMC迁移。Western blot检测HSP27、pHSP27、cyclin D1、蛋白磷酸酶2和ERβ的表达。分别采用ERβ siRNA和ERα shRNA转染研究它们在LWDHF效应中的作用。结果 LWDHF改善了去卵巢ApoE-/-AS小鼠的动脉损伤,抑制了HSP27的磷酸化,并增加了PP2A和ERβ的表达。在体外实验中,1×10-7 mol/L浓度的血管紧张素Ⅱ明显诱导VSMC增殖和迁移,增加cyclin D1的表达和S期细胞数,但12 μg/mL浓度的LWDHF可以明显抑制上述作用。进一步机制研究表明LWDHF通过ERβ上调PP2A的表达,抑制HSP27磷酸化,而抑制VSMC增殖和迁移。结论 LWDHF可以减轻更年期动脉粥样硬化,且通过调节ERβ抑制HSP27磷酸化,抑制VSMCs的增殖迁移。这些发现为LWDHF作为动脉粥样硬化的潜在治疗提供了新的理论基础。     

四维彩超在产前胎儿畸形筛查中的应用价值

目的研究四维彩超在产前胎儿畸形筛查中的应用价值,提高诊断率。方法回顾分析285例18～32孕周中晚期胎儿常规行二维和四维彩超检查,仪器为GE Voluson 730 expert。四维成像方法应用经腹容积探头,在二维超声的基础上,采用表面成像法和透明成像法,显示胎儿部位立体成像,重点观察胎儿颜面部、脊柱、肢体及心脏结构,并对病变部位进行多方位扫描。结果本组资料中285例发现胎儿畸形10例,符合率80%,漏诊1例,漏诊率10%。结论四维超声能动态连续显示胎儿在宫内的活动状况,显示胎儿表面结构立体完整并安全简便无损伤,具有很高的敏感性及准确性,在产前胎儿畸形的筛查中具有重要的临床应用价值。     

龙藤筋骨片治疗老年骨质增生性腰椎病疗效观察

目的探讨龙藤筋骨片治疗老年骨质增生性腰椎病的临床疗效及安全性。方法将212例老年骨质增生性腰椎病患者随机分为治疗组（口服龙藤筋骨片）和对照组（口服抗骨质增生胶囊）,4周为1疗程。治疗前后分别检查血、尿常规和肝、肾功能。结果龙藤筋骨片治疗老年骨质增生性腰椎病的疗效优于抗骨增生胶囊（P〈0.05）,在缓解临床症状、恢复功能活动方面疗效显著。服药前后检查的血、尿常规和肝肾功能均正常。结论龙藤筋骨片治疗老年骨质增生性腰椎病有较好疗效,安全无毒副作用。     

山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠卵巢衰老的影响

目的探讨山茱萸炮制增效活性部位对老年小鼠卵巢衰老的影响。方法老年小鼠、青年小鼠每天灌胃一次,连续一个月,取出卵巢后,石蜡切片,HE染色,形态学观察。结果与青年组比较,老年小鼠卵巢皮质卵泡总数及黄体数量明显减少,且闭锁卵泡增多;山茱萸（制品）醇沉多糖组卵巢皮质可见各级生长卵泡;山茱萸（制品）水煎液组卵巢皮质可见到的卵泡数量明显比老年组多,少于青年组。山茱萸（制品）石油醚萃取部位组卵巢皮质卵泡总数及黄体增多,颗粒细胞层变厚。山茱萸（制品）正丁醇萃取部位组见各级卵泡,较多的成熟卵泡和黄体,颗粒细胞层增厚。结论山茱萸炮制增效活性部位均可不同程度延缓老年小鼠卵巢的衰老。     

六味地黄丸对去卵巢ApoE~(-/-)AS小鼠动脉粥样硬化的作用及机制研究（英文）

目的探讨六味地黄丸(LWDHF)对更年期动脉粥样硬化的影响,阐明雌激素受体β和热休克蛋白27磷酸化在其中的作用。方法 HE染色观察ApoE-/-小鼠动脉损伤情况,免疫组织化学法检测血管内HSP27磷酸化水平。MTT法和流式细胞术分别检测VSMC增殖和细胞周期。通过伤口愈合实验和F-actin染色观察VSMC迁移。Western blot检测HSP27、pHSP27、cyclin D1、蛋白磷酸酶2和ERβ的表达。分别采用ERβsiRNA和ERαshRNA转染研究它们在LWDHF效应中的作用。结果 LWDHF改善了去卵巢ApoE-/-AS小鼠的动脉损伤,抑制了HSP27的磷酸化,并增加了PP2A和ERβ的表达。在体外实验中,1×10-7 mol/L浓度的血管紧张素Ⅱ明显诱导VSMC增殖和迁移,增加cyclin D1的表达和S期细胞数,但12μg/mL浓度的LWDHF可以明显抑制上述作用。进一步机制研究表明LWDHF通过ERβ上调PP2A的表达,抑制HSP27磷酸化,而抑制VSMC增殖和迁移。结论 LWDHF可以减轻更年期动脉粥样硬化,且通过调节ERβ抑制HSP27磷酸化,抑制VSMCs的增殖迁移。这些发现为LWDHF作为动脉粥样硬化的潜在治疗提供了新的理论基础。     

磁敏感血管征在显示超急性脑梗死颅内动脉血栓中的应用

目的探讨磁敏感加权成像(SWI)技术显示超急性脑梗死颅内动脉血栓的应用价值。方法选取46例发病6 h内的超急性脑梗死患者进行回顾性分析,术前进行头部平扫CT、常规MRI、弥散加权成像、SWI(发病6 h以内),之后进行数字减影血管造影(DSA)检查;分析CT脑动脉高密度征(CHAS)、SWI磁敏感血管征(SVS)诊断动脉血栓的灵敏度、特异度,利用Kappa检验CHAS与SVS之间的一致性。结果 46例患者中DSA证实颅内动脉血栓15例。以DSA为参考标准,CHAS和SVS诊断动脉血栓的灵敏度、特异度、诊断效率、阳性预测值、阴性预测值分别为86.7%(13/15)、93.5%(29/31)、91.3%(42/46)、86.7%(13/15)、93.5%(29/31)和100%(15/15)、93.5%(29/31)、95.7%(44/46)、91.3%(42/46)、100%(29/29),CHAS与SVS诊断动脉血栓一致性较好(k=0.758,P0.05)。结论 SVS对显示颅内动脉血栓有重要意义,SWI技术可常规用于超急性期脑梗死患者。     

川丹通脉片的药效学实验研究

目的对川丹通脉片的主要药效学进行观察,为该药的临床应用提供药效学实验依据。方法实验分为空白对照组,阳性对照组,川丹通脉片高、中、低剂量组(10.4、5.2、2.6 g·kg-1),采用阈下剂量戊巴比妥钠协同作用对大鼠血压的影响实验,从而观察川丹通脉片的降血压作用;另外,通过显微镜记录川丹通脉片对小鼠耳微动脉、微静脉血管管径的影响,观察川丹通脉片的扩血管作用。结果川丹通脉片3个剂量组均能明显降低高血压大鼠血压,扩张小鼠耳微动脉、微静脉血管。结论川丹通脉片具有明显的降血压、扩张血管作用,初步证明是安全的。