脊髓再灌注损伤后细胞间黏附分子1及白细胞介素1β表达的变化

背景:目前国外有探讨细胞因子和黏附分子在缺血再灌注损伤时的表达,但均未涉及内源性细胞因子和微血管内皮细胞表面黏附分子在损伤后相关性的研究,对内源性白细胞介素1在损伤中的表达也仅限于mRNA水平。目的:探讨细胞间黏附分子1及其调节因子白细胞介素1β的表达在脊髓缺血再灌注损伤中作用机制。设计:随机分组设计、动物实验。单位:吉林大学体育学院运动医学系。材料:实验于2003-03/2004-01在吉林大学中日联谊医院中心实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠77只,随机数字表法分为正常对照组7只,单纯缺血组14只和缺血再灌注组56只。单纯缺血组:阻断血流30min7只,阻断血流60min7只;缺血再灌注组:根据脊髓缺血30min后再灌注30,60min,2,4,6,9,12,24h又分为8个时相点,每个时相点7只。方法:采用Zivin法复制脊髓缺血再灌注损伤动物模型。采用反转录-聚合酶链反应、免疫组织化学及免疫荧光激光共聚焦扫描显微镜技术检测脊髓缺血再灌注损伤后血管内皮细胞间黏附分子1mRNA和白细胞介素1βmRNA表达量。主要观察指标:白细胞介素1βmRNA表达、白细胞介素1多肽活性、细胞间黏附分子1mRNA和蛋白的表达、髓过氧化物酶活性。结果:纳入动物77只,均进入结果分析。①缺血再灌注组白细胞介素1βmRNA(A值)表达量明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著(分别为1.07±0.33,0.60±0.22,0.57±0.12,t=3.7517,11.8526,P<0.01)。②缺血再灌注组白细胞介素1多肽活性(A值)明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(33.7±3.2),(23.8±4.5),(23.1±2.1),t=2.7988,9.9627,P<0.01]。③缺血再灌注组细胞间黏附分子1mRNA(A值)明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为0.94±0.12,0.52±0.11,0.51±0.10,t=0.3270,6.1274,P<0.01]。④缺血再灌注4,6,12h各组细胞间黏附分子1蛋白的表达明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(316.90±26.00),(361.40±18.00),(406.00±23.00),(164.21±2.00),(180.00±32.00)μg/L,t=1.4103,9.1193,P<0.01]。⑤缺血再灌注12h组髓过氧化物酶活性明显高于单纯缺血组和正常对照组,差异显著[分别为(15.00±2.00),(7.50±1.67),(6.67±1.00)nkat/g,t=3.0122,P<0.01]。结论:再灌注损伤后脊髓内炎症反应是导致血脊髓屏障损害的重要分子基础,在继发性脊髓损伤过程中起到重要作用。     

人骨肉瘤蛋白质组双向电泳图像分析方法的建立

目的建立和优化人骨肉瘤蛋白质组双向电泳图像分析方法。方法对第一向双向电泳的关键因素与环节(如样品处理、电泳参数和凝胶浓度等)进行一系列优化。进一步采用双向凝胶电泳分离骨肉瘤组和正常组总蛋白质,银染显色,Image Master图像分析系统分析电泳图谱。结果重复性实验结果显示同组样品在3次不同实验中所的蛋白质斑点数目相对标准差。(变异系数平均值%):骨肉瘤组和正常组分别为23.00±10.11、20.33±9.90。(变异系数范围%):骨肉瘤组和正常组分别为3.80-6.89、2.70-6.89。同一蛋白质斑点在3次实验中等电点、分子量的相对标准差分别为8.93%±1.17%,10.16%±2.02%和10.87%±3.86%。获得了优于传统实验方法的分辨率和可重复性的双向凝胶电泳图谱。结论优化的双向凝胶电泳图象分析技术适合于骨肉瘤蛋白质组研究。     

电刺激后颅窝治疗偏头痛的疗效观察

目的：观察电刺激后颅窝对偏头痛的治疗效果。方法：对18例偏头痛患者采用经皮电刺激后颅窝方法进行治疗,观察治疗前后分别对患者的月头痛频率和头痛指数的变化。结果：治疗前的月头痛频率和头痛指数分别为3．89±2．30和39．83±23．38,电刺激治疗一疗程后的月头痛频率和头痛指数分别为2．89±1．94和28．98±16．68,其月头痛频率和头痛指数在治疗前后均有显著差异（P〈0．05）。结论：电刺激后颅窝对偏头痛有较好的治疗效果。     

红花单功能反馈抑制敏感型CtAK1基因克隆、序列分析及表达载体构建

目的分离红花天冬氨酸代谢途径关键酶天冬氨酸激酶(AK)基因的全长cDNA序列,进行植物超表达载体构建。方法根据红花种了转录组文库注释和qRT-PCR鉴定的AK基因核心片段及表达分析数据,采用RACE技术获得红花AK(CtAK)基因的全长cDNA,利用DNA重组技术构建植物超表达载体。结果生物信息学分析表明,CtAK基因全长1 703bp,ORF区为1 626 bp,编码541个氨基酸残基,功能结构域分析推测,该基因可能为单功能反馈抑制敏感植物AK1。通过DNA重组技术成功构建以35 S为启动子和Bar抗性基因并含有叶绿体转运肽的pCAMBIA3301-CTP-AK1植物超表达载体。结论获得CtAK1基因的编码序列并构建植物超表达载体,为进一步研究其生物学功能及其在红花氨基酸代谢调控中的作用机制奠定基础。     

100例数字减影脑血管造影术的护理及配合体会

目的总结100例数字减影脑血管造影术（DSA）患者的护理及配合体会。方法术前对患者进行耐心的心理护理、充分的术前准备,术中心理护理、配合及手术后密切的观察、护理：结果100例脑血管造影均取得满意效果,造影成功率100％。1例患者术中出现血压下降,5例患者术后有轻微并发症。结论DSA能准确评估血管状况,比较安全。全面护理对保证造影成功、减少并发症有重要作用。     

颈椎过伸性损伤手术治疗及疗效分析

目的 探讨手术与非手术治疗在老年急性颈椎过伸损伤中作用。方法 对35例颈椎过伸性损伤病人进行回顾性分析。结果 手术组21例（其中颈椎前路手术减压术3例，后路减压术8例，单开门椎管成形术4例，双开门椎管扩大成形术6例）。非手术组10例。颈脊髓损伤神经功恢复按Frank分级。经过随访观察1．0～1．5年，脊髓神经功能恢复情况，手术组比非手术组疗效满意。结论 尽管老年人颈椎过伸颈髓损伤属高危疾病人群，但如果能耐受手术，获得早期手术减压，仍可取得较好的疗效。     

腹腔镜胃十二指肠溃疡穿孔修补术的疗效及安全性分析

目的探讨腹腔镜胃十二指肠溃疡穿孔修补术的临床疗效及安全性。方法将102例胃十二指肠溃疡穿孔患者按手术方式不同分为2组,各51例。对照组给予传统开腹穿孔修补术,观察组给予腹腔镜穿孔修补术。对比分析2组的治疗效果。结果观察组术中出血量、手术时间、术后下床活动时间、肛门恢复通气时间、并发症发病率及出院时间均明显优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论腹腔镜下胃十二指肠溃疡穿孔修补术创伤小,康复快,安全性高、并发症发生率低。     

运动性跟腱损伤的临床流行病学特点

目的：分析运动性跟腱损伤患者的临床资料，探讨如何防治运动性跟腱损伤发生，降低其发生率。 方法：对运动性跟腱损伤的临床资料进行回顾性分析。于1994-08／2005-11选择吉林大学中日联谊医院骨科、解放军第四六一医院骨科收治运动性跟腱损伤患者64例为研究对象。保守治疗10例，分别采取屈膝跖屈石膏固定4—6周。手术治疗54例，其中进行直接缝合术41例，局部肌腱瓣成形术11例，异体肌腱移植2例。术后屈膝40&;#176;，足跖屈30&;#176;位长腿石膏固定，6周后改为膝下石膏固定，8周后拆除石膏，改穿高跟鞋，练习踝关节跖背屈活动。10周后去高跟鞋，逐步适应性练习全足落地下蹲，12周后练习双足提踵，并逐渐过渡到单足提踵。20周后踝关节活动加大加强，可室内工作，24周后恢复正常工作和剧烈活动。随访6个月，按照Amer-Lindholm评定标准评估疗效。建立运动性跟腱损伤患者数据库，对每例患者伤前所从事的运动项目、损伤原因、损伤机制、损伤特点及治疗效果等内容逐一输入数据库，汇总分析。 结果：①患者伤前所从事运动项目：篮球运动21例，跳远运动9例，足球运动8例，长跑运动5例，体操运动3例，排球运动13例，武术3例，散打2例。②与运动性跟腱损伤受伤相关因素：伸膝负重状态下突然弹跳离地动作34例（53％）；不经常锻炼者41例（64％）；未做准备活动与准备活动不充分者51例（80％）；由跟腱原始基础病引起的37例（58％）。③运动性跟腱损伤特点：跟腱似有撞击感或被踢感60例（94％）；可听到跟腱断裂声47例（73％）；伤后局部麻胀、酸感者60例（94％）；无痛觉者12例（19％），有不同程度疼痛者15例（23％）。④疗效分析：随访6-30个月，随访52例，手术治疗患者43例，全部恢复训练及活动，优25例，良16例，差2例；保守治疗患者9例，优3例，良5例，差1例，患肢疲劳、跛行、踝关节活动明显减小。 结论：跟腱原发病存在是引发运动性跟腱损伤重要病理基础，创伤与积累劳损是其主要诱发因素；早期手术治疗有利于跟腱功能恢复。     

脊髓再灌注损伤后细胞间黏附分子1及白细胞介素1β表达的变化

背景：目前国外有探讨细胞因子和黏附分子在缺血再灌注损伤时的表达，但均未涉及内源性细胞因子和微血管内皮细胞表面黏附分子在损伤后相关性的研究，对内源性白细胞介素1在损伤中的表达也仅限于mRNA水平。 目的：探讨细胞间黏附分子1及其调节因子白细胞介素1β的表达在脊髓缺血再灌注损伤中作用机制。 设计：随机分组设计、动物实验。 单位：吉林大学体育学院运动医学系。 材料：实验于2003—03／2004—01在吉林大学中日联谊医院中心实验室完成。选择健康雄性Wistar大鼠77只，随机数字表法分为正常对照组7只，单纯缺血组14只和缺血再灌注组56只。单纯缺血组：阻断血流30min7只，阻断血流60min7只；缺血再灌注组：根据脊髓缺血30min后再灌注30，60min，2，4，6，9，12，24h又分为8个时相点，每个时相点7只。 方法：采用Zivin法复制脊髓缺血再灌注损伤动物模型。采用反转录-聚合酶链反应、免疫组织化学及免疫荧光激光共聚焦扫描显微镜技术检测脊髓缺血再灌注损伤后血管内皮细胞间黏附分子1 mRNA和白细胞介素1 BmRNA表达量。 主要观察指标：白细胞介素1βmRNA表达、白细胞介素1多肽活性、细胞间黏附分子1mRNA和蛋白的表达、髓过氧化物酶活性。 结果：纳入动物77只，均进入结果分析。①缺血再灌注组白细胞介素1βmRNA（A值）表达量明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著（分别为1．07&;#177;0．33，0．60&;#177;0．22，0．57&;#177;0．12，t=3．7517，11．8526，P〈0．01）。②缺血再灌注组白细胞介素1多肽活性（A值）明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（33．7&;#177;3．2），（23．8&;#177;4．5），（23．1&;#177;2．1），t=2．7988，9．9627，P〈0．01]。③缺血再灌注组细胞间黏附分子1mRNA（A值）明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为0．94&;#177;0．12，0．52&;#177;0．11，0．51&;#177;0．10，t=0．3270，6．1274，P〈0．01]。④缺血再灌注4，6，12h各组细胞间黏附分子1蛋白的表达明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（316．90&;#177;26．00），（361．40&;#177;18．00），（406．00&;#177;23．00），（164．21&;#177;2．00），（180．00&;#177;32．00）μg／L，t=1．4103，9．1193，P〈0．01]。⑤缺血再灌注12h组髓过氧化物酶活性明显高于单纯缺血组和正常对照组，差异显著[分别为（15．00&;#177;2．00），（750&;#177;1．67），（6．67&;#177;1．00）nkat／g,t=3，0122,P〈0．01]。 结论：再灌注损伤后脊髓内炎症反应是导致血脊髓屏障损害的重要分子基础，在继发性脊髓损伤过程中起到重要作用。