多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的亲和性

目的:研究多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的亲和性。方法:采用免疫组化染色和RT-PCR,检测与K237结合的VEGF受体KDR的表达;用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察多肽K237与前列腺癌细胞系LNcap的结合能力。结果:前列腺癌细胞系LNcap中有KDR的表达;流式结果显示:多肽K237以浓度依赖性与LNcap细胞结合。激光共聚焦显微镜可观察到,多肽K237结合在LNcap细胞的胞浆和胞膜中。结论:多肽K237对前列腺癌细胞系LNcap具有较高的亲和性,为利用多肽K237通过抑制自分泌途径从而抑制前列腺癌细胞的增殖提供了基础,为肿瘤的治疗提供了新的方法。     

常用抗菌药物对外伤后细菌性致死性肉芽肿病原菌的体外抗菌活性研究

目的了解常用抗菌药物对外伤后细菌性致死性肉芽肿(FBGT)病原菌的体外抗菌活性,为该病的诊治提供实验室依据。方法应用改良的新鲜兔脑厌氧肉汤分离培养病原菌,用API鉴定系统20A鉴定细菌,最低抑菌浓度(MIC)测定采用肉汤稀释法。结果从4例FBGT患者中分离到5株疮疱丙酸杆菌,其对青霉素、氨苄西林、替卡西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、头孢哌酮、克林霉素、亚胺培南/西司他丁的MIC值均在0.125~1.0 mg/L,对甲硝唑的MIC为64~128 mg/L。结论FBGT病原菌生长缓慢,需在营养丰富的厌氧肉汤中生长增殖,增殖成功后可在厌氧血平板中生长,该病原菌对甲硝唑全部耐药,不能应用该类药物治疗;青霉素、氨苄西林、克林霉素等常用抗菌药物体外抗菌活性较高,临床可选择这些不同种类的药物联合治疗。     

一株宽宿主谱大肠埃希菌噬菌体的RNA比较分析及其环境微生物杀灭效应观察

目的通过比较研究一株分离自医院污水的宽宿主范围大肠埃希菌(E．coli)噬菌体与野生型单一宿主谱E．coli噬菌体的核酸序列和微生物杀灭效应等生物学特性的改变探讨噬菌体识别特异性机制和将噬菌体作为生物消毒剂应用于环境污水净化的可行性。方法采用抗体沉淀-盐酸胍一步法分别提取单一宿主谱E．coli噬菌体f2株及宽宿主谱E、coli噬菌体株的RNA，通过琼脂糖凝胶电泳鉴定其纯度；采用简并引物逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)及随机引物随机扩增多态性DNA(RAPD)-PCR比较分析噬菌体宿主谱改变时核酸序列组成的变化；通过以上两噬菌体对环境样本中活菌和E．coil的杀灭效果的观察，比较分析宿主谱改变对噬菌体的微生物杀灭效应这一生物学特性的影响。结果噬菌体核酸分析试验证实，f2噬菌体及宽噬噬菌体均为6000bp左右的单链RNA噬菌体。RAPD—PCR结果显示，两噬菌体基因eDNA扩增出的RAPD—DNA片段有明显的差异，其中26条为可区分的DNA带型。利用简并引物进行的RT—PCR反应显示，噬菌体f2cDNA在450bp附近出现重复性较好的扩增片段，而宽噬噬菌体cDNA在相同条件下未出现扩增产物。环境水样本微生物杀灭试验结果显示，宽宿主谱株噬菌体对环境水样本中的E．coli杀灭率为36．75％～56．28％，对水样本中活菌杀灭率为30.84％～47．96％；而噬菌体f2对环境水样本中的E．coli杀灭率则为19．19％～35．06％，对水样本中活菌杀灭率为13．05％～27.85％。结论宽宿主谱噬菌体微生物杀灭率明显高于野生型单一宿主谱噬菌体f2(P=0．000)；核酸分析证实两噬菌体宿主特异性裂解效应已从基因水平发牛了变化。     

抗前列腺癌多肽APP216的体外活性

目的：探讨抗前列腺癌多肽APP216对体外培养的前列腺癌细胞的杀伤作用，为抗前列腺癌新药的研究奠定基础。方法：利用MTT实验、细胞凋亡染色及流式细胞仪，检测包含有BH3、K237、DG2结构域和能被PSA特异性水解的短肽序列的多肽药物APP216对分泌PSA的前列腺癌细胞系LNCaP、22RV1及不分泌PSA的前列腺癌细胞系PC3m、DU145的杀伤作用。结果：APP216（270 μg／mL）处理48h后，前列腺癌细胞系LNCaP、22RV。的细胞生存率分别为22％和34％，72h后为10％和8％；前列腺癌细胞系PC3m、DU145的细胞生存率分别为90％和95％，72h后为87％和92％。APP216作用后，分泌PSA的前列腺癌细胞胞核呈致密浓染，或呈碎块状，有凋亡小体出现；不分泌PSA的PC3m细胞则未发现改变。APP216（270 μg／ml）处理48h后，分泌PSA的LNCaP细胞凋亡率为36．26％，不分泌PSA的PC3m细胞凋亡率仅为1．63％。结论：APP216多肽对分泌PSA的前列腺癌细胞有杀伤作用，可诱导肿瘤细胞发生凋亡；而对于不分泌PSA的前列腺癌细胞则效果不佳。证实了该多肽可被PSA特异性酶切；同时，BH3结构域可通过HIV-TAT的转导作用转入细胞内诱导凋亡。     

多重聚合酶链反应检测结核菌耐异烟肼相关基因

目的：建立耐异烟肼(isoniazid,INH)结核分枝杆菌(M.tuberclasis,MTB)多重聚合酶链反应(multiple PCR,multi-PCR)检测系统，在一次扩增中快速，特异地同时检出aphC启动子，inhA和kagG基因，用于快速初步诊断结核分枝杆菌对INH的耐药性．方法：根据结核分枝杆菌的aphC启动子，inhA和kagG序列，分别设计出3对特异性寡聚核苷酸引物，采用multi—PCR技术，同时检出对结核分枝杆菌耐INH起作用的3个基因．结果：应用multi—PCR反应体系，对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果；multi—PCR扩增的预期结果为：单基因引物出现一条特异性扩增区带，多重基因引物出现2或3条特异性扩增区带，经实验达到预期的扩增结果；对H37Rv标准株、INH敏感株及INH耐药株分别采用常规PCR和multi—PCR进行同时扩增，结果两种扩增方法均能扩增出预期的目的片段，符合率达100％．结论：multi—PCR能有效地为多基因耐药的临床病原体的诊断提供快速、准确的诊断手段，更能提高检验效率。     

条形码生成系统的开发及其在血液分析仪中的应用

目的：开发条形码生成系统，应用于XE-2100血液分析仪，实现仪器与LIS的双工通讯。方法：采用可视化编程语言PowerBuilder7．0建立相关数据库／表，通过务形码控件MSBCODE9．0CX，将患者资料和检验项目信息生成条形码，并将编写的源代码生成单独可执行程序及其动态链接文件。结果：条形码清晰，识别率高，双工通讯稳定，数据存储安全可靠。条形码作为标本的唯一标识，在其分析的整个过程中，有效地提高工作效率以及对检测数据的管理水平，杜绝标本差错。结论：应用条形码技术，规范了工作流程，为血液细胞学检验自动化、信息化提供了一种全新的模式。     

植绒转运拭子联合显色培养基对鼻腔金黄色葡萄球菌定植的快速筛查

目的 采用植绒转运拭子联合显色培养基对鼻腔金黄色葡萄球菌（SA）定植进行快速筛查，了解耳鼻喉头颈外科患者SA定植情况，为预防SA感染和医院感染防控提供依据。方法 采用eSwab植绒转运拭子采集某院耳鼻喉头颈外科门诊患者鼻前庭标本，以WASPLab微生物自动化系统接种于羊血琼脂培养基和MRSA/SA显色培养基，孵育培养16、40 h，自动拍摄、观察菌落，通过质谱（MALDI-TOF MS）、药敏试验和mecA基因检测对SA进行验证。结果 共采集200份鼻前庭标本，检出SA菌株48株，其中MSSA 23株（占47.9%），MRSA 25株（占比52.1%），鼻腔SA定植率为24.0%，MRSA定植率为12.5%。SA筛查阳性报告平均时间为（17.6±6.1）h。培养与质谱鉴定、耐药表型检测的符合率为100.0%，与mecA基因检测的符合率为97.9%。结论 基于植绒转运拭子联合显色培养基的快速检测方法准确度较高，报告时间较短，可以用于SA定植快速筛查。     

亚硝基铁氰化钠对正常人精子结构的影响

目的：观察一氧化氮（N0）供体亚硝基铁氰化钠（SNP）作用正常精子后超微结构的变化。方法：采用percoll梯度离心法选择具有正常生理功能的精子，与不同浓度的SNP孵育作用后，在透射电镜下观察精子的超微结构。结果：正常精子与300nmol／LSNP作用后，精子膜、顶体及精子线粒体出现不同程度的损伤和结构上的异常。结论：高浓度NO供体SNP可致精子膜、顶体及精子线粒体等超微结构的改变，进一步阐明了精子运动功能障碍的机制。     

SDS-琼脂糖凝胶电泳分析蛋白尿来源的临床意义

目的分析尿蛋白成分来鉴别蛋白尿来源。方法应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶进行非浓缩尿蛋白电泳分析49例蛋白尿患者的尿蛋白成分。结果在肾后性蛋白尿中往往可以检测到巨球蛋白等一类大分子蛋白,而在肾性则往往缺乏。并且以巨球蛋白作为鉴别蛋白尿的标准,其敏感性和特异性均达到95.8%。结论该方法客观性强,诊断符合率高,重复性好,简便快速,值得临床应用。     

血浆脑钠肽水平对冠心病诊断价值的初步探讨

目的通过检测观察冠心病患者血浆中脑钠肽(BNP)水平的改变,并与其肌钙蛋白I(cT n I)水平和高敏感性C反应蛋白(hs CRP)水平变化相比较,初步探讨将BNP作为冠心病临床诊断和治疗的标志物的可靠性。方法2004年3~11月,以分层随机抽样法获取西安地区健康人群血浆样本195份(男性132名,女性63名),西京医院住院患者血浆279份(包括129名冠心病、60名糖尿病、62名肺病疾患、28名单纯眼部疾患),利用微粒子酶免分析法和动态定时散射比浊法分别检测上述血浆BNP浓度、cT n I浓度及hs CRP浓度;将以上数据进行统计学分析,比较冠心病组与非冠心病组的差异显著性。结果统计学分析证实:冠心病组与正常组在BNP水平、cT n I水平及hs CRP水平上均存在非常显著性差异(P<0.01),而其中又以BNP水平差异显著性最大(P=0.001);糖尿病组、肺病组以及眼科阴性对照组的BNP浓度结果与正常组比较则显示无统计学意义(P>0.05)。结论血浆BNP浓度在冠心病患者中显著升高,进一步显示了其在心脏疾患中潜在的临床价值。