BIOMED-2多重聚合酶链反应检测抗原受体基因重排在淋巴增殖性疾病诊断中的应用

目的 建立敏感而有效的检测免疫球蛋白(Ig)和T细胞受体(TCR)基因重排的方法,并探讨在淋巴增殖性疾病诊断和鉴别中的作用.方法 采用BIOMED-2多重聚合酶链反应,检测来自54例淋巴增殖性疾病患者的58份淋巴组织标本,分析抗原受体基凶重排状况及其克隆来源.结果 在88.0%(25份标本中22份)B细胞淋巴瘤/白血病和53.3%(15份标本中8份)T细胞淋巴瘤中检出Ig/TCR呈单克隆重排;在17例淋巴组织非恶性增殖患者的病理活检标本中,14例(82.4%)呈多克隆重排;在合格的57份标本中有44份(77.2%)的结果与最终诊断相符.联合检测Igλ和TCRδ并未提高Ig/TCR单克隆重排的检出率,但可能有助于Igλ和TCRδ+淋巴瘤的诊断.结论 对于分析淋巴增殖性疾病,尤其是不典型病例的克隆来源状况,BIOMED-2多重聚合酶链反应检测抗原受体基凶重排是迅速、敏感而可靠的方法.     

川芎嗪促进放射损伤小鼠骨髓微环境修复的信号传导机理研究

目的　探讨川芎嗪对放射损伤小鼠骨髓造血微环境的影响及其信号传导机理。方法小鼠经60 Coγ射线 (6 0Gy)照射后即胃饲磷酸川芎嗪注射液 ,4mg 只 ,2次 d,连续 1 3d。分别于照射后第 3 ,7,1 4天处死小鼠 ,取尺骨制备石蜡切片 ,用免疫组化方法检测骨髓组织中因子Ⅷ相关抗原和VEGF受体flk 1的表达水平 ;培养骨髓基质细胞 ,用Westernblot方法分析骨髓基质细胞黏着斑激酶(磷酸化FAK)的表达水平。结果　川芎嗪组小鼠造血恢复明显比对照组快 ,照射后第 1 4天 ,川芎嗪组骨髓组织flk 1染色吸光度值 (A)显著高于对照组 (P <0 0 5) ,其基质细胞磷酸化FAK的表达在第1 4天时已接近正常水平 ,而对照组的表达仍较弱。结论　川芎嗪可以促进骨髓内皮细胞上flk 1的表达和基质细胞中FAK的磷酸化 ,是改善放射损伤小鼠骨髓微环境、促进造血恢复的的机理之一     

HLA半相合造血干细胞移植治疗难治性白血病二例

虽然应用HLA半相合造血干细胞移植治疗白血病的病列逐年增加，但用其治疗难治性白血病的病例数仍较少。我完分别于2004年2月和2005年4月对2例难治性白血病施亍了HLA半相合造血干细胞移植，现报告如下。     

亚砷酸对急性早幼粒细胞白血病患者心率校正后QT间期的影响

目的：探讨亚砷酸（ATO）对急性早幼粒细胞白血病（APL）患者心率校正后QT（QTc）间期的影响。方法回顾性分析接受ATO治疗的35例APL患者治疗前及治疗第8、15、22和29天的心电图QTc间期，观察药物使用对QTc间期的影响。结果应用ATO治疗过程中未发现恶性心律失常事件的发生。接受静脉滴注ATO患者第8天的QTc间期较用药前延长（P＜0.01），但随治疗的延续，第15天较第8天QTc间期虽仍有延长，但变化差异无统计学意义（P＞0.05），第15天、第22天和第29天两两比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。暂停用药2周左右，QTc间期较停药第1天缩短（P＜0.001），与用药前QTc比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 ATO治疗APL虽可引起QTc间期延长，但引起恶性心律失常少见，且暂停用药后QTc间期可完全恢复。     

联合微创治疗肝硬化晚期并发症18例

1　临床资料　治疗组男 12例 ,女 6例 ,年龄 18～ 4 7(平均36 .8岁 ) ,乙肝肝硬化 16例 ,酒精肝硬化 1例 ,混合性肝硬化1例 ,首次出血 7例 ,多次出血 11例 ,平均出血次数 (2 .0±1.4 )次 ,6例曾出现过腹水 ,食管静脉曲张按昆明会议记录方法分为[1] 中度 7例 ,重度 11例 ,胃底静脉曲张 14例 ,肝功能Child Pugh分级 ,B级占 12例 ,C级占 6例 .对照组男 14例 ,女 8例 ,年龄 19～ 4 5 (平均 34.7)岁 ,乙肝肝硬化 19例 ,酒精性肝硬化 1例 ,混合性肝硬化 2例 .食管静脉曲张中度 9例 ,重度 13例 ,胃底静脉曲张 16例 ,肝功能Child Pugh分级 ,B级占…     

外周血干细胞移植前后淋巴细胞免疫表型变化

目的　应用双色流式细胞仪动态检测 10例恶性血液病病人外周血干细胞移植 (PBSCT)治疗前后 ,外周血淋巴细胞免疫表型及其临床意义。方法　 10例PBSCT病例中 ,7例PBSCT ,男性 3例 ,女性 4例 ;年龄 2 1～ 4 2岁 ,4例ANLL -M2 ,1例CML ,2例淋巴瘤 ,3例为异基因外周血干细胞移植 (allo -PBSCT) ,男性 2例 ,女性 1例 ;年龄 37～ 4 6岁 ,CML ,ANLL -M2 ,ANLL -M3 各 1例。结果　 10例病人移植前已出现淋巴细胞表型异常 ,其中以代表T抑制细胞 (Ts)的CD3 + CD8+ 水平增高 ,Th/Ts值下降 ,代表B细胞的CD3 -,CD19+ 水平明显降低。移植后 3个月 :CD3 + CD4+ :(16 .5± 7.5 ) % ,CD3 + D8+ :(5 5 .3± 2 3) % ,Th/Ts:0 .2 7±0 .18,CD3 -CD19-L :未测出 ,CD16+ /CD56+ :(14 .3± 9.5 ) %。移植前后的淋巴细胞 (T +B +NK)、T细胞(CD3 + CD19-)及NK细胞 (CD16+ /CD56+ )的百分率水平上没有明显变化 (P >0 .0 5 ) ,但在其构成比例上有异常 ,特别是CD3 + CD4+ 水平降低 ,CD3 + CD8+ 水平升高 ,Th/Ts比值及CD3 -CD19+ 水平均有明显降低 (P <0 .0 5 )。B细胞在 6个月左右开始恢复 ,Th(CD3 + CD4+ )、Ts(CD3 + CD8+ )及Th/Ts恢复很慢 ,个别病例 1年后仍未恢复正常水平。 10例PBSCT后有 4例病人出现不同程度的感染 ,均发生在     

高剂量造血干细胞移植治疗重型再生障碍性贫血的临床观察

重型再生障碍性贫血(SAA)患者在确诊后的6个月内,如未进行有效治疗,死亡率在50%以上[1]。造血干细胞移植(HSCT)是治疗SAA最有效的方法之一。如何提高SAA患者HSCT的成功率非常重要。我们应用异基因造血干细胞移植(allo HSCT)成功治疗4例SAA患者,报道如下。资料与方法1.病例:从2000年12月至2005年1月间,我们对确诊的4例SAA患者进行了allo HSCT,患者及相应HLA配型完全相合的同胞供者资料见表1。2.供者造血干细胞的动员和采集:病例1、2的供者应用人重组粒细胞集落刺激因子(rhG CSF)300μg/d×5d,皮下注射。当外周血CD34 细胞百…     

非清髓异基因造血干细胞移植治疗有并发症的白血病三例

我们应用非清髓异基因造血干细胞移植 (NAST)治疗 3例有并发症的白血病患者 ,报告如下。病例和方法1　病例　例 1 ,男 ,36岁。于 2 0 0 0年 7月出现乏力、低热、脾大平脐 ,外周血常规 :Hb 1 1 8g L ,WBC 2 0× 1 0 9 L ,BPC 2 31×1 0 9 L。骨髓增生明显活跃 ,以中晚幼粒细胞为主。骨髓活检 :粒系明显增生 ,无骨髓纤维化。骨髓细胞染色体分析 :Ph(+)伴t(1 1 ;X)。丙型肝炎病毒 (HCV) RNA(+) ,丙氨酸转氨酶 (ALT) 1 62U L。患病前 2年因反复黑便、纤维胃镜检查为十二指肠球部溃疡 ,曾接受输血 ,并一直应用制缓剂。诊断为慢性粒细…     

细胞毒药物下调细胞外调节蛋白激酶与抑制肝癌SMF7721细胞增殖

目的　研究三种细胞毒药物 (三尖杉酯碱 ,长春新碱 ,足叶已甙 )抑制肝癌 SMF772 1细胞增殖、阻滞细胞周期过程中 ,细胞外调节蛋白激酶 (extracelluar regulated proteinkinases ERK1/2 )磷酸化蛋白表达水平的变化 .探讨细胞毒药物杀伤肝癌 SMF772 1的作用机制 .方法　采用 MTT法测定增殖抑制率 ,应用流式细胞术检测细胞周期 ,应用 Westernblot方法观察 ERK1/2磷酸化蛋白表达水平的变化 .结果　三种细胞毒药物 (三尖杉酯碱 ,长春新碱 ,足叶已甙 )均能不同程度的抑制 SMF772 1细胞增殖 ,抑制率分别为 (2 8±8) % ,(2 5± 16 ) %和 (2 4± 11) % ;三尖杉酯碱可使 SMF772 1细胞周期阻滞于 G1期 ,长春新碱可使其阻抑于 S期和 G2 /M期 ,Vp16则使之受抑于 G2 /M期 .受这三种细胞毒药物作用后 ,肝癌 SMF772 1细胞内处于活化状态的磷酸化 ERK1/2蛋白表达水平下降 . ERK1分别为对照组的 4 3% ,32 % ,72 % ,ERK2分别为对照组的 2 9% ,2 0 % ,6 1% .结论　 ERK通路可能是细胞毒药物杀伤肝癌细胞 SMF772 1的作用机制之一