硫化氢对油酸诱导急性肺损伤大鼠细胞外基质的调节作用

目的 探讨外源性硫化氢(H2S)对油酸诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠细胞外基质(ECM)的调节作用.方法 雄性SD大鼠35只,随机分为对照组(n=5)、油酸组(n=15)、油酸+硫氢化钠(NaHS)组(n=15).油酸组大鼠尾静脉注射油酸0.1 mL/kg;油酸+NaHS组先腹腔注射NaHS 56 μmol/kg(溶于0.5 mL生理盐水中),30 min后再尾静脉注射油酸0.1 mL/kg.以上两组均分为2、4、6 h三个观察点,每个点5只.对照组大鼠尾静脉注射0.1 mL/kg生理盐水,观察6 h.在观察时间结束后,麻醉大鼠,行支气管肺泡灌洗,灌洗液(BALF)沉渣行瑞士染色进行中性粒细胞(PMN)分类计数;取右肺上叶,计算湿重/干重(W/D)值;用ELISA法检测血浆、肺组织匀浆基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、组织金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)水平;用敏感硫电极法检测H2S水平.结果 与对照组比较,油酸组2、4、6 h PMN显著升高(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组各时间点PMN显著降低(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4、6 h肺W/D值显著升高(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组4、6 h肺W/D值显著降低(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4、6 h血浆、肺组织匀浆H2S水平显著降低(P均<0.01);与油酸组比较,油酸+NaHS组血浆、肺组织匀浆H2S水平4、6 h显著升高(P均<0.05).与对照组比较,油酸组2、4 h血浆、肺组织匀浆及6 h血浆MMP-9水平显著升高(P均<0.05);与油酸组比较,油酸+NaHS组4 h 血浆MMP-9水平显著降低(P<0.05),2、6 h血浆、肺组织匀浆及 4 h 肺组织匀浆MMP-9水平降低,但差异无统计学意义(P均>0.05).与对照组比较,油酸组4 h 血浆、肺组织匀浆及6 h肺组织匀浆TIMP-1水平显著降低(P均<0.05);与油酸组比较,油酸+NaHS组2、4、6 h血浆、肺组织匀浆TIMP-1水平升高,但差异无统计学意义(P均>0.05).结论 外源性H2S可能通过调节肺组织MMP-9和TIMP-1水平的变化,发挥对油酸诱导大鼠ALI 的细胞外基质的调节作用.     

iRNA沉默Chk1基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响及其作用机制的探讨

目的 探讨siRNA沉默检测点激酶1（Chk1）基因对乳腺癌细胞MCF 7增殖和周期的影响及其作用机制。方法 采用RNAi技术将乳腺癌细胞MCF 7中Chk1基因沉默,用Western blotting检测转染前后MCF 7细胞中Chk1蛋白表达情况;采用MTT比色法和流式细胞术分析Chk1基因沉默对乳腺癌细胞MCF 7增殖和周期的影响。结果 Chk1 siRNA转染后,MCF-7细胞中Chk1蛋白表达下降约82％,明显低于未转染组和脂质体转染组（P＜0.05）。Chk1 siRNA转染组转染48h的MCF-7细胞增殖活性下降,其增殖抑制率为44.7％,明显高于脂质体转染组的5.26% （P＜0.05）。流式细胞仪检测显示,Chk1 siRNA转染组G2／M期比例为（11.3±0.7）％,明显低于未转染组（44.2±1.9）％和脂质体转染组（45.3±2.1）％,差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论 siRNA沉默Chk1基因可明显抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖,并且其抑制增殖作用与减弱G2／M期阻滞有关。     

HPLC法测定银翘解毒颗粒中连翘苷和牛蒡子苷的含量

目的：建立以RP-HPLC法测定银翘解毒颗粒中连翘苷和牛蒡子苷含量的方法。方法：采用Agilent C18（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱,流动相：乙腈-水（27：73）,检测波长：280nm,柱温：30℃,流速：1．0ml／min。结果：连翘苷在0．02142～0．10710μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为99．93％,RSD为0．71％;牛蒡子苷在0．8368-6．6940μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为99．75％,RSD为0．44％。3批样品中连翘苷和牛蒡子苷的含量分别为0．04318、1．07300mg]g;0．04306、1．07000mg／g;0．04310、1．07100mg／g。结论：本法灵敏、准确,专属性强,重现性好,可作为银翘解毒颗粒中连翘苷和牛蒡子苷的含量测定方法。     

高效液相色谱串联质谱法分析菊花水提取液的化学成分

目的采用高效液相色谱串联质谱法分析菊花水提取液的化学成分。方法采用水为溶剂加热回流提取法提取菊花药材,提取液采用高效液相色谱串联质谱法对其主要的化学成分进行分离和鉴定。结果通过高效液相色谱可将20个主要的化学成分较好的分离,其中13个通过串联质谱进行了结构鉴定,8个通过对照品得到了确证。结论高效液相色谱串联质谱法快速、准确,可用于菊花药材的化学成分鉴定。     

黄体生成素细胞在摩杂一代水牛垂体内的免疫组织化学定位

黄体生成素(luteinizing hormone, LH)是动物腺垂体前叶促性腺激素细胞合成和分泌的一种糖蛋白类促性腺激素,它是LH分泌细胞受下丘脑脉冲式释放的促性腺激素释放激素(gonadotrophin releasing hormone, GnRH)刺激后合成分泌的~[1],在动物的性腺发生发育和繁殖过程中起着重要作用.     

青蒿素及其衍生物用于治疗新型冠状病毒肺炎的探讨

自2019年12月武汉首次出现新型冠状病毒肺炎（COVID-19），越来越多人被确诊，已经扩散到了中国各地和境外多个国家。由于尚没有特效药，很多已被批准的"老药"被用于COVID-19的临床治疗中。青蒿素是世界卫生组织推荐的一线抗疟药物，研究发现其还具有抗炎、免疫调节、抗肺纤维化、抗菌、抗病毒、心血管作用等多种药理作用。综述了青蒿素及其衍生物抗COVID-19相关的药理作用及其作用机制，以挖掘其潜在的药用价值，重点探讨了其用于治疗COVID-19的可行性，为发掘有效的治疗药物提供参考。     

血管内皮细胞生长因子基因治疗严重肢体缺血

观察缺血肢体肌肉内注射编码血管内皮细胞生长因子的裸露质粒的安全性、可行性及有效性。对3例（4条肢体）严重肢体缺血患者和肢体缺血部位随机选择4个位点,注射编码血管内皮细胞生长因子165的真核表达质粒pUC-CAGGS/h血管内皮细胞生长因子1654mg,每两周注射一次。肌肉内注射裸露质粒后每天观察患者的临床情况。治疗后1－3个月重复血管造影以观察有无新生血管的形成。结果发现缺血性溃疡愈合成明显改善,静息性疼痛缓解,血管造影发现有新生血管形成和侧枝循环的建立。所有患者均在治疗后出现一过性下肢水肿,一周内自然消退,水肿的出现与血管内皮细胞生长因子增加血管通透性相一致。结果提示,肌肉内注射编码血管内皮细胞生长因子165的裸露质粒DNA可诱导严重肢体缺血患者的治疗性血管生成,是一种安全有效的治疗肢体缺血的方法。     

HPLC测定柚寄生中槲皮素的含量

目的测定寄生于柚子树上的桑寄生中槲皮素的含量。方法采用高效液相色谱法（HPLC法）测定槲皮素含量,并进行方法学考察。色谱条件为：C18色谱柱（5μm,4．6mm×250mm）,流动相为甲醇-0．5％磷酸（43：57）,流速为1．0mL／min,检测波长为372nm,柱温30℃。结果槲皮素在0．06～1．32¨g范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率为98．89％,RSD=2．66％（n=6）;柚寄生中槲皮素的含量为0．28mg／g。结论本测定方法灵敏度高,重复性好,可作为柚寄生中槲皮素的含量测定方法,对柚寄生的质量控制具有参考价值。     

金沙藤石油醚部位化学成分的气相色谱-质谱联斥分析

目的对金沙藤石油醚部位的低极性成分进行分析。方法采用石油醚萃取金沙藤药材总提液中的低极性成分,气相色谱-质谱法分析,面积归一化法测定各组分的相对含量。结果在最佳的分析条件下,经毛细管色谱柱分离,共得到了36个成分,经谱库检索确认了其中的25种成分,占总组分的96．09％。金沙藤石油醚部位中的低极性成分主要为植物甾醇、长链脂肪酸及其酯类。结论本方法具有快速、准确的特点,可有效用于金沙藤药材成分的分析鉴定。     

基于UPLC-Q-TOF/MSE分析不同炮制时间炒车前子的化学成分变化规律

目的:为探究不同炮制时间炒车前子化学成分变化情况,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱法(UPLCQ-TOF/MSE)对不同炒制时间炒车前子中差异成分进行快速鉴定和半定量分析。方法:色谱条件采用Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~1 min,5%~10%B;1~2 min,10%~15%B;2~10 min,15%~20%B;10~12 min,20%~40%B;12~13 min,40%~100%B;13~14 min,100%~5%B;14~15 min,5%B),流速0.3 mL·min^-1,柱温40℃,进样量3μL。质谱分析使用电喷雾离子源(ESI),正、负离子模式检测,扫描范围为m/z50~1500。采用MarkerLynx 4.1软件挖掘差异化合物,比较不同炒制时间样品各离子峰的离子响应强度,研究化学成分含量变化情况。结果:共找到具有潜在的显著性差异成分20个,其中17个成分已鉴定,3个成分未知,主要包括苯乙醇苷类、环烯醚萜苷类、生物碱类等。炮制后蔗糖、京尼平苷酸、毛蕊花糖苷、车前素A等7个成分峰强度降低;orobanchoside,dianthoside和车前草苷D峰强度在炒制过程中先升高后降低;去咖啡酰基毛蕊花糖苷,木通苯乙醇苷A,异毛蕊花糖苷等10个成分峰强度升高,其中9个为新生成成分。结论:炒制后,炒车前子化学成分的含量和组成均发生了显著变化,这可能与车前子炒制后通便作用减弱、止泻利尿活性增强有关。