基于转录组测序技术研究道地药材当归同源基因

目的:通过转录组测序技术全方位、深层次挖掘甘肃岷县当归的基因组资源,并进行当归同源基因分析,为当归栽培、品种鉴定、加工、配伍及保健品开发提供理论支撑。方法:岷县现场采集当归样品,并经专家鉴定为当归品种(angelica sinensis(oliv.)diels)。采用RNA plant Plus方法提取岷归头、岷归尾的总RNA,质量鉴定合格后构建测序文库。测序文库检测合格后在Illummina HiSeq 2000测序仪上完成双端测序。采用相关生物信息学分析软件,实现研究目标。结果:①通过转录组测序技术,获取了63585个当归表达序列标签(EST),构建了当归的基因组。②在UniProt(date:2012.09)数据库中注释的30432个当归基因,分布于939种物种;其中序列分布频率较高的前5种物种为葡萄、蓖麻、毛果杨、大豆、苜蓿属。结论:当归基因组研究处于起步阶段,亟待深入研究。已注释基因主要分布于目前研究较深入的5种重要经济植物,成为当归制剂与保健品开发的分子生物学基础。     

一个家系虚寒证的基因表达谱研究

目的研究虚寒证的差异基因表达谱。方法选择1个家系虚寒证进行基因芯片实验,并通过GO、KEGG、BioCarta等数据库对结果进行信息挖掘。结果获得差异基因表达谱79条,其中GO数据库能登陆的有23条,通过KEGG、BioCarta信息挖掘发现与15条通路相关。结论从家系角度开展中医证候研究具有积极意义,虚寒证以代谢基因表达异常为主体,同时也影响了代谢通路。     

应用基因表达谱芯片技术筛选老龄肾阳虚证特征功能类基因

目的:利用基因芯片技术探讨肾阳虚证发生的特征功能基因集。方法:在老龄肾阳虚证流行病学调查过程中,筛选出典型肾阳虚证患者2例和正常对照2例,采用美国Affymetrix公司的HG-u133Plus2.0基因表达谱芯片,按一步法抽提总RNA,分离纯化两种样品的mRNA,经逆转录合成掺入生物素标记的cDNA合成探针,与芯片杂交和严格洗片后,用荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图像,获得肾阳虚患者差异表达基因。结果:两例患者和正常人比较获得680和503条差异表达基因,通过g:GOSt基因芯片数据分析平台进行基因功能分类,发现免疫反应功能类基因出现显著性。结论:肾阳虚证的发生与免疫反应功能类基因的异常表达密切相关。     

肾阳虚证辨证诊断标准的专家评价

证候诊断的客观化、标准化一直是制约中医药学科发展的瓶颈。在长期开展肾阳虚证定性和半定量化诊断的理论和临床研究的基础上,向全国23所中医药院校的中医诊断学专家发出了调查咨询,经统计、分析,重新确认了肾阳虚证在临床最常见的33个辨证因子,较以前的肾阳虚证诊断标准更为简便,具有更强的可操作性,同时结合专家意见对证候诊断中的疑惑和困扰提出了新的见解。     

中医“治则”理论在炮制中的运用探赜

中医与中药关系紧密,中药的运用是在中医理论的指导下进行的,中药炮制亦不能脱离中医理论的指导。基于中医“从治逆治”“燮理升降”“扶正祛邪”等基本治则的启迪,提出从逆炮制、升降炮制、扶正祛邪炮制等基本“制则”。从制可使药性“寒者益寒,热者益热”,加强疗效;逆制可改变药性,扩大功效,减轻副作用;升降炮制可改变药物作用趋势,扶正祛邪炮制针对毒性药材,可纠正药物的偏性、缓和药性,具有双向调节作用。将中医理论运用到中药炮制中,更能拓宽炮制思路,突破现有的炮制品种,进行炮制创新。     

家系病证结合双生子研究范例

目的通过分析有血瘀证表现的双生子的中医证候量表及西医理化指标,来探讨血瘀证证候的先天(遗传)影响程度,辨析血瘀证形成的环境因素,为最终研究血瘀证的分子生物学基础做铺垫。方法对双生子进行卵型鉴别,并采用血瘀证量表和四诊量表对胸痹家系的12个成员进行评分,并对家系中的一对双生子进行西医学检测。结果家系中有16例判断为胸痹,疑为冠心病,有血瘀证倾向,其中该对双生子初步判断为同卵双生,后来通过心电图、心肌灌注显像等检查,最终确诊为冠心病血瘀证。结论用双生子作冠心病血瘀证证候研究是绝好的天然模型。     

“法随证立”的中药煎服法探讨

选取《伤寒论》《金匮要略》《温病条辨》中经典条文和吴棹仙、徐大椿验案,梳理中药煎服法的方法和原理,提出中药煎服法应法随证立,认为历代名家以中医病机病位立意,煎服法因证而设,切中病机实质,从而提高临床疗效。     

从雾霾与重症急性呼吸综合征致病特点推测温霾发病条件及其特征

雾霾与重症急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome,SARS)虽属性不同,但都与气候关系密切,且二者致病皆以呼吸道症状为主要临床表现。本文通过比较分析雾霾与SARS致病特点,推测雾霾联合异常温热气候可能导致的新型烈性传染性疾病"温霾"的发病条件与发病特征,并提出相关的预警和应对措施,以期为中医防控新型传染性疾病提供参考,同时也为气候和环境因素联合致病开辟新的中医思路。     

家族性肾阳虚寒证与糖、蛋白、脂质代谢相关性探讨

目的　通过对一个典型肾阳虚家系证候及其物质代谢相关性的研究 ,深入对肾阳虚家系的认识。方法对一个 4代 2 8人的肾阳虚证家系成员进行糖代谢、蛋白质代谢、脂代谢等临床血液学检查 ,并通过使用相应肾阳虚证量表将家系成员分为肾阳虚患者与正常人 ,然后统计分析两者间的差异。结果　家系中肾阳虚患者与正常人之间在糖、蛋白质、脂类代谢上无统计学差异 ;肾阳虚家系成员葡萄糖含量普遍偏低。结论　肾阳虚证在临床血液学常规指标检查方面意义不明显 ,至多可归结为体质偏颇或亚健康状态。虚寒性的表现可能与能量代谢偏低有关。     

从不同适用范围的证候描述看肾阳虚证的多重属性

通过对教学、科研、临床的三类不同适用范围的肾阳虚证候描述进行比较分析,探讨了肾阳虚证候认识的层次及其各自特点,并论述了肾阳虚证具有基础性、复杂性、理论性和概括性的多重属性,提出有必要进行深入细化的辨证分型,以完善的肾阳虚辨证体系.