GM—CSF基因修饰的肿瘤细胞疫苗对荷瘤小鼠的抗肿瘤作用

目的研究GM-CSF基因修饰的肿瘤细胞作为瘤苗的可行性.方法通过逆转录病毒载体,将小鼠GM-CSF基因导入EL-4淋巴瘤细胞中,研究EL-4/GM-CSF在同系C57BL/6小鼠中的成瘤性及其诱导抗肿瘤免疫的效果.结果EL-4/GM-CSF细胞在小鼠中的成瘤性下降,50%小鼠无瘤生存.射线灭活的EL-4/GM-CSF瘤苗能有效地保护野生型肿瘤细胞的攻击,在肿瘤生长的早期对实验性荷瘤小鼠进行治疗,能延长荷瘤宿主的存活时间(33.1±1.8)与对照组EL-4/Wt(23.2±1.5天)比差异有显著性(P＜0.01).基因修饰的瘤苗作用明显增强.结论GM-CSF基因修饰的肿瘤疫苗可诱导较强的抗肿瘤免疫反应,导致肿瘤的部分根除,本实验为基因修饰的肿瘤疫苗的临床应用提出了一定的实验依据.     

肿瘤生物治疗新方法的研究

目前肿瘤基因治疗的研究已经取得了一定的进展,已从实验室基础研究阶段发展到临床应用阶段。在临床应用研究上大致可分为免疫基因治疗;耐药基因治疗;自杀基因治疗;肿瘤抑制基因治疗及基因标记示踪等。“九五”期间,我国把“肿瘤生物治疗等新方法研究”列为攻关课题。该项目的研究目标是以腺病毒为载体,将目的基因TNF－a、IL－2及匕等基因导人肝癌及肺癌细胞,及将目的基因TNFa、ILZ基因导人A－LAK细胞,有效地扩增导人目的基因的A－LAK细胞。通过体内外实验研究确定其临床应用的可行性及安全性。在此基础上,争取国家药政部门…     

壳寡糖协同双歧杆菌对荷瘤鼠免疫功能的影响

背景与目的:建立H22肝癌荷瘤鼠实验动物模型,研究壳寡糖协同双歧杆菌对荷瘤鼠免疫功能的影响.材料与方法:采用体内注射的方法将壳寡糖和双歧杆菌注入荷瘤小鼠体内,观察肿瘤生长情况,并进行免疫功能的测定,及观察肿瘤病理变化.结果:壳寡糖协同双歧杆菌对肿瘤的生长有抑制作用,可提高荷瘤小鼠血清的IL-2和INF-γ含量,增加荷瘤小鼠免疫器官脾脏和胸腺的重量,显微镜下观察显示肿瘤组织出现坏死.结论:壳寡糖协同双歧杆菌可抑制肿瘤生长,提高机体免疫功能,促使肿瘤细胞坏死.     

肺癌生物治疗中应用自体NK细胞治疗的现状及展望

肺癌根据其生物学特征和治疗方法不同,分为小细胞肺癌和非小细胞肺癌,是现今严重危害人类健康和生命的恶性肿瘤之一.每年因为肺癌死亡的患者居世界多数国家癌症死亡之首,目前治疗肺癌的主要手段(手术、化学治疗及放射治疗)尚不能有效控制其病情的进展且上述治疗常伴有严重的不良反应,损害患者的生活质量,其总体预后差,患者5年生存率＜15％.由此,迫切需要新的治疗方法     

人类TAP2基因克隆及真核表达质粒的构建

目的 克隆抗原处理相关转运体亚基TAP2基因片段并构建真核表达载体。方法 从EB病毒刺激的人B淋巴母细胞系(B-LCL)中提取总RNA,用RT-PCR从中扩增出TAP2 cDNA。将TAP2 cDNA插入表达载体pcDNA3．1／VS-His-TOPO中,构建重组表达载体pcDNA3．1／V5-His-TOPO-TAP2,并进行测序分析。结果 经RT-PCR和测序鉴定,成功地克隆了人TAP2 cDNA。结论 获得了人TAP2 cDNA并构建了重组真核表达载体,对TAP2基因产物在体外表达、进一步研究TAP2分子在肿瘤基因治疗方面的作用具有重要的意义。     

TAP基因转染提高其在肿瘤细胞系的表达

目的　筛选TAP1、TAP2表达下调的肿瘤细胞系 ,将TAP1、TAP2基因分别转染其表达下调的肿瘤细胞系 ,检测基因转染后的mRNA表达水平。方法　用RT -PCR方法检测肺腺癌细胞系Anip 973,AGZY83a ,LH - 7,BE - 1,胃癌细胞系BGC - 82 3TAP1及TAP2mRNA水平 ,筛选TAP1、TAP2表达下调的肿瘤细胞系。用脂质体法 (LipofectaminTM2 0 0 0 )将TAP1、TAP2分别转染人肺腺癌细胞系Anip 973,经G4 18筛选 4～ 6周 ,通过RT -PCR检测TAP1及TAP2的表达。结果　Anip 973,AGZY 83a细胞TAP1、TAP2mRNA表达下调 ,LH - 7,BE - 1TAP1PCR产物均为 2条带 ,BE - 1TAP 2mRNA表达下调 ,而LH - 7与B细胞相同。转染后的Anip 973细胞TAP1、TAP2的mRNA表达明显增加。结论　基因转染可恢复肿瘤细胞TAP1及TAP2的表达 ,为增强MHCⅠ类分子提呈肿瘤抗原奠定了基础     

阿苯达唑及黄芪对肝吸虫病大鼠红细胞免疫功能的影响

目的 观察药物阿苯达唑联合中药黄芪对肝吸虫感染大鼠的治疗效果并探讨其作用机制。方法 取健康成年Wistar大鼠32只,随机分为对照组、感染组、阿苯达唑治疗组和阿苯达唑联合黄芪治疗组,每组8只大鼠。对肝吸虫病大鼠感染及治疗前后红细胞C3b受体花环率（RBC-C3bRR）,红细胞免疫复合物花环率（RBC-ICR）,血清红细胞免疫促进因子（RFER）和红细胞免疫抑制因子（RFIR）活性进行检测。结果 大鼠感染肝吸虫后RBC-C3bRR和RFER水平下降,RBC-ICR和RFIR水平升高,与正常对照组比较,差异有统计学意义。经阿苯达唑及黄芪治疗后,肝吸虫病大鼠RBC-C3bRR和RFER水平升高,RBC-ICR和RFIR水平下降,与感染组比较差异有统计学意义;与阿苯达唑单独治疗组比较,阿苯达唑联合黄芪治疗肝吸虫病的效果更显著。结论 红细胞免疫功能在肝吸虫病大鼠致病过程中具有重要的作用,药物阿苯达唑和黄芪对肝吸虫病大鼠具有较好的疗效,中药黄芪对红细胞免疫具有调节作用。     

胚胎肺和正常肺组织基因表达谱差异

背景与目的:利用基因芯片技术研究胚胎肺和正常肺组织基因表达谱差异,筛选出人肺在发育过程中基因的变化.材料与方法:分别抽取胚胎肺组织和正常肺组织的总RNA并纯化mRNA,用逆转录的方法,将各mRNA的两种荧光cy5和cy3标记的cDNA链做探针,并与含有1 152条人类全长基因芯片上进行杂交.以ScanArray4000荧光扫描仪扫描芯片上两种荧光信号,用计算机处理和分析.结果:胚胎肺和正常肺组织比较差异2倍以上基因共有317条,其中193条表达增加,124条表达降低.结论:胚胎肺和正常肺组织之间存在有基因差异,初步证明人肺组织在发育过程中受环境影响.     

B7-H4与肿瘤关系的研究进展

T细胞介导的免疫应答在肿瘤免疫中起到重要作用,而T细胞的活化过程又依赖于双信号和细胞因子,其中活化的第二信号来自协同刺激分子,协同刺激分子中B7/CD28家族成员在肿瘤免疫中发挥着重要作用.B7家族新成员B7-H4是T淋巴细胞免疫应答的负性调控因子,可抑制T细胞的增殖和细胞因子的产生,其与肿瘤的发生发展有着重要的关系,可作为肿瘤诊断和治疗的新靶点.     

导入TAP基因上调其在肺腺癌细胞系的表达

目的　克隆TAP1及TAP2基因 ,分别转染TAP1及TAP2表达下调的人肺腺癌细胞系Anip973,以提高其表达水平 ,从而增强肿瘤细胞的抗原提呈能力。方法　采用RT PCR方法自EBV刺激的B LCLs克隆TAP1及TAP2基因 ,与pcDNA3.1 V5 His TOPOTAExpressionvector连接 ,构建真核细胞表达载体 ,脂质体法 (LipofectamineTM2 0 0 0 )转染人肺腺癌细胞系Anip973,经G4 1 8筛选 4～ 6周 ,通过RT PCR检测TAP1及TAP2的表达。结果　经测序确认已成功克隆人TAP1及TAP2基因 ,建立稳定表达TAP1或TAP2的细胞系 ,经RT PCR分析 ,Anip973细胞TAP1、TAP2的mRNA表达明显增加。结论　基因转染可恢复肿瘤细胞TAP1及TAP2的表达 ,为增强MHCⅠ类分子提呈肿瘤抗原奠定了基础