应用FISH及细胞遗传学技术检测101例浆细胞疾病的基因异常

目的：探讨荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)、意义未明单克隆免疫球蛋白增多症(monoclonal gammopathy of undetermined significance,MGUS)及反应性浆细胞增多症(reactive plasmacytosis,RP)的几种常见的异常基因,提高对几种常见浆细胞疾病的诊断及鉴别诊断水平。 方法：回顾性分析2012年8月至2015年8月在中南大学湘雅医院初诊的61例MM、20例MGUS及20例RP患者的临床表现、影像学、实验室检查及FISH检测结果。结果： FISH检测61例MM患者中50例患者出现基因异常,FISH阳性检出率为81.9%,其中1q21扩增19例(31.1%)、D13S319缺失18例(29.5%)、RB1缺失10例(16.4%)、IGH易位10例(16.4%)、p53缺失7例(11.4%),出现两种或多种基因异常的阳性率为12例(19.8%);20例MGUS中FISH阳性检出率为30%,其中1q21扩增4例(20%)、IGH易位2例(10%),未发现两种或多种基因异常;而RP患者仅1例出现D13S319缺失,阳性率仅为5%。三组两两比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论：MM患者中FISH的阳性检出率为81.9%,明显高于MGUS及RP的患者,应用FISH可检测MM中的多种异常基因,对MM,MGUS及RP的鉴别诊断、预后判断有重要的临床参考 价值。     

EB病毒编码的microRNAs参与肿瘤的发生和发展

EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)是一种明确的致瘤性病毒,与鼻咽癌、胃癌、淋巴瘤等多种肿瘤的发生和发展密切相关.EBV共编码44种成熟的微RNA(microRNAs,miRNAs),可调节病毒自身和宿主基因的表达.EBV编码的miRNAs(Epstein-Barr virus-encoded mi...     

氨氯地平对造影剂致人肾小管上皮细胞毒性的保护作用

目的:从细胞分子水平探讨氨氯地平对造影剂(泛影葡胺)致人肾小管上皮细胞毒性的保护作用及其机制.方法:选择人肾小管上皮细胞株(human kidney cell,HKC)为研究对象,实验分为4组,即模型组(泛影葡胺111 g/L)、预防组(泛影葡胺111 g/L 氨氯地平10-5 mol/L)、氨氯地平对照组(氨氯地平10-5 mol/L)和培养基对照组(单纯无血清DMEM-F12培养基),采用四甲基偶氮唑盐试验和细胞培养上清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)测定泛影葡胺对HKC细胞毒性,采用Hochest33258荧光染色和流式细胞仪DNA分析观察泛影葡胺诱导的肾小管上皮细胞凋亡.采用Western blot和免疫荧光法检测凋亡调控基因Bax的蛋白表达,采用荧光比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)活性.结果:与模型组相比,预防组细胞活力明显增高,细胞培养上清中LDH浓度明显减低,细胞凋亡率显著降低,Bas蛋白表达下调,caspase-3活性降低.结论:氨氯地平可显著减轻泛影葡胺所致的肾小管上皮细胞损伤,对泛影葡胺诱导的肾小管上皮细胞凋亡有保护作用,其机制可能为通过Bas和caspase-3介导调控造影剂诱导的肾小管上皮细胞凋亡.     

活性基因在高等生物基因组中的定位研究

活性转录的基因具有对微量DNase-1消化敏感的特性。近年的研究证明,通过DNase-1敏感区在有丝分裂中期染色体上的定位可以了解活性基因在细胞基因组中的分布。本文系统阐述了DNase-1敏感区在中期染色体上定位的三种染色体原位缺口平移方法、原位缺口平移的染色体部位的生物学和生物化学性质以及DNase-1消化DNA的作用机理。从而证实染色体原位缺口平移方法是进行活性基因在高等生物基因组中定位研究的有效途径。     

DNase-1敏感区在人类有丝分裂中期染色体上的定位研究

1985年4月一1992年4月，在国家自然科学基金等资助下，湖南医科大学肿瘤研究所研究了脱氧核糖核酸酶（DNase－l）敏感区（活性基因区）在人类有丝分裂中期染色体上的定位。1．运用姊妹染色单体互换技术的基本原理及碱性复红具有与BalU替代性DNA极大亲和力的特性，建立了可用于活性基因区或DNase一亚敏感区在人中期染色体上定位的BrdU完全替代的染色体原位切口移位的B带技术。2．系统阐明了B带技术显带机理，即原位切口移位的染色体的不同部位对碱性复红的亲和力有明显不同。3．详述人淋巴细胞基因组全套染色体的B带图谱，证实B带是一…     

瘤基因—八十年代对恶性肿瘤病因学研究的重大突破

瘤基因的发现和研究为打开肿瘤病因学的迷宫开创了崭新的局面,使恶性肿瘤的病因理论研究发生了巨大的飞跃。国内外肿瘤分子生物学家对这一重大科研成果的出现给予了极高的评价,预言“瘤基因的发现已使病毒致癌理论从浪漫的时代进入了科学的时代,”“1981年和1982年将成为肿瘤研究的伟大历史里程碑。”     

Burkitt淋巴瘤基因组中DNase-1酶切敏感区在中期染色体上的定位

同本室首次建立的在Brdu替代4个细胞周期以上的中期相染色体上进行染色体原位切口移位的方法,研究了Burkitt淋巴瘤基因组中DNase-1酶切敏感     

一种检测活性基因的人中期染色体原位缺口转译新方法

在固定的有丝分裂中期染色体上进行原位缺口转译以研究DNaseⅠ敏感区在染色体上分布的技术,是近年细胞遗传学与分子物学领域中的重要进展之一。1982年Gazit等用放射性同位素标记的dTTP首先将缺口转译法用于研究人纤维母细胞染