人鼻咽癌相关的转化基因Tx转录活化机制研究

采用ＤＮａｓｅⅠ超敏区分析法寻找Ｔｘ２．８ｋｂＥｃｏＲＩ片段的转录活化位点，以期探索Ｔｘ基因在鼻咽癌发病过程中的作用。结果未发现在此片段中有ＤＮａｓｅⅠ超敏区位点。提示与ＩｇκＣ同源的Ｔｘ２．８ｋｂＥｃｏＲＩ片段可能采用免疫球蛋白基因所独有的基因调控方式，而与瘤基因的一般转录活化方式明显不同。     

EB病毒DNA整合与细胞癌变

EB病毒感染与Burkitt淋巴瘤、鼻咽癌的发生发展密切相关。EBVDNA与细胞基因组DNA整合后可导致一些与细胞生长、肿瘤形成有关的重要基因表达异常,促进细胞恶性转化。研究病毒整合的方法主要有荧光原位杂交(FISH),Southernblot,多聚酶链反应(PCR)和反向PCR(IPCR),构建细胞或组织基因组文库并筛选阳性克隆等。     

NGX6基因联用5-Fu对人结肠癌细胞凋亡的影响

目的:探讨候选抑瘤基因NGX6联用5-Fu对结肠癌细胞凋亡的影响.方法:以稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞与5-Fu联用作为实验组.以PDTC与5-Fu联用的HT-29细胞作为对照组.通过EMSA检测各组结肠癌HT-29细胞核转录因子-κB(NF-κB)的激活情况,利用MTT比色法检测各组细胞增殖的情况.吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB)双染法显微镜观测以及PI/Annexin-V双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况.结果:稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞以及应用了PDTC的HT-29细胞NF-κB的激活均明显受到抑制;与5-Fu作用的HT-29细胞组比较,5-Fu联合PDTC作用于HT-29细胞后,HT-29细胞增殖受到明显抑制,5-Fu诱导HT-29细胞凋亡作用增强;与5-Fu联合PDTC作用于HT-29细胞的对照组比较,在诱导细胞凋亡以及抑制细胞增殖方面,稳定转染并表达NGX6基因的HT-29细胞与5-Fu联用组和对照组所取得一致的效果,NGX6基因增强5-Fu对HT-29细胞增殖抑制的能力及诱导HT-29细胞凋亡的能力.结论:NGX6基因抑制了肿瘤细胞NF-κB的激活,具有增强5-Fu诱导结肠癌细胞凋亡的能力,其机制可能是抑制肿瘤细胞NF-κB的激活,NGX6基因对肿瘤的治疗及预后起积极作用.     

姐妹染色单体互换与鼻咽癌

姐妹染色色单体互换(SCE)是一个反映哺乳动物细胞DNA损伤与基因组不稳定的遗传指标。本文详细研究了鼻咽癌细胞、鼻咽癌患者淋巴细胞、新生儿脐胎血淋巴细胞的SCE频率;系统考察了化学致癌物、EB病毒与遗传易感性对鼻咽癌患者淋巴细胞和鼻咽癌细胞基因组稳定性的影响。我们发现不管是鼻咽     

染色体脆弱部位、癌基因位点与人类恶性肿瘤

大多数人类恶性肿瘤细胞都存在染色体异常。尽管目前对恶性肿瘤细胞染色体异常的机制尚不十分清楚,但许多不同类型恶性肿瘤的细胞遗传学和分子生物学的研究业已证明染色体异常与恶性肿瘤有明显的相关性。近年来,由于染色体高分辨显带技术的发展,已使人们能够准确地识别恶性肿瘤相关性染色体畸变位     

NAG14基因结构域蛋白的原核表达

基因组测序完成在即 , 运用已有的基因数据库 , 人们已经克隆了大量与人类重大疾病和肿瘤 相关的基因 . 结构基因组研究的深入 , 要求进一步分析新克隆基因的功能以及其结构与功能 之间的关系 . 我们应用定位-候选克隆策略结合生物信息学手段筛选与鼻咽癌负相关的 EST(Expressed Sequence Tags), cDNA克隆测序和 5′ RACE扩增获取候选 EST的 cDNA序列 , 已 克隆到一个新基因 NAG14 (GenBank登录号 : AF196976), 该基因在鼻咽癌细胞株 HNE1和 75% 活 检组织表达缺失或下调 [1]. 结构域是蛋白质在一级结构和三级结构之间的结构单位 , 也是生 物大分子生物功能的结构单位 [2]. 通过对蛋白质结构域的分析 , 并分离结构域 , 对分离的结 构域的结构和功能进行研究 , 可以对蛋白质功能有一个更为深入的结构层次的了解 . 为了解 NAG14基因所编码蛋白质的功能 , 我们用多聚酶链式反应 (PCR)方法分离出 NAG14基因的亮氨酸 重复区 ( leucine repeat pegion, LRR) 结构和 IgC2 结构域蛋白编码区序列 , 构建 LRR结构 域和 IgC2结构域的原核表达载体 , 在大肠杆菌中诱导这两个结构域蛋白的表达 , 为进一步制 备抗 NAG14基因蛋白的多克隆抗体和 NAG14基因功能研究打下基础 .     

一种检测活性基因与失活基因的人中期染色体原位切口移位新方法

本文发展了一种在Brdu完全替代的中期染色体上检测活性基基与失活基因区的原位切口移位新方法。结果证实,染色体原位切口移位的最适温度、时间与DNase—1浓度分别为20℃、15min和2.0ng/ml。由该方法揭示的染色体带型是一种与G带、R带有重大差异的新带。本研究证明,DNase—1敏感带相当于D深带或G浅带,可用于染色体结构与功能、基因表达等方面的研究。     

医学生临床技能结构成绩评价与分析

本文提出的结构成绩是出科考核、中期临床教学质量评估、毕业理论综合考试三阶段考核按一定比例结构而成的一种医学生临床技能评价方案,而各阶段考核又由技能知识、技能操作及个性品德、态度和交往技能三部分按一定比例结构而成.通过对中南大学湘雅医学院94级五年制临床医学专业随机抽取的80名医学生的结构成绩统计分析的结果显示,构建的评价方案是一种较科学、客观、有效及可操作的医学生临床技能评价模式.     

MiRNA基因及miRNA相关基因单核苷酸多态性与肿瘤易感性

MircoRNAs（miRNAs）是一类进化上高度保守的重要的转录后调控因子,通过调节基因的表达而参与调控细胞死亡、增殖及分化等生理过程,同时与肿瘤等疾病的发生、发展密切相关。随着miRNAs基因以及靶基因结合位点的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism,SNP）和miRNA相关基因SNP的生物预测和筛选技术的不断成熟,以及下一代测序技术在肿瘤基因组研究中的广泛应用,将发现大量新的miRNAs基因的SNP位点,这些miRNAs基因以及靶基因结合位点的SNP和miRNA相关基因的SNP与肿瘤等复杂疾病的易感及预后密切相关,通过检测miRNAs基因SNP或靶基因结合位点SNP或miRNA相关基因的SNP位点,即可进行肿瘤发病风险的判断和预后预测。