降钙素原生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附分析法的建立

目的建立生物素一链霉亲和素酶联免疫吸附分析（biotin．streptavidinamplifiedELISA,BA．ELISA）法半定量检测人血清中降钙素原含量。方法通过双抗体夹心法,结合生物素一链霉亲和素系统的放大作用,建立降钙素原的半定量检测方法。并对该试剂的各项性能指标进行评价。结果该方法的最低检测限为0．12mg／mE,线性范围为0．12～20ng／mL,回收率为98．59％。分析内和分析间变异系数分别为4．9％～16．8％和7．1％～14．9％。与降钙素原结构类似物及血清中常见的干扰物质特异性良好。通过对73例血清样本进行检测分析,当阈值为0．5ng／mL时,敏感性和特异性分别为100％和96．0％。结论本研究建立的降钙素原生物素一链霉亲和素酶联免疫吸附分析法具有灵敏、简便、准确等特点,具有良好的应用前景。     

抗凝剂对血沉及血液流变学指标测定的影响

血液流变学指标检测时,血沉(ESR)测定与其他血液流变学指标的测定不共用同一管,ESR测定需单独用枸橼酸钠抗凝管抽血,而其他血液流变学指标测定则用肝素钠抗凝管抽血。这加重了病人的经济及身体负担,同时也对临床护士抽血工作带来不便。为了提高检验效率,减轻病人痛苦和经济负担,我们分别采用肝素钠与枸橼酸钠抗凝作ESR测定,对两者结果及与两者相关的血液流变学其他指标进行比较,探讨用肝素钠1管抗凝代替传统2管抗凝的可能性。现将实验结果报告如下:1材料与方法1.1检测对象随机选取我院门诊就诊患者196例,其中男94例,女102例,年龄22～72…     

小儿嵌顿疝手法复位的技巧

腹外疝以腹股沟斜疝发病率最高,且以右侧多见,嵌顿机会也较多,如不及时复位可致肠坏死、腹膜炎、中毒性休克而致命.手法复位对于远离医院的农村患儿更显的重要.     

辛伐他汀诱导裸鼠体内K562细胞凋亡过程中NF κB通路的分子变化

目的：探讨辛伐他汀在裸鼠体内引起的K562细胞NFκB信号通路的分子变化，以说明辛伐他汀是否依赖NFκB信号通路参与K562细胞凋亡发生。方法:体外培养慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞，接种于18只BALB/cnu/nu裸小鼠皮下，构建移植瘤模型。随机分为3组，每组6只。对照组腹腔注射生理盐水0.2 ml，两个处理组分别注射0.2 g/L的辛伐他汀0.25 ml（0.05 mg）和0.4 ml（0.08 mg）。均隔日注射，连续6次。采用TUNEL法检测K562细胞早期凋亡的变化，RTPCR检测K562细胞中NFκB信号通路IKKβ、IκBα、NFκB1 mRNA的差异表达。结果:不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞发生明显的凋亡，且高剂量组凋亡率高于低剂量组（P<0.01）;不同剂量的辛伐他汀能够引起 IKKβ、IκBα、NFκB1 mRNA的表达下调（P<0.01）。结论:辛伐他汀可诱导K562细胞凋亡，可能与NFκB通路基因的表达下调有关。     

病毒性肝炎联合诊断寡核苷酸芯片的临床应用性研究

目的：制备联合诊断乙型（HBV）、丙型（HCV）、丁型（HDV）肝炎病毒寡核苷酸（Oligo）芯片,并进行系列优化及临床应用性研究。方法：首先利用软件Array designer 3.0对BLAST检索所得的HBV、HCV、HDV种属保守序列逐一分析,设计出60mer Oligo探针。用PixSys5500型基因芯片打印仪将设计好的探针打印到氨基化玻片上制备成基因芯片,并对杂交条件进行系列优化以适应临床血清标本的检测。结果：芯片杂交条件进行优化后,芯片检测的敏感性、特异性都大大增强,还缩短了检测时间;杂交结果显示,Oligo芯片检测HBV、HCV、HDV的敏感性、特异性分别为92.2%,85.7%,91.3%和96.0%,94.5%,98.0%。结论：制备的长链Oligo集合肝炎病毒检测芯片检测敏感性、特异性均佳,为下一阶段进行中试规模的临床血清样品检测做好了准备,同时也为集合更多种、不同亚型肝炎病毒联合检测芯片的制备打下了坚实的基础。     

疟疾诊断靶抗原的研究进展

疟疾是广泛流行于热带、亚热带及温带地区的一种重要虫媒传染病 ,极大地威胁着人类的健康。疟疾的早期诊断和早期正规治疗是 WHO和我国疟疾控制的研究重点 ,其意义在于不仅能够降低重症病人和死亡的发生 ,还能防止其传播 ,延缓疟原虫对抗疟药产生抗性[1 ] 。疟疾流行区由于熟练镜检技术人员及设备缺乏 ,仅依靠传统厚薄血膜镜检法已越来越不能适应当前疟疾诊断的需要[2 ,3 ] 。 2 0世纪 80年代以来随着分子生物学的发展而出现的基因诊断技术 (分子杂交[4] 、PCR[5] 、套式 PCR[6 ] 、荧光定量 PCR[7] 等 ) ,显示了较高的敏感性和特异性 …     

以史释理 以实证理——谈研究式教学法在高职高专思想政治课教学中的运用

从高职高专教学实际出发,论述＂以史释理,以实证理＂的研究式教学法在高职高专思想政治课教学中的运用,并结合教学内容提出例证。     

锌指蛋白ZNF652在乳腺癌组织和细胞中的高表达可促进乳腺癌的发生发展

目的 揭示锌指蛋白ZNF652在乳腺癌组织和细胞中的表达水平及其对乳腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法 利用TCGA数据库挖掘ZNF652在乳腺癌组织与癌旁组织中的表达差异,分析ZNF652的表达与分子分型、病理类型、TNM分级和临床分期等临床病理特征的相关性;RT-qPCR和Western blot鉴定ZNF652在MCF-7、MDA-MB-231、SK-BR-3、UACC-812和BT-474乳腺癌细胞系中的表达;通过慢病毒系统构建稳定表达ZNF652的乳腺癌细胞株,利用siRNA敲低ZNF652的表达;通过CCK-8实验和克隆形成实验分析过表达及敲低ZNF652对乳腺癌细胞增殖和集落形成能力的影响;通过Transwell细胞迁移、侵袭实验以及伤口愈合实验阐明过表达及敲低ZNF652对乳腺癌细胞体外迁移和侵袭的影响;采用免疫荧光实验明确ZNF652的亚细胞定位。结果 ZNF652在乳腺癌组织中表达显著上调（P<0.001）;对于不同乳腺癌分子分型,ZNF652在TNBC型乳腺癌组织中表达下调,而在HER2+型、Luminal A型及Luminal B型乳腺癌组织中表达升高（P<0.01或P<0.001）;除粘液癌外,ZNF652在不同病理类型乳腺癌组织中的表达均较癌旁组织升高（P<0.05）;高表达ZNF652与乳腺癌远处转移、恶性程度显著相关（P<0.01或P<0.001）;ZNF652在5种乳腺癌细胞系中的mRNA和蛋白表达水平均高于正常乳腺细胞（P<0.05或P<0.001）;过表达ZNF652促进乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,而敲低ZNF652后作用相反;ZNF652定位于细胞核。结论 ZNF652在乳腺癌组织和细胞中高表达,促进乳腺癌发生发展,有望作为乳腺癌诊断和治疗的潜在分子靶标。     

HBV多表位复合基因在NS-1细胞的表达

目的 研究HB4颗粒为呈现载体的阳V多表垃复合基因在哺乳动物细胞NS-l内的表达。方法 PCR扩增HBc 1-72aa及93-183aa编码序列并合成HBV多表位复合基因，定向克隆至pcDNA3．1( )。经双酶切及核苷酸序列测定等方法筛选阳性克隆。阳性质粒以Lipofetamine介导转染NS-l细胞，通过ELISA及间接免疫荧光等方法检侧细胞表达产物。结果 双酶切及测序结果证实阳性质粒正确克隆了约890bp的HBc与HBV多表位复合基因的杂合基因。重组于成功转染NS-l细胞并表达HBc-Mep融合蛋白。结论 HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS-l内正确表达目的蛋白。为研究pHBc-Mep作为DNA疫苗的免疫活性奠定基础。为后期检测核酸疫苗pHBcMep的细胞免疫效果提供靶细胞。