3种艰难梭菌感染检测方法的比较

目的 评价3种艰难梭菌感染(CDI)检测方法的诊断效能,为CDI寻找合适的诊断方案.方法 收集中国人民解放军广州总医院2016年5月~12月疑似CDI的腹泻患者粪便标本70例,采用3种方法进行检测:(1)培养法;(2)酶联荧光法检测艰难梭菌毒素A/B(CDAB)和谷氨酸脱氢酶(GDH);(3)q-PCR扩增艰难梭菌特异性基因tpi和毒素基因(tcdA/tcdB).以培养法的检测结果作为参考标准,计算3种方法的诊断指标.结果 收集粪便样本70例,分离艰难梭菌13例(18.57%),其中产毒株6例(8.57%).q-PCR法鉴定tpi基因阳性17例,其敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、诊断符合率分别为92.31%、91.23%、70.59%、98.11%、91.43%,均高于GDH法(84.62%、84.21%、55.00%、96.00%、84.29%)(χ2=24.881,P<0.001),且q-PCR扩增tcdA/tcdB的敏感度(66.67%)优于CDAB(33.33%)(χ2=35.918,P<0.001).结论 CDAB检测和q-PCR法特异性较高,GDH法具有较好的灵敏度,3者均有较高的阴性预测值.与其他检测方法相比,q-PCR法检测CDI具有时效性强,灵敏度高,特异性好等优势,适用于临床推广.     

恶性疟原虫海南株（FCC1／HN）谷氨酸脱氢酶基因的克隆及序列分析

目的 了解恶性疟原虫海南株（FCC1/HN）谷氨酸脱氢酶（GDH）基因全编码区核苷酸序列变异情况。方法 PCR扩增恶性疟原虫海南株（FCC1/HN）GDH基因全编码区,产物经EcoRI SalI酶切后,定向克隆至pGEX-4T-1质粒,采用Sanger双脱氧链末端终止法测序,与其它生物GDH进行同源性分析。结果 成功扩增了恶性疟原虫海南株（FCC1/HN）GDH编码基因,大小为1410bp,无内含子,与Thailand株GDH基因相比,两有2个碱基不同,推导的氨基酸序列完全相同;与蓝氏贾第鞭毛虫,克鲁氏锥虫和梭状芽孢杆菌GDH的同源性分别为57.90%(260/449),56.51%(243/430),42.05%(164/390);与人的GDH-1,GDH-2的同源性分别为29.02%（101/348）,28.73%(100/348)。结论 FCC1/HN株与Thailand株GDH高度同源,疟原虫GDH明显不同于其它生物GDH。     

尼美舒利对人胃癌SGC7901细胞增殖、凋亡及STAT3通路相关蛋白表达的影响研究

目的:探讨选择性环氧化酶2(COX-2)抑制剂尼美舒利抑制胃癌细胞株SGC7901增殖的作用和可能的细胞内信号转导机制.方法:将选择性COX-2抑制剂尼美舒利作用于胃癌细胞株SGC7901,MTY法检测细胞增殖状态;流式细胞仪检测细胞周期及凋亡;Western blot法检测STAT3通路相关蛋白的表达.结果:尼美舒利作用胃癌细胞株SGC7901后细胞增殖受到显著抑制且呈时间、剂量依赖性方式;细胞凋亡百分数增高(P<0.05);G0/G1期细胞比例升高(P<0.05);Western Blot结果显示SGC7901细胞中磷酸化STAT3(P-STAT3)、CyclinDI、Bcl-2蛋白的表达明显降低(P<0.05).结论:尼美舒利可抑制胃癌细胞株SGC7901的增殖,阻滞细胞周期的进展,促进细胞凋亡,其机制可能与抑制STAT3信号通路相关蛋白P-STAT3、CyclinDl、Bcl-2表达有关.     

宏基因组测序在感染性疾病病原体检测中的应用

感染性疾病的致病因素复杂,临床表现多样。快速、全面、准确地鉴别病原体,是临床医生及时、有针对性地采取治疗措施的前提。传统的病原体检测方法目标单一、耗时长、操作复杂,很难满足当今感染性疾病诊治的要求。宏基因组测序技术克服了多数病原体不能培养的弊端,能够准确高效地获得全部病原体遗传物质信息,直接检测出感染性疾病的病原体,对疑难感染性疾病的诊断具有重要参考价值。本文对宏基因组测序在感染性疾病病原体检测中的最新研究进展和应用进行综述。     

广州地区52例传染性非典型肺炎患者血清检测分析

2002年11月16日我国广东省佛山市发现第一例传染性非典型肺炎(严重急性呼吸综合征，SARS)患者，其传播途径主要通过近距离空气飞沫和密切接触传播，传染性极强。本研究采用军事医学科学院微生物流行病研究所从一例北京SARS患者的肺组织中分离的新型冠状病毒感染Vero E6细胞制成抗原片，对2月份收集的广州地区52例SARS患者血清进行了间接免疫荧光检测(IFA)及分析，以期为SARS的实验室诊断提供参考。     

高尔基体蛋白73及其基因检测对原发性肝癌诊断的价值

目的 评价分析GP73和GP73 mRNA在PHC中的诊断价值,探讨血清中GP73和AFP联合检测对PHC诊断和高危人群普查的意义,为PHC诊断和普查提供一种新方法 .方法 采用ELISA对73例PHC、13例肝硬化、32例肝炎和62名健康人的血清GP73、AFP水平进行检测,采用SYBR Green实时荧光定量PCR法检测各组外周血单个核细胞GP73 mRNA的相对表达量,以Ct值比较法计算GP73 mRNA相对表达水平,同时检测分析8份正常肝组织和8份肝癌组织的GP73 mRNA相对表达水平.结果 ELISA检测4组血清GF73、AFP结果 显示,总体比较经Kruskal-Wallis检验,4组间差异有统计学意义(H值分别为89.6、52.0,P均＜0.01),全血GP73 mRNA含量4组间差异无统计学意义(H=4.33,P＞0.05).组间多重比较Mann-Whitney检验结果显示,PHC组血清GP73的含量[166.7(162.7-231.8)μL]与肝硬化[57.3(46.6～113.6)μg/L]、肝炎[29.6(26.2～54.5)μg/L]及健康对照组[25.1(20.8～29.4)μg/L]比较,差异有统计学意义(U值分别为246、297、349,P均＜0.01),各组血清AFP的含量分别为380.9(258.5～ 503.2)μg/L、3.8(1.3～14.5)μg/L、5.1(2.4～7.8)μg/L、2.8(2.2～5.7)μg/L,差异亦有统计学意义(U值分别为246、419、790,P均＜0.01).肝癌组织GP73 mRNA表达量(12.64)显著高于正常肝组织(1.00).以ROC曲线确定诊断PHC的GP73临界值为123.2μg/L和AFP临界值为10.6 μg/L时,PHC组血清GP73、AFP单项检测的敏感度分别为65.8%和53.4%,特异度分别为95.3%和92.5%,两者联合检测的敏感度为79.5%,特异度为90.7%.结论 GP73蛋白对PHC诊断具有较好的敏感度和特异度;全血标本GP73 mRNA检测不能作为诊断PHC的肿瘤标志,肝组织标本GP73 mRNA检测可作为诊断PHC的肿瘤标志,但存在创伤性大、风险大、患者痛苦等缺点.血清GP73联合AFP检测可有效提高PHC诊断,可用于PHC高危人群的普查及筛选.     

乳腺癌组织CBL-B蛋白表达与生物学行为和预后关系

目的Casitas B细胞淋巴瘤(Casitas B cell lymphoma,CBL)蛋白家族是一组具有环指结构域(really interesting new gene,RING)的E3泛素连接酶,CBL-B正是其中一员。本研究探讨CBL-B蛋白在乳腺癌组织中表达与预后的关系,为乳腺癌分子机制研究及改善患者预后提供帮助。方法免疫组化染色检测CBL-B在30例取自台州医院的乳腺癌组织和癌旁组织表达;通过构建过表达CBL-B的MDA-MB-231细胞株与正常的MDA-MB-231细胞株进行Transwell细胞迁移以及细胞侵袭实验;从USCS Xena数据库下载乳腺癌基因表达及临床信息等相关数据共1217例,通过生物信息学分析CBL-B对乳腺癌临床预后的作用。结果免疫组化实验结果显示,CBL-B在正常组织中得分(265.79±37.3)高于乳腺癌组织(205.39±27.6),t=25.67,P<0.001。Transwell迁移小室穿膜细胞数平均值,对照组与实验组分别为78±17、41±14,t=11.401,P=0.001;侵袭小室穿膜细胞数平均值,对照组与实验组分别为83±15、33±12,t=13.020,P=0.001;显示CBL-B蛋白对MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移与侵袭能力均呈现抑制作用。在不同分子分型中,除HER2+亚型以外(t=0.689,P=0.481),CBL-B基因表达水平在Luminal A型(2.013±0.721,t=10.283,P=0.013)、Luminal B型(1.974±1.321,t=13.721,P=0.002)和基底样乳腺癌(2.152±1.220,t=12.321,P=0.005)中,均低于正常组织(2.321±0.317)。在不同浸润程度中,CBL-B基因表达水平(2.112±0.542)在混合型乳腺癌中最高,t=15.782,P=0.001;在黏液癌中(1.636±0.624)最低,t=14.212,P=0.001;生存曲线分析结果显示,CBL-B高表达的乳腺癌患者生存率较高,说明CBL-B与乳腺癌预后具有潜在的关联性,P<0.001。结论CBL-B表达水平与乳腺癌患者预后呈正关联,且在乳腺癌中呈现低表达的特点,预示它可能成为影响乳腺癌患者预后的一个新作用靶点。     

腹外斜肌腱膜肌肉瓣低张力修补腹股沟疝手术效果研究

目的对腹股沟疝使用腹外斜肌腱膜肌肉瓣低张力进行修补的手术效果进行探讨，评价其临床效果。方法选择90例腹股沟疝患者作为研究对象，随机分为观察组和对照组，观察组实行腹外斜肌腱膜肌肉瓣低张力修补手术，对照组实行传统的疝修补手术，手术后对两组患者的预后进行比较分析。结果两组手术时间差异无统计学意义（P〉0．05）；观察组离床活动时间及平均住院时间小于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。观察组术后出现尿潴留1例、疼痛3例，无复发病例；对照组术后出现尿潴留6例、疼痛13例，6例复发，两组患者的并发症以及复发率差异有统计学意义（P〈0．05）。结论使用腹外斜肌腱膜肌肉瓣低张力修补治疗腹股沟疝，可以缩短病程，改善预后，保证患者的生命安全，具有较高的应用价值，值得推广应用。     

介绍一种新型的检验报告自助查询打印装置

化验单到检验科后,一部分检查要到门诊化验室完成,一部分要到检验中心完成,化验结果出来后,化验单由检验科交至门诊大厅咨询台集中发放.在咨询台一般是靠护士人工翻阅查找患者的化验单,因此查找的效率非常低,又由于化验单到达咨询台的时间比较集中,经常造成患者排长队等候,由于护士来不及仔细查阅,在忙乱中常容易搞错患者的化验单.另外,从实验室发出的化验单,很难做到消毒彻底.增加了医院交叉感染传播疾病的机会.这种传统的取化验单方法既不卫生,又不方便.患者的隐私也得不到保护,严重影响了医院看病的正常秩序及患者的身心健康.为解决上述问题,本研究在使用条形码管理的基础上,提供一种方便患者使用的化验报告自助查询打印装置.     

辛伐他汀诱导裸鼠体内K562细胞凋亡过程中NF-κB通路的分子变化

目的:探讨辛伐他汀在裸鼠体内引起的K562细胞NF-κB信号通路的分子变化,以说明辛伐他汀是否依赖NF-κB信号通路参与K562细胞凋亡发生.方法:体外培养慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞,接种于18只BALB/c-nu/nu裸小鼠皮下,构建移植瘤模型.随机分为3组,每组6只.对照组腹腔注射生理盐水0.2 ml,两个处理组分别注射0.2 g/L的辛伐他汀0.25 ml(0.05 mg)和0.4 ml(0.08 mg).均隔日注射,连续6次.采用TUNEL法检测K562细胞早期凋亡的变化,RT-PCR检测K562细胞中NF-κB信号通路IKK-β、IκB-α、NF-κB1 mRNA的差异表达.结果:不同剂量的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞发生明显的凋亡,且高剂量组凋亡率高于低剂量组(P＜0.01);不同剂量的辛伐他汀能够引起 IKK-β、IκB-α、NF-κB1 mRNA的表达下调(P＜0.01).结论:辛伐他汀可诱导K562细胞凋亡,可能与NF-κB通路基因的表达下调有关.