阿糖胞苷减少白血病细胞亮氨酸氨基肽酶的表达

目的研究化疗药物阿糖胞苷对白血病细胞K562细胞亮氨酸氨基肽酶(leucine aminopeptidase,LAP)表达的影响,探讨其抗肿瘤机制。方法阿糖胞苷(终浓度442μmol/L)处理细胞48 h,倒置显微镜下观察细胞形态改变及细胞凋亡数目,RT-PCR方法检测LAP基因mRNA的表达。结果阿糖胞苷处理细胞48 h后,倒置显微镜下观察到细胞形态发生明显改变,凋亡细胞数显著增多;LAP基因mRNA的表达(0.429±0.061)明显低于对照组(0.789±0.059)(P<0.05)。结论减少白血病细胞株LAP的表达可能是阿糖胞苷致白血病细胞凋亡的机制之一。     

反义核酸抑制miR-20、miR-106表达对293T细胞增殖的影响

目的:通过反义核酸技术抑制miR-20、miR-106的表达,检测对293T细胞增殖的影响。方法:应用特异性针对miR-20、miR-106的反义核酸转染293T细胞,用形态学、流式细胞技术研究反义核酸对细胞增殖的抑制作用,用定量PCR和ELISA研究miRNA和相关靶基因的表达。结果:研究发现反义核酸可有效抑制miR-20和miR-106的表达,并明显抑制293T细胞的增殖;研究还表明反义miR-106可明显上调抑癌基因Rb的表达。结论:反义核酸通过抑制miRNA表达,上调抑癌基因Rb的表达,能明显抑制293T细胞增殖。     

医学生物化学多维互动教学的实践与思考

多维互动式教学实现了传统教学模式向新型教学模式的转变,为实现培养学生自主学习能力,提高其综合素质提供了有效途径。结合本学科特点,对医学生物化学多维互动式教学经验进行了总结,系统探讨了多维互动式教学在医学生物化学教学改革中的实施策略及意义。     

RNAi 靶向沉默 CDX2 基因对白血病细胞生物学行为的影响及其作用机制

Abstract: Objective To detect the effects of siRNA targeting CDX2 gene expression on of BCR-ABL, caspase and Bax expressions, and the mechanisms thereof. Methods According to the earlier experiments, siRNA specifically targeting CDX2 gene (CDX2-siRNA) and the negative control sequence (CDX2-siRNA-NC) were selected, and then were transfected into K562 cells by Roche X-tremeGENE HP DNA Transfection Reagent. The flow cytometry analysis was used to detect the effects of siRNA on cell apoptosis. The expressions of BCR-ABL, caspase- 9, Bax mRNA and protein were tested by RTPCR and Western blot assay. Results MTT and flow cytometry analysis showed that after the silence of CDX2 gene expression, the proliferation of K562 cells was prohibited and the apoptotic rate of K562 cells was distinctly increased compared with that of normal cell group, but the negative control group had no significant change. According to the RT-PCR and Western blot assay, in comparison with the normal cell group and the negative control group, the expression levels of BCR-ABL mRNA and protein were obviously decreased, and the difference was statistic significance. On the other hand, the expressions of caspase- 9 and Bax mRNA and protein were significantly higher than those of other two groups (P＜0.05).Conclusion CDX2-siRNA can promote apoptosis of K562 cells obviously, and the mechanism is related with the downregulation of BCR-ABL and the up-regulation of caspase-9 and Bax.     

提高儿科临床实习质量的探讨

临床医学教育的改革与发展,给儿科教学带来新的挑战。如何提高儿科临床实习质量成为迫切需要解决的问题。从培养实习学生医患沟通能力、临床思维能力、技能操作能力、科研能力等方面进行探讨,制定相应对策,并进行试验性教学改革,结果显示实验组学生比传统组学生的临床实习质量明显提高。     

长链非编码RNA异常表达对急性髓系白血病预后影响的meta分析

目的　探讨长链非编码RNA（lncRNA）异常表达对急性髓系白血病（AML）预后的影响。方法　检索PubMed、Embase、Cochrane数据库截止2021年10月6日前发表的所有相关文献。结果　最终纳入13项研究,共1 591人。lncRNA异常表达与AML患者,尤其是与非-急性早幼粒细胞白血病［AML（non-M3）］患者的总体生存率（OS）降低有关,并与无复发生存率（RFS）降低有关。亚组分析显示HOX转录反义基因间RNA（HOTAIR）和牛磺酸上调基因1（TUG1）的高表达与较差的OS相关。结论　lncRNA的异常表达与AML患者不良预后显著相关,其异常表达是AML患者预后不良的危险因素,可以作为预测AML患者预后的生物标志物。     

miR-486-5p对胃癌细胞株SGC7901生物学行为的影响

背景与目的：既往研究表明微小RNA-486-5p(miR-486-5p)在多种肿瘤的进展中起重要作用,但其在胃癌中作用的研究较少,本研究旨在探讨miR-486-5p对胃癌细胞株SGC7901增殖、凋亡及迁移能力的影响。方法：使用实时定量PCR(quantification real-time PCR,qRT-PCR)检测胃癌细胞株SGC7901及胃黏膜上皮细胞GES-1中miR-486-5p的表达,构建miR-486-5p过表达质粒,使用脂质体法瞬时转染胃癌细胞株SGC7901,qRT-PCR检测转染细胞后miR-486-5p的表达丰度,噻唑蓝(MTT)法及流式细胞仪检测细胞的增殖及凋亡情况,Transwell小室迁移实验检测细胞的迁移能力。结果：miR-486-5p在SGC7901细胞中表达明显下调,SGC7901细胞转染miR-486-5p过表达质粒后,miR-486-5p表达明显上调,细胞增殖、迁移能力降低,凋亡率增高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：miR-486-5p可抑制胃癌细胞株SGC7901的增殖和迁移。     

miR-21在白血病发病过程中的作用研究

目的 本实验旨在研究miR-21在白血病细胞中表达情况,探讨miR-21基因与白血病发病的关系.方法 提取组织中的小于200 bp的RNA,用poly(A)聚合酶在其3′末端加尾,再用5′带40 nt延伸序列的单碱基锚定Olig-dT引物进行反转录,然后用特异引物进行real-time PCR扩增,从而检测部分miRNAs在白血病细胞株K562中的表达,并与正常人骨髓表达情况相对比.结果 通过real-time PCR 分析,癌基因miR-21在K562细胞中的表达量约为(1.73±0.24)×105 个拷贝,明显高于正常人骨髓组织中miR-21的表达(P＜0.01).结论 本研究表明miR-21在K562细胞中的表达量增高,可能在白血病的发生过程中起重要作用.     

严重混合性结缔组织病1例

患儿,女,12岁,因皮疹伴肌肉酸痛、乏力1个月入院。入院前1个月出现皮疹,以颜面、双手、小腿为著,无搔痒。伴双下肢肌肉酸痛,周身乏力,食欲不振,消瘦。查体:体温36.2℃,脉搏120次/min,呼吸20次/min,血压100/60 mm Hg。发育、营养中等。双颊和鼻梁处可见蝶形暗红色斑,边界清楚;发际内可见散在红色斑丘疹;双手大小鱼际及指尖处可见大小不等红斑;双小腿可见散在大小不等紫癜。未及浅表淋巴结肿大。心肺腹未见异常。四肢近端肌肉压痛明显。神经系统检查未见异常。实验室检查:抗核抗体:抗双链(ds)-DNA( ),抗平滑肌抗体(-),抗可溶性核蛋白抗体(U…     

应用GFP标记基因研究RNAi载体的抑制效果

目的 用绿色荧光蛋白(GFP)反映RNA干扰(RNAi)载体的转染率,以研究RNAi载体的抑制效果.方法 将GFP基因和RNAi片段(特异性针对Bcl-2基因)连接至pC1载体上,构建共表达载体GFP/RNAi及其对照载体,转染293细胞,用荧光显微镜、流式细胞仪检测细胞的GFP转染率,并用TR-PCR分析RNAi抑制Bcl-2 mRNA表达的效果.结果 在293细胞中,GFP的转染率可达85%以上,此时观察到RNAi有效的抑制了Bcl-2 mRNA的表达.结论 在RNAi实验时,可选用GFP等标记基因作为载体转染率的判断标准,以进一步判断RNAi的作用效果.构建的RNAi载体有效的抑制了Bcl-2的表达,为下一步抑制肿瘤细胞的生长提供科学资料.