双靶向超声微泡造影剂评价小鼠缺血再灌注心肌

目的 制备同时携载P选择素和ICAM-1抗体的靶向超声微泡造影剂,以评估小鼠缺血再灌注损伤心肌声学造影显像效果.方法 采用生物素-亲和素方法制备靶向微泡,于激光共聚焦显微镜下观察微泡形态,流式细胞仪检测连接效率.将24只健康昆明小鼠随机分成3组:结合双抗体选择素微泡组(MBd组)10只、结合P选择素单抗组(MBp组)10只,空白微泡组(MBc组)4只.结扎冠状动脉左前降支近左主干分支,制作心肌缺血再灌注模型,60 min后经尾静脉分别注射MBd、MBp及MBc,采集心肌对比造影图像.所有图像均采用Sonomath超声影像分析仪处理.结果 MBd组和MBp组对缺氧内皮细胞的黏附力以及对缺血再灌注区心肌显像增强程度显著高于MBc组(P均＜0.05),MBd组对缺血再灌注区心肌显像延迟时间高于MBp组(P＜0.05).结论 双靶向微泡联合超声造影是检测和评估小鼠缺血再灌注心肌的无创性手段.     

毛细管气相色谱法测定扎托洛芬中有机溶剂的残留量

目的:采用毛细管气相色谱法测定扎托洛芬原料药中四氯化碳、三氯甲烷、甲醇及乙醇4种有机溶剂的残留量.方法:使用HP-5毛细管色谱柱(0.32 mm×30 m×0.25μm),柱温分别为60和80℃,氢火焰检测器和电子捕获检测器,以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,载气为氮气,进样口温度200℃,检测器温度250℃,分流比为50:l,进样量1μL.结果:4种有机溶剂分离完全,且线性关系良好,线性范围分别为四氯化碳0.039 9～0.399 0 mg/L、三氯甲烷0.561 9～5.619 0 mg/L、甲醇29.67～296.70 mg/L及乙醇49.33～493.30 mg/L.在所考察的浓度范围内线性关系良好,r为0.999 0～0.999 5,平均回收率为97.9%～103.9%,精密度重复性RSD＜5%.结论:该方法简便、快速、准确,可作为扎托洛芬有机溶剂残留量的检测方法.     

生理药代动力学软件模拟技术在药物研发和评价中的应用

生理药代动力学(physiologically-based pharmacokinetic,PBPK)软件模拟技术是通过计算机软件构建模型,模拟机体生理或病理环境,用以预测药物在体内的药代动力学行为(吸收、分布、代谢、排泄).本综述概述了生理药代动力学模型的常用功能模块、在药物早期研发和新制剂研究、食物影响药物相互作用...     

内镜下金属支架置入术治疗结肠恶性梗阻伴肠腔渗漏1例

<正>患者,男,57岁,主因腹胀2个月,发热2周于2014年2月12日入院,既往体健。查体:双肺呼吸音粗,双下肺呼吸音降低,未闻及明显干湿性啰音;律齐;腹部膨隆,略韧,全腹轻压痛,无明显反跳痛及肌紧张,肝脾触诊不满意,墨菲征阴性,肝及双肾区无叩击痛,移动性浊音阳性,肠鸣音减弱,双下肢轻度指压性对称性水肿;入院后完善相关检查:白细胞12.1×109/L,血红蛋白124g/L,血小板831×109/L,     

黏蛋白-1在子宫颈癌中的表达及其临床意义

目的研究黏蛋白(mucins,MUC1)-1与宫颈鳞状细胞癌的发生发展及临床意义。方法选取宫颈鳞状细胞癌标本80例(研究组)和慢性宫颈炎标本20例(对照组),采用免疫组织化学、Western blot技术及QRT-PCR技术检测两组标本中MUC-1的表达。结果研究组中MUC-1的表达程度相比对照组明显增高(P0.05),而且在宫颈管壁浸润深度3 mm的癌组织中的表达较浸润深度≤3mm的表达增强(P0.05);但与宫颈癌患者年龄、组织分化程度、癌组织的浸润范围、是否淋巴结转移无关(P均0.05)。结论 MUC-1蛋白的表达可能与子宫颈鳞状细胞癌的发生和发展有关。     

载血卟啉PLGA微泡用于声动力治疗小鼠H22肝癌移植瘤

目的 研究超声联合载血卟啉PLGA造影剂对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的声动力治疗作用. 方法 自制载血卟啉高分子材料PLGA造影剂并检测其基本特性.选择30只荷H22肝癌皮下移植瘤小鼠,随机平均分为5组进行治疗,绘制治疗后15天内肿瘤体积生长曲线,比较其质量抑瘤率,并采用TUNEL和PCNA检测各组小鼠肿瘤细胞凋亡情况及增殖活性. 结果 自制的载血卟啉PLGA微泡造影剂平均粒径为602.3 nm,分布均匀,包封率63.50%,载药量2.15%.治疗后,与其他各组比较,超声加载药微泡治疗组肿瘤生长曲线最平缓,质量抑瘤率及凋亡指数均显著高于其他4组(P＜0.05),而增殖指数明显低于其他各组(P＜0.05). 结论 超声联合载血卟啉高分子纳米造影剂能够抑制小鼠H22肝癌移植瘤生长,促进其凋亡.     

应用超声微泡对肝肾微循环血流速度及血流状态的研究

目的应用超声微泡实时直接测量正常肝肾微循环血流速度并研究血流状态。方法采用10只实验犬用"DFY型超声图像定量分析仪"观测肝、肾实质正常微循环的血流速度和血流状态。结果肝、肾微循环的血流速度分别为(0.82±0.17)mm/s和(1.19±0.38)mm/s。肾微循环的平均血流速度大于肝(P0.05)。结论本实验所用方法是一种无创、动态实时、直接测量深部脏器微循环血流速度的新技术方法。微循环变化是疾病的基础病变和先期病变,血液微循环障碍的最重要表现之一,就是血流速度的减慢和停滞,因而了解微循环状态对疾病的诊治和预后判断意义重大。目前,临床上尚无无创、动态实时、直接、准确测量深部脏器微循环血流速度并观察微循环状态的实用方法。     

超声辐照载10-HCPT微泡在小鼠H22肝癌移植瘤的定位释放研究

目的制备载10-HCPT脂质超声微泡(HLM),结合超声定位破坏微泡的方法实现10-HCPT在H22移植瘤的定位释放。方法用机械振荡法制备HLM。用荧光显微镜观察荧光标记的HLM在肿瘤中的分布情况。将荷瘤小鼠分为5组:超声+10-HCPT注射液组、超声+空白脂质微泡+10-HCPT注射液组、单独HLM组、超声+HLM组及生理盐水对照组。于处理1h后处死小鼠剥取肿瘤及心、肝、脾、肺、肾,测定各组织内药物浓度。结果病理切片见荧光素在肿瘤的分布超声+HLM组明显多于单独HLM组。药物浓度检测显示:1 h后肿瘤内10-HCPT浓度最高的是超声+HLM组,其他组织中10-HCPT浓度使用HLM的两组显著高于使用10-HCPT注射液的两组(P0.05)。结论局部超声辐照破坏HLM的方法能定位释放10-HCPT,提高移植瘤局部的10-HCPT含量,同时脂质微泡作为10-HCPT的载体能延长其体内循环时间。     

携VEGFR2单抗靶向微泡评价小鼠肿瘤新生血管

目的 探讨携带抗血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)单克隆抗体的超声微泡造影剂(MBv)评价小鼠肿瘤新生血管的可行性.方法 以生物素-亲和素桥接法构建MBv.免疫荧光法体外鉴定其性质.建立小鼠H22肿瘤模型,分别注射MBv和普通脂质微泡(MBc)进行超声造影检查.定量分析造影图像视频强度变化,描绘时间-强度曲线,并行肿瘤组织VEGFR2免疫组化检测.结果 成功构建偶联抗小鼠VEGFR2单抗的MBv.造影结果 表明MBv组较MBc组达峰时间提前,峰值较高,持续时间更长.免疫组化证明瘤体内新生血管内壁VEGFR2高度表达.结论 应用MBv结合超声造影可较好地评估肿瘤新生血管状况.MBv是良好的肿瘤靶向造影剂.     

超声辐照载羟基喜树碱微泡对肝癌SMMC-7721 细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

Objective To investigate the effects of ultrasound irradiating hydroxycamptothecin (HCPT)-loaded microbubbles on apoptosis in human hepatoma SMMC-7721 cells, and to clarify its probable mechanism. Methods The SMMC-7721 cells were randomly divided into six groups as follows: control group, blank liposome microbubbles plus ultrasound, HCPT-loaded microbubbles, HCPT, HCPT plus ultrasound,and HCPT-loaded microbubbles plus ultrasound. Apoptosis was ascertained by Annexin V-Fire/ PI and TUNEL methods. The expression of Bcl-2 and Bax protein was detected by immunocytochemistry staining technique. Results In the group of HCPT-loaded microbubbles plus ultrasound,the apoptosis rate at early term was found to reach (12.18 ± 1.38)% by Annexin V-Fitc/PI assay, brown-colored positive apoptotic cells were observed and the apoptosis rate at advanced term was found to reach (34.25 ± 1.83)% with TUNEL method. The expression of Bcl-2 was found to decrease,the expression of Bax increase,and the ratio of Bcl-2/bax significantly decrease by immunocytochemistry staining technique in the same group. Differences with other groups were significant. Conclusions The method of ultrasound irradiating HCPT-loaded microbubbles can notability induce human hepatoma SMMC-7721 cells apoptosis. The decrease in the ratio of Bcl-2 to Bax might be responsible for cells apoptosis.