下腰椎手术失败原因与防治措施(附37例报告)

目的探讨下腰椎手术失败的原因及预防措施。方法回顾性分析37例下腰椎再手术病例的临床资料。结果随访1~12年,优良31例(83.78%),可4例(10.8%),差2例(5.4%)。结论术前准确定位、术中操作细心、尽可能清除退变的髓核组织、必要时探查中央椎管和侧隐窝等是预防下腰椎手术失败的有效措施。本文还讨论了再次手术的困难及方法。     

胶质细胞源性神经营养因子与转化生长因子β1联合诱导大鼠脊髓源性神经干细胞的分化特点

目的:观察胶质细胞源性神经营养因子与转化生长因子β1体外联合诱导对脊髓源性神经干细胞分化的影响,为了解神经干细胞在体内多因素环境下的分化表现提供实验依据。方法:实验于2005-10/2006-09在南方医科大学附属深圳医院中心实验室完成。①碱性成纤维细胞生长因子,表皮生长因子,胶质细胞源性神经营养因子,转化生长因子β1(PeproTech);胎牛血清(Hyclone);神经巢蛋白多抗(武汉博士德);胶质纤维酸性蛋白多抗,神经丝蛋白单抗(Sigma)。②选用清洁级孕16d的SD大鼠10只,无菌条件下取出胚胎,进行脊髓源性神经干细胞的分离培养。基础培养基组成:含青霉素、链霉素、两性霉素B及体积分数为0.02B27添加液的DMEM/F12。③原代培养1周后,获取体外稳定增殖的鼠脊髓源性神经干细胞克隆,在基础培养基中加入体积分数为0.1的胎牛血清作为对照。同时设立碱性成纤维细胞生长因子组、转化生长因子β1组、胶质细胞源性神经营养因子 转化生长因子β1组,换用诱导培养基,即分别在基础培养基中加入20μg/L碱性成纤维细胞生长因子、2μg/L转化生长因子β1、10μg/L胶质细胞源性神经营养因子 2μg/L转化生长因子β1。观察在不同因子诱导情况下脊髓源性神经干细胞的分化行为,免疫细胞化学染色标记神经元与星状胶质细胞的表达。④通过荧光激发流式细胞仪分选技术对分化细胞计数,检测不同诱导环境下神经干细胞分化为神经元及星状胶质细胞的阳性百分率。结果:①细胞分化的形态学观察:分化早期可见神经球贴壁,大量细胞向四周爬出,1周后迁徙的大部分细胞完全贴壁,完成分化过程。在细胞密度较低区域可辨认出3种神经细胞类型:神经元样细胞、星状胶质样细胞、寡突胶质样细胞。②神经干细胞免疫组织化学检测:血清对照组、转化生长因子β1组存在大量胶质纤维酸性蛋白染色阳性的星状胶质细胞;而碱性成纤维细胞生长因子组、胶质细胞源性神经营养因子 转化生长因子β1组分化的神经元细胞数量较多,神经丝蛋白染色阳性。③流式细胞荧光分选计数:诱导1周后,胶质细胞源性神经营养因子 转化生长因子β1组神经元分化比例最高,明显高于碱性成纤维细胞生长因子组(χ2=19.56,P<0.05),而与血清对照组、转化生长因子β1组比较差异有极其显著性意义(χ2=24.15,25.32,P均<0.01)。碱性成纤维细胞生长因子组星状胶质细胞分化比例最低,胶质细胞源性神经营养因子 转化生长因子β1组组与其相近(χ2=17.23,P>0.05),而血清对照组、转化生长因子β1组则显著升高(χ2=24.45,23.79,P均<0.01)。结论:体外胶质细胞源性神经营养因子与转化生长因子β1的联合诱导有利于脊髓源性神经干细胞向神经元的分化,为脊髓原位神经干细胞分化及神经干细胞移植体内后的分化表现提供了实验数据。     

慢病毒载体介导绿色荧光蛋白基因在小鼠T淋巴细胞中的表达

本研究构建含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体三质粒系统,并观察其在小鼠T淋巴细胞中的表达情况。应用亚克隆技术将多聚嘌呤通道(PPT)元件、泛醌启动子(PUB)和绿色荧光蛋白基因(GFP)连接至pLO134载体,构建成pTK153载体。之后应用磷酸钙沉淀法将慢病毒载体三质粒系统(包括包装质粒△NRF、转移质粒pTK153和包膜蛋白质粒VSV-G)共转染293T细胞,12小时后在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,72小时收集病毒上清并感染小鼠T淋巴细胞,在荧光显微镜下和应用流式细胞仪(FACS)观察感染情况。结果表明:慢病毒载体的三质粒系统转染293T细胞12小时后在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白表达,FACS分析转染效率为(63.04±7.24)%,病毒滴度测定为(3.09±0.61)×106U/ml。感染小鼠T淋巴细胞后,荧光显微镜下观察到GFP的表达,FACS分析转导效率为(37.98±6.26)%。结论:成功构建了含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体,对小鼠T淋巴细胞有较高的感染效率。     

基因治疗中慢病毒载体的最新进展

基因治疗有望成为治疗遗传病、感染性疾病及肿瘤的有效手段。高效的基因转移方法为基因治疗的关键，目前应用最广的是来源于致瘤型逆转录病毒为代表的简单的逆转录病毒载体，但该类载体不能有效地转染非分裂细胞如造血干细胞及终末分化的神经细胞等。以人类免疫缺陷病毒I型（HIV－I）为代表的慢病毒为复杂的逆转录病毒。慢病毒载体具有可感染分裂细胞及非分裂细胞、转移基因片段容量较大、目的基因表达时间长、不易诱发宿主免疫反应等优点，已成为当前基因治疗中载体研究的热点。近年来对其基本生物学特性、载体改造及其应用研究均取得了较大进展。     

基因洽疗中慢病毒载体的最新进展

基因治疗有望成为治疗遗传病、感染性疾病及肿瘤的有效手段。高效的基因转移方法为基因治疗的关键,目前应用最广的是来源于致瘤型逆转录病毒为代表的简单的逆转录病毒载体,但该类载体不能有效地转染非分裂细胞如造血干细胞及终末分化的神经细胞等。以人类免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-Ⅰ)为代表的慢病毒为复杂的逆转录病毒。慢病毒载体具有可感染分裂细胞及非分裂细胞、转移基因片段容量较大、目的基因表达时间长、不易诱发宿主免疫反应等优点,已成为当前基因治疗中载体研究的热点。近年来对其基本生物学特性、载体改造及其应用研究均取得了较大进展。     

胆囊管增粗情况下行腹腔镜胆囊切除的体会

目的:探讨胆囊管增粗情况下行腹腔镜胆囊切除的处理方法。方法:回顾性分析2004年6月至2007年6月我院25例胆囊管增粗患者行腹腔镜胆囊切除术的临床资料,其中胆囊管直径0.4～0.5cm16例,0.6～0.8cm5例,0.8cm以上4例。在腹腔镜胆囊切除术中分别采用阶梯施夹法(18例),旋转施夹法(3例),圈套器法(4例)三种方法处理胆囊管,10例术中胆囊分破,创面渗液较多,胆囊坏疽或周围炎症水肿明显者,于小网膜孔处置引流管。结果:25例均顺利完成腹腔镜胆囊切除术,无并发症治愈出院。结论:在腹腔镜胆囊切除术中,采用适当的方法处理增粗的胆囊管,可顺利完成腹腔镜胆囊切除术。     

逆转录病毒载体介导PIG—A基因在突变型K562细胞中的表达

目的应用逆转录病毒载体将PIG-A cDNA转导至突变型K562细胞中,观察是否能够逆转K562细胞CD59的表达。方法采用PCR方法从质粒pEBPIG-A中扩增PIG-A基因片断,BamH I及Xho I双胁切后连接至逆转录病毒载体pLEGFP-C1相应位点。脂质体法转染PA317包装细胞,收集病毒上清感染突变型K562细胞,流式细胞仪测定感染前后CD59的表达情况。结果重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞后,24～48h荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达。G418筛选后,病毒滴度测定达(1．6±0．2)×10~4CFU/mL。感染K562细胞前后测定CD59的表达率分别为4．5％±0．7％及21．3％±0．3％(P＜0．01)。结论成功构建了PIG-A基因逆转录病毒载体,感染突变型K562细胞后可以提高其CD59的表达。     

奥氮平与利培酮治疗青少年首发精神分裂症对照研究

目的比较奥氮平与利培酮治疗青少年精神分裂症的疗效和安全性。方法对58例青少年首发精神分裂症患者随机分为两组,分别给予奥氮平与利培酮治疗8周。于治疗前后1、2、6、8周末采用阳性和阴性症状量表（PANSS）及副反应量表（TESS）评定。结果奥氮平与利培酮的总的疗效无显著性差异,均能快速起效,PANSS总分比较治疗第1周与第2周末奥氮平组显著低于利培酮组,利培酮组锥体外系反应显著多于奥氮平组。结论奥氮平与利培酮均是治疗首发青少年精神分裂症安全有效的非典型抗精神病药物,可根据患者的不同情况分别选择。     

舍曲林对伴有抑郁症的老年冠心病的治疗作用研究

目的探讨舍曲林对伴有抑郁症的老年冠心病患者的治疗作用。方法选取84例伴有抑郁症的老年冠心病患者,汉密尔顿量表（HAMD）评分≥17分,分为舍曲林治疗组和常规治疗组,各42例,两组患者均给予常规扩冠、改善心肌供血、活血化淤中成药,如硝酸酯类药物、钙离子拮抗剂、β受体阻滞剂、抗凝剂等治疗,其中舍曲林治疗组加用舍曲林50～100mg口服,1次/d,治疗6周,治疗前后分别观察患者胸闷、失眠等症状缓解情况,HAMD量表评分减少情况,并记录治疗前后心电图ST段的改变。结果舍曲林组患者的一般症状的改善和心电图的表现均优于常规治疗组。结论舍曲林对于伴有抑郁症的冠心病患者有明确的辅助治疗作用。