不同分子亚型乳腺癌首发骨转移患者的临床特征和预后分析#br# #br#

摘要：目的　探究不同分子亚型乳腺癌首发骨转移患者的临床特征及预后。方法 收集167例乳腺癌首发骨转移患者的临床资料。依据雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、人表皮生长因子受体-2（HER-2）、Ki-67的表达情况,分为Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型和三阴性型（TNBC）4个分子亚型。分析4种亚型患者临床及预后特征的差异。结果 167例患者中Luminal A型24例（14.37%）,Luminal B型102例（61.08%）,HER-2过表达型18例（10.78%）,TNBC型23例（13.77%）。4种亚型均以浸润性导管癌为主;pTNM分期中Luminal A型以Ⅰ期为主,其他3型以Ⅱ~Ⅲ期为主。手术方式中Luminal B型主要采用根治术,其他3型则以仿根治术为主。4种亚型患者月经状态、淋巴结转移、骨转移时碱性磷酸酶（ALP）水平和乳腺癌肿瘤标志物水平、其他远处转移情况、骨相关事件（SREs）、药物治疗模式等差异均无统计学意义。4种亚型的中位无转移时间分别为53、34、15、33个月（Log-rank χ2=10.592,P＜0.05）;中位总生存时间分别为90、116、63、61个月（Log-rank χ2=13.080,P＜0.01）;骨转移后中位生存时间分别为35、48、23、18个月（Log-rank χ2=15.590,P＜0.01）。HER-2过表达型中位无转移时间最短,其次为TNBC型和Luminal B型,Luminal A型最长。TNBC型患者总生存时间最短,其次为HER-2过表达型和Luminal A型,Luminal B型最长。分子亚型、pTNM分期、靶向治疗、SREs、CA153水平是患者总生存时间的独立影响因素（P＜0.05）。HER-2过表达型和TNBC型的死亡风险分别是Luminal A型的2.799、2.306倍,Luminal B型的死亡风险比 Luminal A型下降了62%。结论　4种分子亚型的乳腺癌首发骨转移患者中,HER-2过表达型和TNBC型患者预后较差;HER-2过表达型最早出现骨转移。     

中性粒细胞/淋巴细胞比值对微小病变型肾病发生激素性骨坏死的预测价值

目的　探讨中性粒细胞与淋巴细胞的比值（NLR）预测微小病变型肾病（MCD）患者发生激素性骨坏死的价值。方法　回顾性分析经皮肾穿刺活检术诊断的329例MCD患者的临床资料。根据受检者工作特征（ROC）曲线确定NLR诊断MCD发生激素性骨坏死的最佳截断值,以截断值为界将研究对象分为低NLR组（NLR≤3.321）262例和高NLR组（NLR＞3.321）67例,比较2组患者的基线临床指标、激素用量及时间、合用钙剂及活性维生素D3情况,分析NLR与MCD患者发生激素性骨坏死的相关性,以Kaplan-Meier生存曲线比较2组患者的关节生存率;以多因素Cox回归模型分析MCD患者发生激素性骨坏死的危险因素。结果　全部患者的总中位随访时间为38个月。高NLR组的年龄、白细胞计数、单核细胞计数、C反应蛋白、红细胞沉降率、纤维蛋白原、骨钙素、β胶原特殊序列、血尿素氮、血肌酐及发生激素性骨坏死的比例均较低NLR组高,估算肾小球滤过率较低NLR组降低（P＜0.05）。Kaplan-Meier生存曲线显示,低NLR组患者的关节累积生存率明显高于高NLR组（c2=10.130,P＜0.01）,高NLR组与低NLR组的1年、3年、5年生存率分别为82.9% 和93.5%、76.3%和88.9%、65.2%和85.6%。多因素Cox回归分析结果显示,高NLR水平是MCD患者发生激素性骨坏死的独立危险因素（HR=2.155,95%CI：1.136～4.089,P＜0.05）。结论　血NLR水平与MCD患者发生激素性骨坏死的风险相关,可作为评估MCD患者发生激素性骨坏死风险的有价值指标。     

干扰素调节因子1通过调控细胞焦亡参与小鼠肝脏缺血再灌注损伤

摘要：目的　探讨小鼠肝脏缺血再灌注损伤（LIRI）过程中干扰素调节因子-1（IRF-1）对焦亡的影响。方法　（1）24只C57BL/6正常雄性小鼠按照随机数字表法分为假手术（Sham）组与缺血再灌注（IR）2 h、6 h和12 h组,每组6只。Sham组不进行IR处理,其他3组采用血管夹夹闭肝中叶、左叶脉管（门静脉、动脉与胆道）60 min后分别再灌注2、6、12 h建立LIRI模型。全自动生化仪检测各组血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清白细胞介素-1β（IL-1β）水平;HE染色观察肝脏病理改变;免疫组织化学染色检测IRF-1表达情况;TUNEL染色检测肝脏细胞凋亡和焦亡情况;Western blot检测IRF-1、半胱天冬氨酸蛋白酶-1（Caspase-1）、Cleaved-Caspase-1及gasdermin D（GSDMD）蛋白水平;透射电镜检测肝组织细胞形态变化。（2）将小鼠正常肝脏AML12细胞分别进行过表达和沉默IRF-1表达后进行模拟IR处理,分为过表达IRF-1+IR组、空载体+IR组、IRF-1 siRNA+IR组及其对照组（NC+IR组）。Western blot检测4组细胞IRF-1、Caspase-1、Cleaved-Caspase-1和GSDMD蛋白水平;透射电镜检测细胞形态变化;流式细胞术检测细胞焦亡情况;酶标仪检测细胞上清乳酸脱氢酶（LDH）释放量。结果　（1）体内实验结果显示,与Sham组比较,IR6 h组和12 h组血清ALT、AST和IL-1β水平均有明显升高（P＜0.05）,IRF-1、Caspase-1和GSDMD蛋白表达升高（P＜0.05）;同时肝细胞出现肿胀、排列紊乱、空泡、片状坏死和红细胞淤积并伴有核膜损伤和线粒体肿胀。（2）体外AML12细胞过表达IRF-1后Cleaved-Caspase-1和GSDMD的表达增加,而敲低IRF-1表达后Caspase-1和GSDMD表达随之减少（P＜0.05）。沉默IRF-1表达后,与NC+IR组相比,IRF-1 siRNA+IR组细胞质膜和核膜的破坏减轻,细胞焦亡率下降,LDH释放量减少约20%（P＜0.05）。结论　IRF-1可通过调节Caspase-1和GSDMD的表达以及IL-1β的释放导致小鼠LIRI。     

直接前方与后外侧入路半髋关节置换术的早期疗效对比分析#br#

摘要：目的　比较直接前方入路（DAA）与后外侧入路（PLA）半髋关节置换术治疗老年股骨颈骨折的早期临床疗效。方法　将行半髋关节置换术的老年股骨颈骨折患者90例依据不同术式分为DAA组（42例）和PLA组（48例）。比较2组术后一般资料,术前及术后1、3、5 d的视觉疼痛模拟评分（VAS）,术前及术后1周、1个月、3个月、6个月的Harris髋关节功能评分（HHS）。比较分析2组术后1周、1个月、3个月、6个月的髋关节外展肌力矩、单腿站立试验结果、Berg平衡量表评分（BBS）、关节位置感觉（JPS）角度。结果　DAA组手术时间长于PLA组,但切口长度、术中出血量、术后1 d血红蛋白（Hb）下降值均少于PLA组（P＜0.01）。2组HHS评分、力矩随着时间延续均呈增加趋势,而VAS、JPS角度呈降低趋势,且各时点DAA组HHS、力矩高于PLA组,VAS、JPS角度低于PLA组。DAA组各时点的单腿站立试验结果优于PLA组（P＜0.01）。DAA组和PLA组并发症发生率（2.4%和4.2%）差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　DAA创伤小、术后髋关节功能和本体感觉恢复快,利于患者的早期康复,应用DAA的早期疗效优于PLA。     

Linc00891通过竞争性结合并抑制miR-27a-3p在骨肉瘤中发挥抑癌作用#br#

摘要：目的　探讨Linc00891在骨肉瘤（OS）中发挥的作用并初步分析其机制。方法　实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qPCR）检测Linc00891在不同OS细胞系U-2 OS、Saos-2、MG-63、SW 1353及人成骨细胞系hFOB 1.19中的表达,选择Saos-2和MG-63 OS细胞系转染过表达Linc00891载体。CCK-8法、平板克隆法和Transwell小室检测过表达Linc00891对人OS细胞系Saos-2和MG-63增殖、克隆形成能力和迁移能力的影响。Western blot法检测上皮间质转化相关蛋白钙黏着蛋白E（E-cad）、钙黏着蛋白N（N-cad）的表达。RNA pulldown实验检测Linc00891和miR-27a-3p在OS细胞中的结合关系。TCF/LEF报告试剂盒检测过表达Linc00891和上调miR-27a-3p对不同OS细胞系中 Wnt/β-catenin信号通路的影响。结果　不同OS细胞系U-2 OS、Saos-2、MG-63、SW 1353中Linc00891的表达水平显著低于正常成骨细胞系hFOB 1.19（P＜0.05）。过表达Linc00891可抑制人OS细胞系Saos-2和MG-63的增殖、克隆形成能力、迁移能力及上皮间质转化（P＜0.05）。Linc00891和miR-27a-3p在OS细胞中存在结合关系。过表达Linc00891能够逆转miR-27a-3p对Wnt/β-catenin信号通路的激活（P＜0.05）。结论　Linc00891通过竞争性结合并抑制miR-27a-3p,在OS中发挥抑癌作用。     

继发性胆总管结石外科治疗策略研究

摘要：目的　探讨继发性胆总管结石的外科治疗策略,比较并分析腹腔镜下一期缝合手术及内镜治疗方法的优缺点及适应证。方法　收集接受腹腔镜下一期缝合手术及内镜治疗的188例继发性胆总管结石患者的临床资料并随访,所有患者均合并胆囊结石,65例患者（一期缝合组）接受了腹腔镜下胆总管切开取石（LCBDE）一期缝合联合胆囊切除术（LC）,123例患者（内镜取石组）施行了内镜下逆行胰胆管造影检查（ERCP）联合十二指肠乳头肌切开取石术（EST）并二期行LC。对2组患者手术适应证、结石大小、结石分布、胆道感染情况、合并基础疾病及住院时间、术后近远期并发症、费用等进行比较分析。结果　2组患者的胆总管直径、结石数量及大小差异无统计学意义。一期缝合组住院时间、住院费用均低于内镜取石组（P＜0.05）。一期缝合组术后轻微胆瘘2例,内镜取石组术后高淀粉酶血症21例。术后1年随访2组均无胆道狭窄及结石复发。结论　在同时满足适应证的情况下,胆总管一期缝合手术治疗继发性胆总管结石相较内镜取石住院时间更短、费用更低且不破坏正常生理结构。     

低剂量氯胺酮对MPTP诱导帕金森病小鼠神经功能及炎性因子的影响#br# #br#

摘要：目的　探讨低剂量氯胺酮对MPTP诱导帕金森病（PD）小鼠神经功能及神经炎症的影响。方法　50只C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为NC组、PD组、PD+Keta-L组、PD+Keta-M组和PD+Keta-H组,每组10只。PD+Keta-L、PD+Keta-M、PD+Keta-H组分别用25、50和75 mg/kg的氯胺酮腹腔注射处理,每天1次,共2 d,而后PD组及PD+Keta-L、PD+Keta-M、PD+Keta-H组腹腔注射MPTP 20 mg/kg,每天1次,连续20 d,建立亚急性PD小鼠模型。观察各组小鼠步态、改良神经功能缺损评分（MNSS）;HE染色观察脑部神经细胞形态变化;免疫组化法检测神经细胞酪氨酸羟化酶（TH）表达,原位缺口末端标记（TUNEL）法检测神经细胞凋亡情况;酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测脑组织肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-6、IL-1β水平;Western blot法检测脑组织Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88）、核因子（NF）-κB p65蛋白水平。结果　与NC组相比,PD组步态异常,MNSS评分、脑组织神经细胞凋亡率以及TNF-α、IL-6、IL-1β水平升高,TH阳性细胞比例降低（P＜0.05）;与PD组相比,PD+Keta-L组步态改善,MNSS评分、神经细胞凋亡率、TNF-α、IL-6、IL-1β水平降低,TH阳性细胞比例升高（P＜0.05）,PD+Keta-M、PD+Keta-L组与PD组比较差异无统计学意义。PD组中TLR4、NF-κB p65和MyD88表达显著高于NC组,与PD组相比,PD+Keta-L组TLR4、NF-κB p65和MyD88均显著降低,PD+Keta-M组仅TLR4及MyD88降低（均P＜0.05）,而PD+Keta-H组无明显变化（P＞0.05）。结论　低剂量氯胺酮对PD小鼠具有一定神经保护作用。     

化学合成肽修饰钛种植体表面的抗菌效果研究

摘要：目的　探讨化学合成肽修饰钛种植体表面的抗菌效果。方法　利用源于人类β防御素3（hBD3）的一个片段（hBD3-1）与肽TBP-1化学结合,形成合成肽TBP-1-hBD3-1。Peptide Calculator软件分析合成肽的基本性质;标准微量肉汤稀释法检测TBP-1-hBD3-1对牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis）的最小抑菌浓度（MIC）、最小杀菌浓度（MBC）,微量滴定法检测生物膜对照组和生物膜实验组光密度（OD600）值差异;共聚焦激光扫描显微镜（CLSM）检测TBP-1-hBD3-1修饰在钛种植体表面的黏附、活性情况。结果　TBP-1-hBD3-1具有较好的溶解性及亲水性,并有疏水性基团,带有一定的正电荷数（4+）。TBP-1-hBD3-1对P. gingivalis的MIC值和MBC值分别为400 mg/L和1 000 mg/L。生物膜实验组较生物膜对照组OD600值降低（P＜0.05）。CLSM结果表明,被AMC标记成蓝色的TBP-1-hBD3-1能够牢固地黏附于钛样本表面。结论　合成肽TBP-1-hBD3-1能够修饰在钛样本表面并发挥抗菌和抑制细菌生物膜形成的作用。     

HNF-4α基因多态性与非酒精性脂肪性肝病的关系

摘要：目的　分析HNF-4α基因多态性与非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的关系。方法　选择100例NAFLD患者作为观察组,并根据患者病变程度分为轻度组（28例）、中度组（36例）、重度组（36例）3个亚组。选择同时期查体的100例健康人作为对照组。比较2组一般临床资料及血生化指标等,采集2组外周静脉血,应用聚合酶链式反应（PCR）检测HNF-4α基因rs4812829位点的多态性;Logistic回归分析NAFLD的影响因素。结果　2组的性别、年龄差异无统计学意义（P＞0.05）。观察组收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、体质量指数（BMI）、腰臀比（WHR）均明显高于对照组（P＜0.05）。对照组、轻度组、中度组、重度组丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、谷氨酰转肽酶（γ-GT）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、葡萄糖（GLU）、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）及尿酸（UA）水平大体呈升高趋势,高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平呈下降趋势（P＜0.05）。观察组与对照组HNF-4α rs4812829等位基因及基因型分布差异无统计学意义（P＞0.05）;观察组不同亚组间HNF-4α rs4812829等位基因及基因型分布差异无统计学意义（P＞0.05）;观察组HNF-4α rs4812829位点不同基因型携带者之间ALT、AST、γ-GT、TC、TG、HDL-C、LDL-C、GLU、HOMA-IR及UA水平差异无统计学意义（P＞0.05）;基因型为AG、AA的个体发生NAFLD的风险与基因型为GG个体相比均未增加。结论　HNF-4α基因rs4812829位点多态性及等位基因的分布与NAFLD的发生无明显相关。     

人参皂苷Rg3对H2O2诱导人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的保护作用#br#

摘要：目的　探讨人参皂苷Rg3对过氧化氢（H2O2）诱导人卵巢颗粒细胞（KGN）损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法　体外培养KGN,采用不同剂量H2O2孵育细胞2 h,建立H2O2刺激的KGN损伤模型。人参皂苷Rg3预处理24 h,H2O2刺激KGN后,CCK-8检测细胞活力,筛选有效的干预剂量,随后将KGN分为空白组、H2O2模型组、H2O2+Rg3组和Rg3组,采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧（ROS）水平;AnnexinⅤ/PI双染,流式细胞术检测人参皂苷Rg3对H2O2诱导KGN凋亡的影响;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、BAX及细胞色素C的表达。结果　与空白组相比,H2O2模型组细胞活力下降,凋亡比例升高（P＜0.01）,ROS水平增高,细胞色素C水平显著升高,Bcl-2/BAX降低（均P＜0.05）。与模型组相比,H2O2+Rg3组能够明显提高细胞活力,减少ROS的产生,降低凋亡细胞比例,降低细胞色素C水平,提高Bcl-2/BAX（均P＜0.05）。与空白组相比,Rg3组无明显差异。结论　人参皂苷Rg3预处理对H2O2诱导的KGN氧化损伤具有保护作用,其机制与减缓ROS过量累积以及抑制线粒体凋亡途径有关。