Nrf2-自噬通路在大鼠切口痛-瑞芬太尼诱导痛觉过敏中的作用

摘要： 目的 探讨切口痛-瑞芬太尼痛敏模型大鼠脊髓内核因子 E2 相关因子 2 （Nrf2） -自噬通路在痛觉过敏中的作用。方法 24 只雄性 SD 大鼠依随机数字表法分为 3 组： 盐水+切口痛组 （I 组）、 切口痛-瑞芬太尼痛敏组 （RI 组）、 Nrf2 激动剂 t-BHQ 组 （t-BHQ 组） ,每组 8 只。I 组和 RI 组建模前分别经尾静脉输注生理盐水 0.1 mL/ （kg·min）和瑞芬太尼 1 μg/ （kg·min）, 连续输注 60 min。t-BHQ 组于输注瑞芬太尼前 0.5 h 腹腔注射 t-BHQ （15 mg/kg）, 12 h 1 次, 连续 4 次, 余处理同 RI 组。3 组输注同时于双侧后足建立 Brennan 切口痛模型。分别于输注前 24 h （T0 ）、 输注后 2 h （T1 ）、 6 h （T2 ）、 24 h （T3 ） 和 48 h （T4 ） 测定大鼠机械刺激缩足阈值 （PWT） 及热刺激缩足潜伏期 （PWL）。测试完毕后将大鼠处死, 取 L4~6 脊髓节段, Western blot 法测定脊髓自噬相关蛋白微管相关蛋白 1 轻链 3Ⅱ （LC3Ⅱ）、 Beclin-1、 Nrf2 及其下游分子血红素氧化酶 1 （HO-1） 表达水平。结果 随着处理时间的延长, 3 组 PWT、 PWL 呈总体下降的趋势。从 T1 开始, 与 I 组相比, RI 组 PWT 下降、 PWL 缩短, T4 时 LC3Ⅱ、 Beclin-1 表达升高、 Nrf2、 HO-1 蛋白表达降低 （P＜0.05）; 与 RI 组相比, tBHQ 组 PWT 升高、 PWL 延长 （P＜0.05）, 同时 Nrf2、 HO-1、 LC3Ⅱ、 Beclin-1 蛋白表达均明显升高 （P＜0.05）。结论 Nrf2-自噬通路的激活可明显改善切口痛-瑞芬太尼诱导的痛觉过敏。     

黄芪甲苷对异丙肾上腺素诱导大鼠 心肌肥厚的保护作用研究

摘要：目的 探讨黄芪甲苷对异丙肾上腺素（ISO）诱导的大鼠心肌肥厚的保护作用机制。方法 健康SPF级SD 大鼠24只,随机分为4组,对照组（与ISO组等体积的生理盐水腹腔注射,之后与黄芪甲苷组等体积生理盐水灌胃）、 ISO组［ISO 3 mg/ （kg·d）腹腔注射,与黄芪甲苷等体积生理盐水灌胃］、黄芪甲苷组［与ISO等体积生理盐水腹腔注射, 黄芪甲苷溶液5 mg/ （kg·d）灌胃］、黄芪甲苷+ISO组［ISO 3 mg/ （kg·d）腹腔注射,黄芪甲苷溶液5 mg/ （kg·d）灌胃］,每 组6只,共处理14 d。处理结束后取大鼠左心室,计算左心室质量指数（左心室质量/体质量）。HE染色观察左心室心 肌肥厚情况,比较心肌横截面积的差异。以二氯荧光素（DCF）为探针检测心肌线粒体活性氧（ROS）生成速率; Western blot 法检测大鼠心肌NADPH氧化酶4（NOX4）和心房利钠肽（ANP）蛋白表达水平;RT-qPCR检测大鼠心肌 ANP在转录水平的表达情况。结果 与对照组相比,ISO组左心室质量指数明显升高,心肌横截面积扩大,心肌线粒 体ROS生成速率加快,NOX4蛋白、ANP mRNA及蛋白表达水平均明显升高（P < 0.05）。而ISO+黄芪甲苷组与ISO组 相比,上述指标均明显改善,主要表现为心肌横截面积缩小,ROS生成速率减慢,NOX4蛋白、ANP mRNA及蛋白表达 明显下降,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 黄芪甲苷对ISO诱导的大鼠心肌肥厚具有确切的保护作用,且该 保护作用可能与黄芪甲苷降低氧化应激反应相关。     

钙网织蛋白在早期类风湿关节炎中的表达及其与 自身抗体和炎性细胞因子的关系

目的 探讨钙网织蛋白在早期类风湿关节炎（RA）患者体内的表达及其与自身抗体和炎性细胞因子的关 系。方法 收集 106 例早期活动性 RA 患者、95 例经治疗达到稳定期 RA 患者、85 例骨性关节炎（OA）患者和 80 例 健康对照者（HC）的外周血标本。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清钙网织蛋白、抗环瓜氨酸肽抗体（antiCCP）及细胞因子白细胞介素（IL）-1β、IL-6、肿瘤坏死因子（TNF）-α 水平;采用免疫比浊法检测类风湿因子（RF）水 平。Spearman 等级相关分析活动性 RA 患者血清钙网织蛋白水平与血清 IL-1β、IL-6 和 TNF-α 的相关性。结果 早期活动性 RA 组血清钙网织蛋白水平［（5.84±2.62）μg/L］高于稳定期 RA 组［（4.26±1.42）μg/L］、OA 患者组［（3.92± 1.10）μg/L］和 HC 组［（3.86±0.91）μg/L］（P＜0.001）,后 3 组的血清钙网织蛋白水平差异无统计学意义（P＞0.05）;早 期活动性 RA 患者 RF 阳性组血清钙网织蛋白水平高于 RF 阴性组［（6.12±2.87）μg/L vs. （4.92±1.22）μg/L,P=0.045］, anti-CCP 阳性组血清钙网织蛋白水平也高于 anti-CCP 阴性组［（6.39±2.93）μg/L vs. （4.69±1.17）μg/L,P=0.002］;早期 活动性 RA 患者血清钙网织蛋白水平与血清 IL-1β（rs=0.386,P=0.009）、IL-6（rs=0.405,P=0.006）、TNF-α（rs=0.428, P=0.003）均呈正相关。结论 钙网织蛋白在早期活动性 RA 患者体内表达升高,且与自身抗体及炎性细胞因子水平 有关,提示其可能成为 RA 早期诊断及预后评估的潜在血清学新指标。     

肾康注射液抑制体外培养小鼠腹膜间皮细胞中TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF的释放

摘要： 目的 探讨肾康注射液对体外培养的小鼠腹膜间皮细胞 （PMCs） 的肿瘤坏死因子 （TNF） -α、 转化生长因子（TGF） -β1、 血管内皮生长因子 （VEGF）、 结缔组织生长因子 （CTGF） 等细胞因子水平的影响。方法 小鼠PMCs经传代培养及鉴定后, 分为空白对照组 （A组, DMEM）; 阳性对照组 （B组, DMEM+ 140 mmol/L葡萄糖）; 低 （C组）、 中 （D 组）、 高 （E组） 剂量肾康干预组 （B组培养液+含体积比为1%、 2%、 4%肾康注射液）。培养24 h后分别收集细胞和培养上清液, 采用酶联免疫吸附试验检测培养上清液中TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF水平, Real-time RT-PCR检测 PMCs中TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF的mRNA转录水平。结果 与A组比较, B组TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF 浓度及mRNA表达水平均明显上升 （P＜0.05）; 与B组比较, 加入肾康注射液后, C、 D、 E组培养上清液中由高糖诱导的TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF浓度及相应mRNA水平均出现不同程度下降 （P＜0.05）, 并呈现一定的剂量依赖性。结论 一定浓度的肾康注射液可抑制高糖诱导的小鼠PMCs中TNF-α、 TGF-β1、 VEGF、 CTGF的表达和转录。     

六例自身免疫性脑炎的临床特征分析

摘要：目的 探讨自身免疫性脑炎（AE）的临床特点、治疗与预后。方法 对我院收治的6例AE患者的临床表 现、实验室检查、治疗方法及预后等临床资料进行回顾性分析。结果 6例AE患者中,1例为抗N-甲基-D-天冬氨酸 受体（NMDAR）脑炎,2例为抗富含亮氨酸胶质瘤失活蛋白1（LGI1）抗体脑炎,3例为抗体阴性AE。以痫性发作（6/ 6）、意识水平下降（5/6）、近事记忆力下降的认知功能障碍（4/6）、精神和行为异常（3/6）为主要临床表现。所有患者的 颅脑MRI结果均可及异常信号,以边缘系统受累为主;脑电图多表现为弥散性慢波节律,异常放电以颞区为著（3/6）; 脑脊液检查提示乳酸脱氢酶增多（4/6）。患者入院后5例接受了糖皮质激素冲击治疗,其中3例联合静脉注射免疫球 蛋白。所有患者均好转出院,但均遗留癫痫。结论 以痫性发作伴意识水平下降、认知功能障碍及精神和行为异常 为主要临床表现的患者,要警惕AE的可能,急性期治疗建议采用糖皮质激素并联合静脉注射免疫球蛋白冲击治疗, 后期遗留癫痫可能性较大。     

良性复发性无菌性脑膜炎一例

摘要：良性复发性无菌性脑膜炎又称为Mollaret脑膜炎（MM）,以反复发作的脑膜炎为特征,主要包括反复发作 的头痛、颈强直、发热和脑脊液细胞数增多,由Mollaret 1944年首先报道,是神经系统少见疾病。笔者收治了1例良 性复发性无菌性脑膜炎的病例,腰穿结果显示无细菌生长的证据,强化磁共振成像（MRI）显示脑膜的高信号,提示应 该重视强化MRI在MM的个体诊断中的应用。     

KIBRA基因多态性影响脑功能连接的fMRI研究

摘要：目的 探讨肾脑表达蛋白（KIBRA）基因rs17070145多态性对认知功能评分及脑功能连接密度（FCD）的影 响,为建立早期识别阿尔茨海默病（AD）风险人群的遗传和影像学指标提供依据。方法 于2015年3—8月连续收集 天津地区健康汉族青年人,纳入研究的267例研究对象均具有完整的行为学、遗传学资料和磁共振影像学数据。检 测所有受试者的KIBRA C/T等位基因,并分成C基因携带者（TC+CC,112例）和TT纯合子携带者（155例）2组。采用 中国修订版的韦氏记忆量表和威斯康星卡片分类试验中的持续性错误百分比来评估记忆及执行功能。对静息态 fMRI进行预处理,计算全脑FCD指标并比较不同基因型组间差异。结果 不同基因型组间韦氏记忆量表中的代表 长时记忆分测验差异有统计学意义（P=0.05）。不同基因型组间年龄、性别、受教育年限和持续性错误百分比差异无 统计学意义（P＞0.05）。右侧枕中回为组间FCD差异的脑区,与TT纯合子携带者相比,C基因携带者的FCD值增高 （P＜0.05）。结论 KIBRA基因多态性影响天津地区汉族青年人群静息状态下枕叶的脑活动情况,C基因携带者脑功 能活性的增加可能是对长时记忆表现差的一种代偿     

木兰花碱减轻慢性应激小鼠抑郁样行为及对脑部LSD1组蛋白修饰的影响

目的 探索木兰花碱对慢性不可预见性温和应激所致抑郁小鼠行为学的影响机制。方法 将 ICR小鼠随 机分为正常对照组（control组）、抑郁模型组（PG组）、木兰花碱高剂量组（MH组）和木兰花碱低剂量组（ML组）。采用 慢性不可预见性温和刺激方法建立抑郁小鼠模型,检测各组小鼠行为学的变化,并用实时定量 PCR、Western blot检 测小鼠脑部赖氨酸特异性组蛋白去甲基化酶 1（LSD1）mRNA及蛋白表达水平的变化。免疫组化染色法检测小鼠脑 部 LSD1阳性细胞数量。结果 木兰花碱在行为学上改善了小鼠的抑郁状况,与 PG组相比,MH组和 ML组悬尾不动 时间、强迫游泳不动时间明显缩短（P＜0.05）。实时定量 PCR及 Western blot结果显示,与 control组相比,PG组 LSD1 mRNA表达差异无统计学意义,蛋白表达明显降低（P＜0.05）,ML组 LSD1 mRNA和蛋白表达明显升高（P＜0.05）;与 PG组相比,ML组 LSD1 mRNA和蛋白表达明显升高（P＜0.05）。免疫组化结果显示,与 control组相比,PG组小鼠脑部 LSD1阳性细胞数量减少,而 ML组较 PG组增加。结论 在木兰花碱治疗抑郁小鼠的过程中,LSD1可能起到了重要 的调节作用。     

结构化护理对ICU患者情绪管理、睡眠和生活质量的影响

目的 探究结构化护理对ICU患者情绪管理、睡眠和生活质量的影响。方法选取ICU收治的80例术后清醒患者,随机分为对照组和观察组,各40例。对照组实施常规护理,观察组实施结构化护理措施。采用Richards-Campbell睡眠量表（RCSQ）评分比较两组患者睡眠质量;采用焦虑自评量表（SAS）和抑郁自评量表（SDS）评估心理状况;采用健康调查简表（SF-36）比较生活质量;比较两组患者压疮发生率和护理满意度。结果护理后,观察组患者RCSQ各项评分较护理前均降低,且均低于对照组（P<0.01）;观察组患者SAS和SDS评分较护理前均有降低,且均低于对照组（P<0.05,P<0.01）;观察组SF-36各维度得分较护理前均有升高,且均高于对照组（P<0.01）;观察组压疮发生率低于对照组（P<0.05）,护理满意度比对照组高（P<0.05）。结论ICU患者实施科学、有效的结构化护理模式,可以明显改善患者的睡眠质量和情绪,降低压疮发生率,促进疾病痊愈和健康恢复,提高患者的生活质量。     

T淋巴细胞亚群检测、锌剂治疗在病毒及细菌感染性腹泻中的应用

目的 观察外周血T淋巴细胞亚群在病毒及细菌感染性腹泻中的分布及锌剂在治疗中的疗效分析,探讨锌剂治疗与感染性腹泻及T淋巴细胞亚群分布之间联系。方法随机选取住院的轻中度感染性腹泻患儿138例,其中病毒感染75例,细菌感染63例,另随机选取健康儿童60例。分为病毒感染组（n=75）、细菌感染组（n=63）、健康对照组（n=60）。均采用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群（CD4+比例、CD8+比例、CD4+/CD8+值）,比较各组间变化及意义。其中病毒感染组中有33例予锌剂治疗,42例未予锌剂治疗,分为病毒补锌组（n=33）、病毒对照组（n=42）;细菌感染组中有27例予锌剂治疗,36例未予锌剂治疗,分为细菌补锌组（n=27）、细菌对照组（n=36）,分析锌剂治疗在病毒及细菌感染性腹泻中的疗效。病情恢复后随访病例中补锌组及对照组各随机抽取病例15例,比较T淋巴细胞亚群各数值的变化。结果病毒感染组及细菌感染组CD4+比例、CD4+/CD8+值均低于健康对照组（P<0.05）,CD8+比例均高于健康对照组（P<0.05）;病毒感染组与细菌感染组之间各数据差异无统计学意义（P>0.05）。各组中补锌组的疗效高于对照组。随访病例CD4+比例、CD4+/CD8+值明显升高,CD8+比例明显下降,且补锌组恢复更明显（P<0.05）。结论病毒及细菌感染性腹泻患儿外周血T淋巴细胞亚群值较正常患儿有明显变化,补锌在病毒及细菌感染性腹泻治疗中均有助于症状及T淋巴细胞亚群值的恢复。