肝脏缺血再灌注损伤中线粒体膜氧化应激和电生理 功能障碍的分子机制研究

目的 探讨肝脏缺血再灌注损伤中线粒体膜氧化应激和电生理功能障碍的分子机制。方法 建立 SD 大 鼠肝移植 （冷缺血再灌注组, n=20） 和肝脏肝门部分阻断 （热缺血再灌注组, n=20） 的缺血再灌注损伤模型。以大鼠仅 作肝十二指肠韧带分离, 但不阻断肝脏肝门血液供应的 10 只大鼠为假手术组, 采集各组血标本测定丙氨酸转氨酶 （ALT）、 天冬氨酸转氨酶 （AST）、 肿瘤坏死因子-α （TNF-α） 及白细胞介素-1β （IL-1β） 水平; 采集胆汁标本用于测定胆 汁内葡萄糖的含量及 γ-谷氨酰转移酶（GGT）水平; 采集肝组织标本用于测定丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶 （SOD）, 流式细胞仪测定肝细胞线粒体膜电位, 采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测肝细胞内线粒体呼吸链复合体 活性。结果 冷、 热缺血再灌注组大鼠的 ALT、 AST、 胆汁葡萄糖、 GGT、 TNF-α、 IL-1β 及 MDA 水平均高于假手术组 （P＜0.01）, 且冷缺血再灌注组大鼠各项指标均高于热缺血再灌注组 （P＜0.05）。热缺血再灌注组和冷缺血再灌注组 大鼠肝脏 SOD 水平均明显低于假手术组, 并且热缺血再灌注组的 SOD 水平高于冷缺血再灌注组（P＜0.01）。与假 手术组相比, 热、 冷缺血再灌注损伤组再灌注 0 h（缺血 1 h）、 1 h、 12 h 线粒体膜电位细胞的比例均降低（P＜0.01）; 热、 冷缺血再灌注损伤组组内随时间延长其线粒体膜电位活性有逐渐恢复的趋势 （P＜0.01）。假手术组 0、 72 h 的线 粒体呼吸链复合体Ⅲ、 Ⅳ差异均无统计学意义; 热、 冷缺血再灌注组 72 h 较 0 h 线粒体呼吸链复合体活性均增高 （P＜0.01）; 0、 72 h 时, 假手术组, 热、 冷缺血再灌注损伤组线粒体呼吸链复合体Ⅲ呈依次降低, 而线粒体呼吸链复合 体Ⅳ呈依次增高 （P＜0.01）。结论 缺血再灌注损伤的强应激刺激可导致肝细胞线粒体膜氧化应激, 进而导致肝细 胞受到损害, 线粒体内相关酶系统活性受损, 最终导致线粒体内呼吸链酶复合体活性受损伤, 这可能是氧化应激导 致肝细胞线粒体膜氧化应激和电生理功能障碍, 继而肝细胞损伤和能量代谢障碍发生的分子机制。     

肠道菌群及其代谢产物与心血管疾病关系的研究进展 #br#

心血管疾病作为目前致死致残率较高的疾病,时刻威胁着人类的健康。近年来,随着研究的不断进展,有 报道称肠道菌群及其代谢产物也参与到心血管疾病（包括与动脉粥样硬化、心力衰竭、高血压等）发生发展的过程 中。通过改善肠道菌群及其代谢产物的组成,可以改善心血管疾病的进程,而这种治疗方法也成为了一个治疗心血 管疾病的新方向。本文就肠道菌群的组成,肠道菌群代谢产物的作用,肠道菌群及其代谢产物与动脉粥样硬化、心 力衰竭、高血压等疾病的关系,通过改善肠道菌群进行疾病治疗等的研究现状进行综述。     

HJURP基因促进肾癌细胞增殖迁移的机制研究

目的　研究HJURP基因对肾癌细胞生物学功能的影响。方法　利用TCGA肾癌数据库分析HJURP基因在肾癌中的表达及对预后的影响,qPCR进一步检测HJURP基因在20例肾癌组织,肾癌细胞株CAKI-1、786O、A498及正常化肾小管细胞HK2中的表达。分别设计HJURP特异性siRNA（si-HJURP组）和对照序列（NC组）转染CAKI-1细胞株,采用细胞克隆形成实验和MTT法检测HJURP基因对肾癌细胞增殖活性影响,流式细胞术检测肾癌细胞周期变化,Transwell实验检测肾癌细胞迁移能力,Western blot检测上皮间质转化（EMT）及AKT通路相关蛋白的表达变化。结果　（1）TCGA数据库中HJURP在肾癌组织中显著高表达,且随着肿瘤分期的升高而增高（P＜0.05）。HJURP高表达组患者总生存率和无病生存率明显较HJURP低表达组患者降低。（2）肾癌组织及肾癌细胞株中HJURP表达均高于癌旁组织及正常肾小管细胞。（3）细胞学实验结果显示,与NC组相比,si-HJURP组CAKI-1细胞增殖活性明显受抑制,G2期细胞比例增高,细胞迁移数量明显下降,EMT相关蛋白N-cadherin表达下降,E-cadherin表达升高,同时AKT通路关键蛋白p-AKT及p-GSK3β明显下调（P＜0.05）。结论　HJURP基因在肾癌中高表达,促进肾癌细胞的增殖及迁移,其可作为肾癌的潜在临床诊治靶点及预后标志物。     

不同灌注方式对大鼠小体积肝移植生存率的影响

目的 探讨不同的灌注方式对大鼠小体积肝移植生存率的影响。方法 将 156 只 SD 大鼠随机分为经门静脉灌注组（GroupⅠ）和经腹主动脉灌注组（GroupⅡ）, 每组 78 只, 供、 受体各 39 只。GroupⅠ与 GroupⅡ在获取供肝后, 切除肝脏的左叶和中叶, 剩余约 30%体积进行移植, 术中记录供体和受体的体质量、 移植肝质量、 温缺血时间、供体手术时间、 冷缺血时间、 无肝期、 肝下下腔静脉阻断时间及受体手术时间相关指标, 比较 2 组大鼠术后 6 h、 1 d、 3 d 和 7 d 的血清丙氨酸转氨酶（ALT）和天冬氨酸转氨酶（AST）水平、 病理 HE 染色及 7 d 生存率。结果 2 组术中血清 ALT、 AST 均逐渐下降, 但是 GroupⅠ下降缓慢, 术后 24 h 高于 GroupⅡ（P＜0.05）。HE 染色提示 GroupⅠ术后早期肝组织显微结构损伤大, GroupⅠ的 7 d 中位生存期低于 GroupⅡ （Log-rank χ2=4.050, P=0.044）。结论 使用经腹主动脉灌注的方法建立大鼠小体积肝移植模型具有肝脏损伤小、 生存率高的优势。     

冠状动脉旁路移植术后桥血管病变的 介入治疗及预后分析

目的 随访冠状动脉旁路移植术 （CABG） 术后桥血管病变成功行介入治疗患者临床主要不良心血管事件（MACE） 的发生情况, 探讨原位血管介入治疗 （NV-PCI） 和桥血管介入治疗 （graft-PCI） 策略对患者临床预后的影响。方法 选择 312 例 CABG 术后胸痛症状再发并成功行介入治疗的患者, 其中 NV-PCI 组 215 例, graft-PCI 组 97 例,平均随访 34 个月。观察患者院外心源性死亡、 非致死性急性心肌梗死（AMI）及靶血管再次血运重建（TVR）的发生情况。采用多因素 Logistic 回归分析桥血管病变介入治疗后 MACE 发生的危险因素。结果 NV-PCI 组无 MACE 生存率、 无 AMI 生存率及无 TVR 生存率均高于 graft-PCI 组, 差异有统计学意义（P＜0.05）, 2 组无死亡生存率差异无统计学意义（P＞0.05）。多因素 Logistic 回归分析显示, 长桥龄 [OR（95%CI）： 1.011（1.002~1.020）, P=0.017]、 糖尿病[OR(95%CI)： 2.375 （1.414~3.989）, P=0.001]及 graft-PCI[OR （95%CI）： 1.873 （1.090~3.219）, P=0.023]是影响桥血管介入治疗预后的独立危险因素。结论 CABG 术后桥血管病变原位血管介入治疗组临床预后明显优于桥血管介入治疗组; 桥龄、 糖尿病及 graft-PCI 是影响桥血管介入治疗临床预后的独立危险因素。     

健骨颗粒治疗绝经后骨质疏松症随机对照双盲双模拟多中心临床试验

目的:考察健骨颗粒治疗妇女绝经后骨质疏松症的疗效,评价其有无开发成治疗绝经后骨质疏松症中药新药的可能性。方法:随机、双盲、双模拟、多种心研究方法。受试者均服用乐力钙250mgbid作为基础用药,再分别服用健骨颗粒5gBid、骨松宝颗粒5gBid、安慰剂颗粒5gBid,共6m。意向性数据集(ITT)样本144例,其中健骨颗粒组48例,骨松宝组48例,空白组48例。符合方案数据集(PP)样本108例,其中健骨颗粒组37例,骨松宝组36例,空白组35例。评价指标为脊柱、股骨颈及Wards区骨密度改善情况。结果:L2~L4骨密度治疗后骨松宝组及健骨颗粒组较治疗前都有增加(骨松宝组P=0.017,健骨颗粒组P=0.006),安慰剂治疗前后骨密度无明显变化;股骨颈及Wards区骨密度各组均无明显增加。三组间骨密度改善情况变化无统计学差异。结论:健骨颗粒和骨松宝对妇女绝经后骨质疏松的治疗作用相似,与乐力钙胶囊联用均能改善椎体骨密度。单独使用乐力钙胶囊能维持骨密度。     

晚期肝细胞癌免疫治疗的相关不良反应

目的 探讨晚期肝细胞癌患者采用免疫检查点抑制剂治疗时出现免疫相关不良反应的概率及应对以及对疗效的影响。方法 回顾性分析收治的、接受以PD-1/PD-L1抗体或联合CTLA-4为基础治疗的晚期肝细胞癌患者的临床特点、不良反应发生率,及应对措施,并通过电话、微信等方式进行随访。结果 63例患者中,男54例,女9例;中位年龄54(33～82)岁。单用PD-1/PD-L1抗体者13例,联合仑伐替尼者14例,联合阿帕替尼者23例,联合贝伐单抗者9例,联合卡培他滨者4例;其中一线接受以PD-1抗体为基础治疗者40例,二线者为14例,三线及以后9例。63例患者中23例患者乙肝病史>20年,11例患者乙肝病史10～20年,乙肝病史10年以下者26例;另有2例为丙型肝炎患者,1例无病毒性肝炎病史。63例患者中完全缓解3例,部分缓解14例,疾病稳定31例,疾病进展15例,客观有效率为26.9%,疾病控制率为76.2%。治疗过程中不良反应整体发生率为77.8%(49/63),其中3～4级不良反应发生率为15.8%(10/63),免疫相关不良反应发生率为53.9%(34/63),其中3～4级免疫相关不良...     

以肢体瘫痪为主要表现的软骨发育不全患儿1例

男, 8个月, 因肢体活动减少4 d于2021年9月26日就诊我院, 病程中无惊厥、尿潴留、呼吸暂停及呕吐等症状。患儿系G1P1, 足月顺产, 出生体质量3.8 kg, 无窒息及外伤史, 起病前发育正常。患儿父母否认家族遗传病史。入院体格检查:生命体征平稳, 神清, 反应可;体重7.5 kg(<-1s), 身长64 cm(-3s), 头围49 cm(>+3s);前囟平软(3 cm × 3 cm), 前额突出, 鼻梁塌陷, 四肢短小;肌力:右上肢Ⅱ级, 右下肢Ⅲ级, 左上肢Ⅲ级, 左下肢Ⅳ级, 四肢肌张力低, 右侧桡骨膜、肱二头肌及肱三头肌反射减弱, 双侧巴氏征阳性, 右侧踝阵挛阳性。入院辅助检查:肝功能、肾功能、脑脊液常规及生化、心脏彩色多普勒超声、头颅MRI检查均未见异常;脊柱MRI提示枕骨大孔狭窄, 延髓受压, 颈髓信号异常, 胸腰椎以胸12、腰1椎体为中心向后凸出(图1A);骨盆X射线摄片提示方形髂翼, 坐骨切迹变小呈鸟嘴状, 髋臼扁平, 双侧股骨近端干骺端膨大增宽(图1B)。入院基因检测:全外显子组测序(whole exome sequencing, WES)结...     

人不同部位泪道黏膜及上皮干细胞的免疫组织学研究

摘要:目的 了解人各段泪道黏膜及上皮干细胞的解剖及免疫学特征。方法 从捐献尸体取泪道组织,显微镜下解剖获得厚约1mm 的泪道黏膜及黏膜下组织,将不同部位的泪道黏膜组织制成病理切片,行苏木精-伊红(HE)染色及VIM、p63α、c-Kit、CK19、PCK 染色。显微镜下观察染色情况。结果 人的上下泪点、上下泪小管、泪总管这几个部位的HE染色表现一致,显示其黏膜上皮为复层扁平上皮,表层细胞为扁平状,中间的数层细胞为多角形,最深层的基底细胞为矮柱状。泪囊和鼻泪管的 HE染色表现一致,显示其黏膜上皮为两层,表层的柱状上皮和基底层的扁平上皮。不同部位的泪道黏膜免疫荧光染色均显示:上皮细胞全层 PCK 及 CK19染色阳性,c-Kit及 VIM 染色阴性;基底层细胞p63α染色阳性。结论 人的上泪道与下泪道的黏膜组织结构不同,但其黏膜上皮基底层细胞均 p63α染色阳性,为潜在的上皮干细胞。