构建稳定表达RFP及嘌呤霉素抗性的K562细胞株

目的 构建稳定表达红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)和嘌呤霉素(puromycin)抗性的K562-PM-RFP细胞株,便于慢性粒细胞性白血病研究中K562细胞的观察和筛选.方法 采用PCR法获得RFP片段,将其插入到慢病毒pGC-FU-3FLAG-IRES-Puromycin 载体...     

儿童代谢综合征患儿血清中炎症因子hs-CRP、IL-6、TNF-α的变化及意义

目的了解正常、超重和肥胖儿童中代谢综合征(metabolic syndrome,MS)的流行特征及MS诊断指标异常儿童血清中炎症因子水平的变化及意义。方法从重庆市区选取6所小学,用完全随机方法从各年级抽取2个班,对选中班级的所有学生进行体检,共1 941例,依据2004年中国肥胖问题工作组制定的中国学龄儿童青少年超重、肥胖分类标准,筛选出所有肥胖儿童54例,抽取超重儿童77例,正常儿童72例纳入研究对象,再依据修正的Cook儿童MS诊断标准将研究对象分为3组:正常儿童(74例)、异常非MS儿童(106例)、MS儿童(23例)。常规测量其身高、体质量、腰围、血压,取空腹静脉血检测其空腹胰岛素、血糖和血脂,ELISA方法测定血清中超敏C反应蛋白(hs-CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果肥胖儿童中MS的发生率为27.78%(15/54),超重儿童中MS的发生率为10.39%(8/77),正常儿童中没有出现MS,超重和肥胖儿童中MS发生率差异具有统计学意义(P<0.01)。MS儿童血清hs-CRP、IL-6水平[分别为(1.45±1.75)mg/ml、(4.84±0.60)pg/ml]高于异常非MS组[(0.71±1.11)mg/ml、(1.71±1.10)pg/ml],异常非MS组血清hs-CRP、IL-6浓度也显著高于正常儿童组[分别为(0.34±0.60)mg/ml、(1.35±0.70)pg/ml],3组间血清中的TNF-α水平无明显差异(P>0.05)。结论随着体质量增加,MS的发生率显著增加,MS诊断阳性指标数量越多血清中的炎症因子hs-CRP、IL-6水平越高,hs-CRP及IL-6是导致MS发生的显著危险因素。     

边缘性维生素A缺乏及干预对幼鼠海马神经元形态与功能的影响

目的了解胚胎期开始的边缘缺乏(MVAD)对幼鼠海马神经元的形态及功能造成的损害,以及从新生儿期开始维生素A干预,能否使这种损害得以恢复。方法 11只健康母鼠于交配前3 w开始喂饲含VA 400 IU/kg的MVAD饲料,随机抽取其子鼠19只于断乳后继续喂饲同样的MVAD饲料为VAD组。另外随机抽取13只子鼠于出生0 d开始喂饲其母鼠含VA 6500 IU/kg的正常饲料,断乳后继续饲正常饲料为干预(VAI)组。随机抽取7只健康母鼠的10只子鼠作为正常对照(control,C)组,其饲料为含VA 6500 IU/kg的正常饲料。各组幼鼠均于7 w龄处死。用高效液相色谱法(HPLC)检测血清VA浓度。对海马切片进行HE染色,了解其神经元形态及细胞核大小的改变。运用电生理技术检测幼鼠离体海马脑片CA1区长时程增强(LTP),并在VAD组人工脑脊液(ACSF)中直接加入视黄酸(RA)后检测LTP。用透射电镜观察强直刺激前后,海马CA1区突触超微结构的变化。结果 MVAD孕鼠交配时血清VA浓度明显低于对照组。VAD组血清VA浓度明显低于C组,VAI组的血清VA浓度低于C组水平,但明显高于VAD组。海马CA1区锥体细胞层神经元细胞核的面积,VAD组明显小于C组,VAI组大于VAD组,与C组比较无明显差别。C组海马CA1区群峰电位增长幅度明显大于VAD组,VAI组小于C组,大于VAD组(P<0.05);VAD组脑片的ASCF中加入RA,其群峰电位增长幅度由(22.86±3.26)%上升到(59.08±7.22)%(P<0.01),与C组无显著差异。强直刺激后的C组与空白对照组(BC)比较,其海马CA1区突触的活性区长度和突触后致密物(PSD)厚度均明显增加,突触界面模拟圆半径明显减小,突触间隙宽度没有明显差异;强直刺激后,C组突触活性区长度明显大于VAD组,与VAD+RA组比较无显著差异,C组和VAD+RA组的突触界面模拟圆半径小于VAD组。结论 MVAD可导致少量CA1区神经元缺失和坏死,并减小了海马神经元细胞核的面积。同时直接影响海马神经元LTP的诱发,以及减小了LTP诱发后突触超微结构变化的程度。新生儿期开始的VAI可使MVAD对海马神经元的影响得到部分恢复。     

孤独症谱系障碍患病率性别偏倚影响因素研究进展

孤独症谱系障碍(autism spectrum disorders,ASD)患病率存在明显的性别偏倚,国内外调查显示男女患病比例平均约为4∶1。ASD性别偏倚影响因素的研究旨在为ASD的预防及治疗提供理论依据。     

骨髓间充质干细胞向神经细胞定向分化的体外研究

目的　探讨骨髓间充质干细胞( marrow stromal stem cells,MSCs)向神经细胞定向分化中神经蛋白分子的表达情况。　方法　取第5～7代体外培养Wistar大鼠MSCs,以0 .5μmol/ L全反式视黄酸( all- trans retinoidacid,ATRA)预诱导2 4 h后,换用改良神经细胞培养基( modified neuronal medium,MNM)继续培养。在ATRA作用2 4 h及MNM作用2、6、9、18及36 h,免疫组织化学检测巢蛋白( Nestin)、神经元特异性核心抗原( neuron- specificnuclear protein,Neu N)、微管相关蛋白2 ( microtubule- associated protein 2 ,MAP- 2 )和胶质纤维酸性蛋白的表达情况。　结果　ATRA和MNM作用后,MSCs呈典型神经元样,伸出较多的突起和分支,形成网络。Nestin最先表达,ATRA作用2 4 h出现,Neu N其次,MNM作用2 h检测到,MAP- 2最晚,MNM作用9h检测到。Nestin在MNM作用18h后表达最强,其阳性率为92 .3%±3.4 % ;36 h后表达明显减弱,阳性率仅为12 .3%±3.4 % ,而其它标志蛋白则持续表达。　结论　ATRA和MNM能促进MSCs向神经前体细胞和神经元转化,神经蛋白分子的表达顺序与神经细胞发育过程一致,为研究神经细胞发育提供了一个较好的体外模型     

西部地区实施营养教育策略探索

开展营养科学研究的根本目的是提高人类的健康水平[1].因此,营养工作者应该把研究成果推广应用到人民群众的日常生活中去,大力开展营养教育,提高人民群众的营养知识水平,增强他们的营养意识,培养他们健康的营养行为.然而,能否开展好营养教育,受主客观多方面因素的制约.在西部不发达地区,经济文化水平相对较低,人们的营养知识较为匮乏,营养意识较为淡薄.同时,营养教育的人员不足,尚未建立健全社区营养教育工作网络,各种营养教育的硬件建设也不完善.重庆医科大学的营养学专业人员认识到在这一地区开展营养教育的必要性和紧迫性,在营养教育过程中做到营养教育与强化食品干预相结合、与当地实际相结合,有重点、有评价,多方参与、多层次、多形式,取得了一定的效果.     

大剂量维生素A和每周补铁改善学前儿童贫血的研究

目的 :比较铁和维生素A缺乏同时存在地区 ,大剂量补充VA和每周补铁在改善儿童贫血方面的效应。方法 :将筛选出的铁和 /或维生素A缺乏儿童随机分成三组 ,每周分别给予 5 0 0 0 0IU维生素A胶丸、6 0mg元素铁和 10mg维生素B1(对照组 ) ,干预第 5周和第 2 0周观察Hb、血清VA的变化情况。结果 :干预前后 ,补铁组和补VA组 ,Hb值分别升高了 10 4g/L和 8 9g/L ,与对照组比较有显著性差异 ;补维生素A组和补维生素B1组血清VA分别上升 0 137μmol/L、0 10 3μmol/L ,而补铁组血清VA补充前后差异无显著性。结论 :贫血和VA缺乏同时存在地区 ,口服大剂量VA具有同时改善铁和VA营养状况的作用 ,其改善贫血作用与每周补铁类似     

重庆市儿科卫生资源合理性研究

卫生资源配置是卫生事业可持续发展的基础,也是保证卫生系统绩效达标的必要条件,其配置合理性是衡量卫生资源分配是否合理的重要依据,是实现卫生服务利用合理性的前提条件,直接关系到人民群众的健康权益和卫生利益[1-2]。2009年国务院印发的《医药卫生体制改革近期重点实施方案(2009-2011年)》强调促进基本公共卫生服务逐步均等化,强化区域卫生规划。为了解重庆市儿科卫生资源配置的合理性,本文利用基尼系数(Gini coefficient)和洛伦茨曲线(Lorenz curve)对重庆市"十一五"末各区县儿科卫生人力资源的人口和地理分布进行分析,从而为重庆市儿科区域卫生规划提供科学依据。     

案例为基础的临床教学查房模式改革的实践研究

临床教学查房是培养医学生临床观察、诊疗、思维和决策以及学习处理医患关系的重要环节。传统的教学查房多以教师讲解为主,辅以问诊与查体纠错,结合患者实际情况对疾病诊断与鉴别诊断进行分析、讲解,介绍学科进展等,学生除汇报病史外,基本处于被动接受状态,尽管也有启发式提问,但仍未摆脱灌输式教学模式的桎梏。本研究旨在探索案例教学法     

重庆市巴南地区学龄前儿童维生素A营养状况与红细胞生成素水平的关系

目的 了解重庆市巴南地区学龄前儿童的维生素A(vitamin A, VA)营养状况,全血中血红蛋白(hemoglobin, Hb)及红细胞生成素(erythropoietin, EPO)的水平,进一步探讨VA缺乏与贫血的相关机制.方法 采用分层与整群抽样相结合的方法,在重庆市巴南区鱼洞镇7所规模>200名的幼儿园中随机选取3所中的所有3~6岁符合纳入标准的349名学龄前儿童.采用反相高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography, HPLC)测静脉血中血清VA浓度,化学发光免疫测定法测定EPO浓度,氰化高铁法测量Hb浓度,并分析相关性.结果 该地区学龄前儿童VA缺乏、边缘型VA缺乏及贫血发生率分别为1.72%、22.64%和22.64%;VA缺乏较VA正常儿童贫血的发生率有显著性差异(P<0.05),VA缺乏儿童的贫血发生率是VA正常儿童的2.32倍.Hb水平与EPO浓度呈显著性负相关(P<0.01).贫血儿童较正常Hb水平儿童,EPO有显著差异(P<0.05).在贫血儿童中,低VA水平(vitamin A<1.05 μmol/L)儿童Hb浓度与EPO水平呈较强负相关(r=-0.46,P<0.05);在总体学龄前儿童中,低VA水平较VA正常儿童Hb浓度与EPO水平有较强的负相关性(r=-0.23,r=-0.16,P<0.05),Lg(EPO)与Hb回归方程斜率低VA较VA正常儿童增加0.000 2.结论 机体VA的营养水平影响Hb浓度对EPO的反馈性调节作用.