种植自体脂肪干细胞的可吸收性细胞支架移植行兔阴茎增粗术的安全有效性研究

目的 观察自体脂肪干细胞(adipose derived stem cell,ADSC)种植可吸收性细胞支架对小阴茎增粗安全性和有效性.方法 45只雄性成年新西兰白兔随机分为假手术对照组(A组)、单纯Maxpol-T移植组(B组)和种植自体ADSC的Maxpol-T移植组(C组).静脉麻醉后取腹膜后脂肪组织,体外分离、鉴定和扩增ADSC并种植于可吸收性细胞支架Maxpol-T后,移植入兔阴茎皮下深筋膜和白膜之间.术后6个月评估阴茎增粗的效果及其安全性和有效性.结果 ADSC培养后流式鉴定结果CD34(+),CD90(+),CD105(+),CD133(+),CD13(-),CD45(-).移植术后6个月,三组均未发生支架排斥及炎症反应,A组无明显组织再生变化(P＞0.05),B组阴茎直径较A组无明显差异(P＞0.05),C组阴茎直径较A组和B组增粗效果显著(P＜0.001).局部组织病理学结果可发现增生组织及新生血管.结论 应用自体ADSC种植可吸收性细胞支架后植入成年新西兰白兔阴茎皮下,可安全有效地增生阴茎皮下局部组织,无明显排斥和炎症反应.     

淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ对内皮细胞eNOS表达和NOS活性的影响

目的：用过表达表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）的猪动脉内皮细胞（porcine aorta endothelial, PAE）作为研究对象,探讨淫羊藿苷(icariin)和淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ)对PAE中内皮型一氧化氮合酶（endothelial nitric oxide synthase, eNOS)表达和一氧化氮合酶(nitric oxide sythase, NOS)活性的影响及其可能机制。方法：利用PAE中转染EGFR并筛选稳定株, 分别用12.5 μmol/L的淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞48 h,观察各组细胞eNOS的表达变化;另在淫羊藿苷或淫羊藿次苷Ⅱ处理PAE和PAE-EGFR细胞时,分别加入表皮生长因子（epidermal growth factor, EGF）共同处理细胞,观察各组细胞eNOS的表达变化;检测淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理前后PAE和PAE-EGFR细胞NOS的酶活性改变,并以西地那非作为对照。结果：Western blot显示PAE-EGFR细胞表达eNOS的基础值要比PAE细胞高,淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ处理时PAE和PAE-EGFR细胞株中都能引起eNOS表达增加,并且在PAE-EGFR稳定株中eNOS的表达量比PAE细胞明显提高(P<0.01);在表达EGFR的PAE-EGFR细胞中,当淫羊藿次苷Ⅱ的浓度达到10^-8 mol/L时,NOS活性增加到(15.37±1.49) u/mg ,比PAE细胞高4.66 u/mg。在药物浓度达到10^-7,10^-6和10^-5 mol/L时,淫羊藿次苷Ⅱ对PAE-EGFR细胞NOS活性的影响较PAE细胞显著增加(P<0.01);淫羊藿苷也能增加PAE和PAE-EGFR细胞的NOS酶活性,但是其效果比较淫羊藿次苷Ⅱ组平均低20%,而西地那非没有显著影响NOS酶活性。 结论：淫羊藿苷和淫羊藿次苷Ⅱ可上调PAE和PAE-EGFR细胞eNOS的表达和提高NOS活性,对血管内皮细胞功能可能具有改善作用,而且淫羊藿次苷Ⅱ的效果优于淫羊藿苷,其作用机制可能与激活PAE细胞的EGF-EGFR信号通路有关。     

益脾补肾方改善肥胖2型糖尿病小鼠生精功能障碍作用及机制

目的 观察益脾补肾方改善肥胖2型糖尿病小鼠生精功能障碍的作用，并探讨其作用机制。方法将30只4周龄健康C57BL/6J雄性小鼠随机分为对照组、模型组、益脾补肾方低剂量组（低剂量组）、益脾补肾方高剂量组（高剂量组）、二甲双胍组，每组6只。对照组给予普通饲料，其余各组给予高脂饲料喂养16周，建立肥胖2型糖尿病小鼠模型。低、高剂量组给予益脾补肾方2、4 g/（kg·d），二甲双胍组给予二甲双胍200 mg/（kg·d）灌胃，模型组和对照组灌胃等量的生理盐水，连续灌胃30天。干预前后进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）和胰岛素耐量试验（ITT），计算曲线下面积（AUC）；观察睾丸形态，测量小鼠重量并计算睾丸脏体比；HE染色观察睾丸形态变化；检测精子参数以及空腹血糖（FBG）;ELISA法检测血清中睾酮（T）水平；比色法检测血清中总超氧化物歧化酶（T-SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的变化；Western Blot检测脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)表达。结果 对照组小鼠睾丸组织结构清晰，生精小管内各级生精细胞排列整...     

糖尿病大鼠膀胱时间依赖性功能和形态学变化

目的：为了研究糖尿病(DM)患者膀胱功能失代偿期的变化，我们在链脲佐菌素(STZ)诱导的大鼠模型中评估了DM大鼠失代偿期的病理生理特征。方法：雄性Wistar大鼠腹腔注射STZ(55 mg/kg)建立DM模型。通过尿流动力学实验检测DM大鼠膀胱功能；通过HE染色观察膀胱上皮结构变化；采用Masson染色和Western blot研究膀胱逼尿肌病理改变和肌肉含量变化；利用天狼星红染色，改良Gordon-Sweet染色和弹性纤维染色检测膀胱细胞外基质(ECM)纤维成分的变化。结果：膀胱尿流动力学结果显示，DM大鼠(STZ注射后3个月)排尿频率下降，膀胱容量增加，膀胱顺应性下降，随着DM时间进一步增加(STZ注射后5个月)，膀胱功能进一步下降。HE染色结果提示，5个月DM大鼠膀胱上皮褶皱减少，黏膜固有层变薄，膀胱上皮结构缺陷更加明显。膀胱Masson染色和Western blot结果显示，3个月DM大鼠逼尿肌体积明显缩小，肌束排列紊乱，膀胱组织α-平滑肌肌动蛋白含量显著降低。膀胱ECM纤维的病理学染色显示，DM大鼠膀胱中胶原纤维、网状纤维和弹性纤维的结构断裂，含量均减少，且在5个月DM的变化...