靶向人SIRT1基因的shRNA真核表达质粒的构建及鉴定

目的构建针对人SIRT1基因的shRNA真核表达质粒,并筛选出对胰腺癌细胞系PANC-1基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体。方法针对SIRT1基因的mRNA序列设计,分别构建3个shRNA质粒表达载体和1个阴性对照质粒表达载体,经大肠杆菌扩增,酶切,PCR,测序鉴定,转染胰腺癌PANC-1细胞,实时荧光定量PCR和Western blot检测SIRT1 mRNA和蛋白的被抑制情况。结果经测序证实,成功构建SIRT1-shRNA真核表达质粒,插入的DNA片段的序列与设计序列完全一致。重组质粒转染PANC-1细胞后,SIRT1 mRNA和蛋白水平明显下调;其中以1号重组质粒效应最强。结论成功构建了携带以SIRT1为靶向的shRNA的重组质粒。其对胰腺癌PANC-1细胞SIRT1的表达具有显著抑制效应。该实验为进一步研究SIRT1的功能和肿瘤的基因治疗提供了实验基础。     

翟惟凯运用经方治疗慢性肾脏病经验

<正>翟惟凯主任中医师为江苏省名中医,曾师从于我国著名中医肾病专家、上海中医药大学肾病治疗中心主任张天教授,深得真传,为第二批江苏省名老中医专家学术经验继承工作指导老师。翟老治学严谨,精于临床,从事肾脏病工作50余载,善用经方治疗慢性肾衰、糖尿病肾病、肾病综合症等疾病,效如浮鼓。笔者有幸跟随     

上海市嘉定区2373名社区老年人社会支持情况及其影响因素分析

目的了解上海市嘉定区社区老年人社会支持的现状及其相关因素。方法采用多阶段抽样方法,调查上海市嘉定区65岁以上社区老年人2373名,采用自编调查问卷了解基本人口学资料、生活习惯资料及慢性病情况,采用社会支持评定量表(SSRS)了解社会支持情况,并将所有问卷调查资料进行统计分析。结果上海市嘉定区的男性老年人、女性老年人在客观支持维度、主观支持维度、社会支持利用度维度和社会支持量表总分方面均低于全国常模,差异具有统计学意义(t男=-145.44、-12.11、-13.75、-36.32,P0.01;t女=-143.75、-19.94、-21.29、-44.97,P0.01)。不同性别(t=4.88,P0.01)、年龄(F=94.66,P0.01)、文化程度(F=59.68,P0.01)、职业性质(t=7.89,P0.01)、宗教信仰(t=-3.27,P0.01)、运动习惯(t=6.52,P0.01)、业余爱好(t=5.32,P0.01)、作息规律(t=-5.49,P0.01)和不同养老形式(F=10.15,P0.01)的社区老年人在社会支持总分方面差异具有统计学意义;而民族(t=0.93,P0.05)、烟酒习惯(t=1.42,P0.05)、有无慢性病(t=1.20,P0.05)等方面不同的老年人之间的差异无统计学意义。多元逐步回归分析提示,性别、年龄、有无固定经济来源、职业性质、是否运动、养老形式、作息规律、宗教信仰等因素对嘉定区社区老年人社会支持有显著作用。结论社区老年人社会支持与性别、年龄、经济来源、原职业性质、作息习惯以及宗教信仰等因素有关,应通过构建政府-社区-家庭一体化的社区老年人服务体系,全方位关注社区老年人,改善老人的社会支持系统,有助于老人能够感受、利用更多的社会支持。     

α-干扰素治疗儿童喉乳头状瘤（附61例报告）

目的探讨α-干扰素应用于儿童喉乳头状瘤治疗的疗效。方法随机将湖南省儿童医院耳鼻咽喉-头颈外科2008年10月～2010年10月诊治的61例喉乳头状瘤患儿分为2组。α-干扰素治疗组31例,其中男性23例,女性8例,年龄1～6岁,平均年龄2岁;单独手术治疗组30例,其中男性20例,女性10例,年龄1～8岁,平均年龄2岁。对所有患儿做支撑喉镜或喉显微镜治疗,α-干扰素治疗组加用α-干扰素治疗。疗程结束后总结并对比分析两组患儿疗效。结果α-干扰素治疗组有效率为61%,单纯手术治疗组有效率为33%;两组比较,α-干扰素治疗组疗效明显增高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论单纯手术治疗儿童喉乳头状瘤,疗效差,复发率高,辅以α-干扰素综合治疗,疗效明显改善,值得临床推广。     

无创性动脉硬化检测技术在高血压肾病中的评估价值

目的探讨无创性动脉硬化检测指标[颈动脉内中膜厚度(carotid intima-media thickhess,IMT),踝臂指数(ankle brachial index,ABI)及心脏-脚踝血管指数(cardio-ankle vascular index,CAVD]在高血压肾病中的评估价值。方法选择2010年1月至2014年1月在我院经病理检查确诊为高血压肾病的46例患者作为高血压肾病组,另按数字表法随机选取高血压患者50例及健康人群50名分别为高血压组和健康对照组,比较IMT、ABI和CAVI。尿微量白蛋白/尿肌酐比值(urinary albumin-creatinine ratio,ACR)、尿β微球蛋白(urinary beta 2 microglobulin,β2-MG)、估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)的差异。结果高血压肾病组ACR、尿β2-MG、IMT、CAVI均较高血压组、健康对照组增高,差异有统计学意义(P0.01)。高血压组ACR、尿β2-MG、IMT、CAVI均较健康对照组增高,差异有统计学意义(P0.05)。高血压肾病组eGFR及ABI较高血压组及健康对照组下降,差异有统计学意义(P0.01)。高血压组ABI较健康对照组下降,差异有统计学意义(P0.05)。高血压组和健康对照组eGFR差异无统计学意义(P0.05)。随着高血压病情进展及动脉硬化程度加重,IMT、CAVI与肾功能下降呈负相关,ABI与肾功能下降呈正相关,可见动脉硬化程度与肾功能水平密切相关。结论及早应用无创动脉硬化检测技术于高血压患者,并使用此检测手段监测血管硬化情况,并予相关药物干预,或许可延缓高血压病情的进展。     

固定矫治中左右两侧牙齿釉质脱矿及牙周指数的差异比较

对100例错颌患者进行直丝弓矫治,比较左右两侧牙齿的牙釉质脱矿程度及牙周指数的差异。在正畸矫治过程中,个人刷牙习惯显著影响刷牙的效果,导致左右两侧牙釉质脱矿具有差异性。     

美托洛尔对心力衰竭大鼠血流动力学及 Bcl－2、Bax 蛋白表达的影响

目的：探讨不同剂量美托洛尔（ Meto）对心力衰竭大鼠血流动力学及凋亡相关蛋白Bcl－2、Bax表达的影响。方法 SD大鼠100只随机分为5组（n＝20）：sham组不结扎腹主动脉,其余操作同HF组;HF组次全结扎腹主动脉;Meto小剂量组、Meto中剂量组、Meto大剂量组大鼠次全结扎腹主动脉术后第4周开始给Meto,剂量依次为1.25、5、20 mg／（ kg· d）,至第8周。术后第8周测定有创血流动力学指标后取材称量全心湿重（ HW）、全肺湿重（ LW）,计算心重指数（全心重量／体重,HW／BW）、肺重指数（肺重／体重比,LW／BW）,Western blot检测心肌抗凋亡基因Bcl－2与促凋亡基因Bax蛋白表达水平。结果 Meto各剂量组大鼠右心室收缩压（ LVSP）及左心室压变化速率最大值（±dp／dt max）较HF组升高（P＜0.01）,Meto各剂量组左心室舒张压（LVDP）、左室舒张末期压（LVEDP）及－dp／dt max较HF组降低（P＜0.01）,Meto大剂量组LVSP较Meto小剂量组、Meto中剂量组明显降低（P＜0.01）,Meto大剂量组＋dp／dt max较Meto中剂量组明显降低（P＝0.002）;而Meto大剂量组＋dp／dt max与Meto小剂量组比较, Meto大剂量组LVDP、LVEDP及－dp／dt max与Meto中剂量组比较差异均无统计学意义（P＞0.05）。 HW／BW随Meto治疗剂量的增加逐渐降低（P＜0.01）;Meto中剂量组LW／BW较Meto小剂量组降低（P＝0.003）,而Meto大剂量组LW／BW则较Meto中剂量组有所上升（P＝0.000）。 HF组大鼠心脏Bcl－2／Bax比值较sham组降低（P＜0.05）,而随着Meto治疗剂量的增加Meto各剂量组的Bcl－2／Bax比值较HF组逐渐增加。且小剂量组比值与sham组相当,中剂量组出现比值翻转。结论中剂量Meto治疗在HF大鼠中可在获得解剖病理和抗凋亡获益的同时,保证最大的血流动力学获益,而大剂量Meto治疗则可能限制心功能进一步改善。     

术前病理联合血清CA125诊断子宫癌肉瘤的价值

目的：探讨宫腔镜下活检、诊断性刮宫两种术前病理检查方法联合血清CA125在子宫癌肉瘤诊断中的价值。方法收集2000年1月至2012年1月广东省子宫内膜癌防治项目资料相对完整,经手术病理确诊的子宫癌肉瘤患者106例,对其术前检查方法进行回顾性分析。结果（1）术前行诊断性刮宫74例,组织病理学报告为子宫癌肉瘤、其他子宫恶性肿瘤、子宫内膜不典型增生分别占35.1％、52.7％、9.5％;宫腔镜下活检11例,病理报告为子宫癌肉瘤、其他子宫恶性肿瘤、子宫内膜不典型增生分别占36.4％、45.5％、9.1％。术前诊断性刮宫与宫腔镜下活检两种方法诊断子宫癌肉瘤的符合率比较差异无统计学意义。（2）无附件转移者,术前血清CA125升高者占23.5％,有附件转移者术前CA125升高者占75.0％,两者比较差异有统计学意义,术前血清CA125升高与附件转移有关（P＝0.002）。结论诊断性刮宫、宫腔镜下活检诊断子宫癌肉瘤的准确性相近;术前组织学报告大多能诊断为恶性肿瘤,但组织学分类误诊率高。术前血清CA125升高患者,应警惕附件转移的可能性。     

正常老年人主要脑功能区血流灌注的3D-ASL初探

[目的]用三维动脉自旋标记(three dimensioned arterial spin labelling,3D-ASL)对正常老年人主要脑功能区进行MR灌注成像,探索其局部血流灌注范围,为老年人脑功能区血流灌注研究提供参考。[方法]对32例正常志愿老年人(年龄60~68岁)进行MRI常规扫描和3D-ASL灌注扫描,获得血流量图,分别测得双侧初级躯体运动区、初级躯体感觉区、听觉区、视觉区、运动性语言中枢、听觉性语言中枢、视觉性语言中枢、书写性语言中枢的脑血流灌注量(cerebral blood flow,CBF),进行统计分析。[结果]颅脑各部位血流灌注量[单位:m L/(min·100 g)]分别为:初级躯体运动区59.22±12.72、初级躯体感觉区62.28±14.97、视觉区66.75±13.54、听觉区53.64±12.71、运动性语言中枢66.64±12.65、听觉性语言中枢54.56±11.32、视觉性语言中枢58.37±13.24、书写性语言中枢61.64±12.71。男性与女性的血流量未见明显差异(P0.05)。[结论]3D-ASL灌注成像能定量测量老年人脑功能区血流量;作为一种无创的血流动力学检查新技术,3D-ASL对脑血流灌注的研究有着较高的应用价值。